"NUGC-4 epithelioid cells人胃癌細胞系
細胞背景資料:胃癌;女性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
LTEP-sm 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono-Mac-6細胞、UPCI-SCC-090細胞、SNU-475細胞
MDAPCa2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE3細胞、JM1細胞、Lieming Xu-2細胞
V 79-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs 74 Int細胞、K 562細胞、AU-565細胞
細胞生長:貼壁
NUGC-4 epithelioid cells人胃癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
NCI-H865細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-6細胞、AZ-521細胞、SU-DHL-2細胞
HO8910PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGBC-11-TKB細胞、SK.MEL.5細胞、NCI-H220細胞
bEnd3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-7細胞、T 98 G細胞、HEL9217細胞
HUSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-847細胞、Hep G2細胞、COLO 320F細胞
SF-539 BT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL1細胞、Liver-02細胞、RMC細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NUGC-4 epithelioid cells人胃癌細胞系
細胞生長特性:半貼壁
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
BALB 3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG-63細胞、PL45細胞、TM-3細胞
Lieming Xu-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC細胞、H810細胞、U251n細胞
MUM2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL4細胞、H-187細胞、KP-N-RT-BM-1細胞
CCD-18Co細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TW 01細胞、NCI-157細胞、A2780 CP70細胞
Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FU-97細胞、OCM-1細胞、WM-451Lu細胞
H-1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV 1063細胞、ZR75_1細胞、C-Lu65細胞
Strain KB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:6-T CEM細胞、RPMI 8226細胞、H-1792細胞
NCIH2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OK細胞、RCC-JF細胞、HMrSV5細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM17219細胞、UACC-812細胞、D-324 Med細胞
CAL 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK2細胞、HO8910/PM細胞、IPLB-SF 21細胞
NUGC-4 epithelioid cells人胃癌細胞系
High 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 327細胞、MA104細胞、MKN7細胞
Hs 895.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 79細胞、SRA01/04細胞、HOP 92細胞
SK-OV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-239-A細胞、TCMK1細胞、NCIH2405細胞
P3/NS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3LL細胞、SUM-102PT細胞、IPLB-Sf21細胞
HCC-2279細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAEC細胞、UMRC2細胞、UO31細胞
NIH:OVCAR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag8.653細胞、QBI-HEK 293A細胞、IEC-6細胞
NIH:OVCAR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag8.653細胞、QBI-HEK 293A細胞、IEC-6細胞
PLMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 clone 30, subclone 7b細胞、HTh-74細胞、L(TK-)細胞
3T3-442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-MeWo細胞、PANC 327細胞、RKO-AS45-1細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCKII細胞、NCI-HUT-596細胞、SK-ES細胞
SW 1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLE12細胞、NB19細胞、R2C細胞
Medical Research Council cell strain-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH441細胞、T24(ECV304)細胞、H4-II-E-C3細胞
OV-1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C127細胞、SKMES1細胞、HCT-15細胞
MDA1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-549細胞、CEM/C1細胞、MN-60細胞
MV-4-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-3細胞、SPC-A1細胞、UACC-893細胞
CBRH7919細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP100細胞、MDA-PCa-2b細胞、BT 325細胞
WIL2S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW細胞、HOC細胞、SF-539細胞
Reuber-H-35 hepatoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1588細胞、MPC5細胞、SW-527細胞
RPMI-6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG3A細胞、MC-116細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞
MC116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs839.T細胞、SCaBER細胞、IHHA-1細胞
OVTOKO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-65細胞、Tn 5B1-4細胞、ketr 3細胞
28SC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-ESF-1細胞、HEC1A細胞、COLO201細胞
D-324MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 539細胞、A-875細胞、OE-33細胞
Rca-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GT39細胞、MDA-MB 231細胞、NCI-H1792細胞
D-283MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 Ad5細胞、KMS-18細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞
HS 1.Tes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCFs細胞、NCI-747細胞、NCI-H-69細胞
SW756細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-M14細胞、7860細胞、CAL120細胞
PGBE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Simpson細胞、Clone 15 HL-60細胞、C6661細胞
A2780/CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGC-27細胞、Hs-746T細胞、SNU-601細胞
DC 2.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:526細胞、HFLS-OA細胞、NBL-S細胞
SU-DHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WiDr-TC細胞、PC3-M細胞、MCA 38細胞
SUM-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG 9細胞、B16/F0細胞、HCC 2185細胞
HSF2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ssMCF-7細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、NCI-H2196細胞
Psi2 DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH128細胞、A9(Hamprecht)細胞、ML2細胞
74Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-BM細胞、H-1581細胞、H6c7細胞
AE 1201細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly10細胞、L-5178-Y細胞、SNU-1040細胞
BrCL12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM2-4175細胞、HM06.A1細胞、EOL1細胞
GM3190細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4-11細胞、C17.2細胞、Hep 3B2.1-7細胞
C4I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V 79-4細胞、SL-1細胞、MUM2B細胞
COV-434細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-1376細胞、PNT-1A細胞、B16BL6細胞
293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI/ADRRES細胞、SKNAS細胞、Vero E-6細胞
Keio University-19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF539細胞、RPMI no 8226細胞、IHH-4細胞
U-373 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-132細胞、Huh7.5.1細胞、GS9L細胞
C4I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V 79-4細胞、SL-1細胞、MUM2B細胞
HCC1438細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE-2細胞、OVCA-433細胞、A-673細胞
GT1-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LY-R細胞、BCaP 37細胞、2B4細胞
MRC9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEB-3細胞、NCI-H226細胞、NCIH510細胞
CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUTU80細胞、HEL-92-1-7細胞、NCI-N87細胞
HCC0015細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV434細胞、IBMF-7細胞、IMCD-3細胞
JeKo-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM2細胞、BCP-1細胞、H1734細胞
YD-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H64細胞、293-FT細胞、MS 751細胞
NUGC-4 epithelioid cells人胃癌細胞系
C33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2B4細胞、B16-F10--RED細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞
HCC-1187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:High 5細胞、Jiyoye(P-2003)細胞、TOV-21G細胞
MM.1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1419細胞、Tu177細胞、TNC-1B12B4細胞
MUM2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL4細胞、OCI/AML-2細胞、EOC 20細胞
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