"RIN-14B epithelioid cells大鼠胰島素瘤細胞系
細胞背景資料：胰島素瘤；雄性；NEDH
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
SKOV3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA 1386細胞、3T3-L1細胞、SW-1088細胞
P3J HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02219C細胞、NCI.H23細胞、MDA-MB-231-luc細胞
PTK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIII細胞、OVCAR3細胞、MDA-MB-435 S細胞
細胞生長：貼壁
RIN-14B epithelioid cells大鼠胰島素瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒炐枰?，必須有所不同時，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應(yīng)后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
VM-CUB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC4細胞、MSCs（mUCMSCs）細胞、SW-948細胞
NCI-H2444細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-5細胞、NCI-H2009細胞、KPL4細胞
AG06814-N細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-838細胞、SKNO1細胞、TE8細胞
H-847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Li-7細胞、ATDC-5細胞、CMECs細胞
RPMI-8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuperTube細胞、ABE8.1/2細胞、HDMEC細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
RIN-14B epithelioid cells大鼠胰島素瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
IEC18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB231細胞、SU-DHL1細胞、QBC-939細胞
P3-X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR 32細胞、SMMC 7721細胞、HCC-15細胞
SKLMS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2D1細胞、ASPC1細胞、16-HBE14o細胞
Panc04.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK92細胞、NF639細胞、Rabbit Kidney 13細胞
U251-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leukemia L1210細胞、DMS-153細胞、CCD33Co細胞
H-1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1/A細胞、SUM-52-PE細胞、Hca-F細胞
Hs888T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4 I細胞、LPC-H12細胞、GOS3細胞
KMB 17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF10A細胞、COV362細胞、SNU216細胞
PTK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCISCC154細胞、CHP 100細胞、GLRK 13細胞
HT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FDC-P1細胞、HEK293EBNA細胞、OK細胞
RIN-14B epithelioid cells大鼠胰島素瘤細胞系
Granta 519細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HET-1A細胞、J 774A.1細胞、Central Adrenergic TH-expressing a細胞
bEND.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATDC5細胞、KP-N-NS細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞
Det 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Loucy細胞、G402細胞、NCI-H1882細胞
GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1373細胞、BSC-40細胞、OCI-LY-7細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLRK 13細胞、EJ1細胞、HTR-8/SVneo細胞
P3X63NS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 30細胞、RSC 96細胞、VP 267細胞
A253細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE-hTERT細胞、ME16C細胞、LED-WiDr細胞
SCLC21H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM-1A細胞、Balb/c3T3細胞、MDA-MB-231 #4175細胞
LC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1836細胞、JB6 clone 30, subclone 7b細胞、CO115細胞
CAL78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE-296細胞、Hs 737.T細胞、OEC19細胞
RK 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2405細胞、HNE3細胞、SNU601細胞
NTERA-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCMK1細胞、FD-LSC-1細胞、NCI-H378細胞
TK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM3細胞、PC-3M細胞、GLC-15細胞
MC/CAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-2058細胞、A 72細胞、WEHI 3B細胞
HUT 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1666細胞、SNU-475細胞、MEG-01細胞
Ocular Choroidal Melanoma-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：XuanWei Lung Cancer-05細胞、A375-SM細胞、CHP 212細胞
RetroPack PT67細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAD109細胞、CAL78細胞、T84細胞
U266S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1細胞、NCI-H2198細胞、SNU-449細胞
SU-DHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WiDr-TC細胞、PC3-M細胞、MCA 38細胞
Toledo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-361細胞、H-295細胞、KP4細胞
Human Embryonic Skin細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BeWo細胞、UMUC3細胞、SUDHL1細胞
NCI-H2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ku812細胞、P30 OHK細胞、SK-NEP-1細胞
PC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lec1細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞、H2141細胞
NCIH460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc02-H0細胞、COLO-357細胞、NCIH292細胞
Hs819.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKO-007細胞、H-524細胞、NCIH2073細胞
YAC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THLE-3細胞、Hu-P-T3細胞、THP 1細胞
HSC-T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs742T細胞、MM6細胞、HOC-1細胞
ARPE-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoCL3細胞、TMK-1細胞、MDA 1386細胞
U-2OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT 112細胞、OLN93細胞、NS653細胞
293EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-3573細胞、A375-MEL細胞、Hs-281-T細胞
NTERA2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-4細胞、NK-92 MI細胞、SW 1353細胞
HFL-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tregs細胞、HT1376細胞、H-295細胞
293 F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh-7.5.1細胞、RS4-11細胞、U87細胞
AN3-CA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-M20細胞、GM16136細胞、SNK-1細胞
L 428細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU475細胞、HCC-1833細胞、QGP1細胞
H-1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549-Taxol細胞、NCI-322細胞、UO-31細胞
IBMF-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC/mHSC細胞、SW954細胞、L5178-R細胞
H2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBdSMC細胞、IM95細胞、MADB 106細胞
GLC82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC 929細胞、Panc5.04細胞、TE-8細胞
Th17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIN-6細胞、SHIN3細胞、Eph4 1424細胞
JM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MG-HU-3細胞、MOLT 4細胞、S3-HeLa細胞
NCI/ADRRES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：118 MG細胞、WiDr/S細胞、ACCM細胞
Hs746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMC1細胞、TE-6細胞、U-87細胞
EBC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 04.03細胞、NK 10a細胞、KNS-62細胞
SK-N-BE(1)n細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSC34細胞、H-2023細胞、EAHY-926細胞
NCI-H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM 637細胞、NT2-D1細胞、PK13細胞
H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM16細胞、LLC-WRC 256細胞、RPPVEC細胞
SK-RC 39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-15細胞、HT1080細胞、NCI.H23細胞
CAKI.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ChA1細胞、NKM1細胞、HGMC細胞
NCIH1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK-49F細胞、Hs343T細胞、NS-1細胞
HOS-143B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DSL6A/C1細胞、SK_N_FI細胞、RCCJF細胞
RIN-14B epithelioid cells大鼠胰島素瘤細胞系
SW1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU1040細胞、CACO2細胞、C-4I細胞
HCC-1438細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN229細胞、H-1666細胞、TOV21G細胞
OCI-AML-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU398細胞、CAL51細胞、RAMSCs細胞
SKLMS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2D1細胞、LNT-229細胞、HGMC細胞
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