"OLN-93 epithelioid cells大鼠膠質(zhì)細胞系
細胞背景資料:膠質(zhì)細胞;自發(fā)永生;Wistar
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
OCI AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 839細胞、MOLP-8細胞、OVISE細胞
U266-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0403細胞、SK-MEL-5細胞、Super Tube細胞
Ramos(RA1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPEC-J2細胞、SK-Mel 2細胞、COLO320/DM細胞
細胞生長:貼壁
OLN-93 epithelioid cells大鼠膠質(zhì)細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
Sp 2/0-Ag 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHP77細胞、MC3T3E1細胞、MX1細胞
H1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T/G HA VSMC細胞、KLM1細胞、HEL-299細胞
NCTC929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW-42細胞、GM07404細胞、SK-N-BE(1)n細胞
Mouse Bladder Tumor line-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA87-1細胞、Porcine Kidney-15細胞、IPLB-SF-21細胞
DU4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP細胞、MT-4細胞、KTC1細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
OLN-93 epithelioid cells大鼠膠質(zhì)細胞系
細胞生長特性:貼壁
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
SJ-Rh 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC PK1細胞、H716細胞、RKN細胞
PANC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIEC-6細胞、HIT T15細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞
MCF/Adr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)M-17細胞、BEL-7404細胞、CCC-ESF-1細胞
KG1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon-26細胞、UWB1.289+BRCA1細胞、Anip973細胞
293c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH23細胞、UO31細胞、BC-023細胞
P3-x63-Ag8 653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H23細胞、NCIH2126細胞、MV3細胞
HEC-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM17346細胞、SV40-MES13細胞、MDA-MB361細胞
MDA-MB 453細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LoVo細胞、NCI-H727細胞、2780CP細胞
PL-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT-3細胞、NCIH747細胞、NIE-115細胞
YTMLC-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ONS76細胞、CEM.C1細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞
OLN-93 epithelioid cells大鼠膠質(zhì)細胞系
BPH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H711細胞、HEK;293細胞、Hs-746T細胞
SO-RB50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U118-MG細胞、NP69SV40T細胞、H-660細胞
HCC1438細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE-2細胞、OVCA-433細胞、A-673細胞
WM 239-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCP1細胞、H-2106細胞、TE353.SK細胞
GM3570細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-729細胞、OCILY10細胞、GM02132細胞
MIA PaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H82細胞、SP2細胞、DoTc2-4510細胞
MIA PaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H82細胞、SP2細胞、DoTc2-4510細胞
BNL-HCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker 256細胞、Vero細胞、QGY細胞
H22-H8D8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL1細胞、NCI-H69C細胞、HS-294-T細胞
ES2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI AML5細胞、ChaGo-K1細胞、32D/cl3細胞
SW1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-GEO細胞、HuH-1細胞、LNCaP-C4-2細胞
NCI-H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82COT細胞、SKMEL28細胞、HT144-mel細胞
HCC0038細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-373MG細胞、Hs688(A)T細胞、J-774細胞
KRC/Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM5細胞、GT1-1細胞、P31/FUJ細胞
H2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGC-6細胞、H841細胞、HCV-29細胞
NG 108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03569B細胞、MDA-MB-436細胞、A431細胞
HLE-SRA-01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc2.03細胞、CEMC7細胞、NTera 2細胞
NR8383細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HAPI細胞、WM 451-Lu細胞、HEK293細胞
MES-23.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J.HR1K細胞、TMD-8細胞、RT4細胞
Michigan Cancer Foundation-12A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-12細胞、HSC/mHSC細胞、CAL27細胞
HCC-2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryonic Skin細胞、N-9細胞、KYSE-520細胞
NK62a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-1063細胞、ZYM-SVEC01細胞、PG-LH7細胞
MB231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 45細胞、KNS-81細胞、NRK 49F細胞
mIMCD3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-023細胞、CEM C7細胞、CNE-1細胞
Douglas Foster-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2227細胞、APRE-19細胞、NIH:OVCAR-3細胞
BC-022細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL-4細胞、COLO 206F細胞、RPMI-7666細胞
SW626細胞系相關(guān)產(chǎn)品:XWLC-05細胞、VMRC-LCD細胞、HCV29細胞
HCC-1954BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker256-TC細胞、WSUDLCL2細胞、MEF細胞
Ls-174-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H87細胞、MC-CAR細胞、RMS13細胞
LN382細胞系相關(guān)產(chǎn)品:526mel細胞、PL5細胞、GC1-SPG細胞
CAMA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 51細胞、TSU-Pr1細胞、H929細胞
AML-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL 299細胞、H1672細胞、CEF細胞
OCI AML5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1693細胞、Hs-688A-T細胞、X63Ag8.653細胞
Mo 59J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 clone 4細胞、HuTu 80細胞、Ca759細胞
SKMEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker256細胞、ST 486細胞、MC3T3-E1細胞
H1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFSF細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞、HBE細胞
NCIH1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 1034細胞、IEC18細胞、Opossum Kidney細胞
CAL 39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1S細胞、NCI-H1522細胞、MMAc.SF細胞
EJ1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL2細胞、OVCA 433細胞、SW-1463細胞
SAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10-Clone-4細胞、NPA細胞、H-650細胞
NCIH1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FET細胞、RGM-1細胞、MILE SVEN1細胞
IMR-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1細胞、WILL2細胞、MIN6細胞
MHCC 97-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIT-1細胞、SW-626細胞、16HBEo-細胞
SUPM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05887A細胞、JAR細胞、Tu177細胞
JVM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE180細胞、HEL92.1.7細胞、Tca8113細胞
KTCTL140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2009細胞、Evsa-T細胞、COLO 678細胞
A427細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 841 CoN細胞、SW 954細胞、RH-35細胞
Colon26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABE8.1/2細胞、TE 85.T細胞、BCECs細胞
B16 F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL33細胞、H-1703細胞、LC-MS細胞
32Dcl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH3T3細胞、A 2780 CP細胞、WPMY-1細胞
H-64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-80細胞、RDES細胞、HPASMC細胞
OLN-93 epithelioid cells大鼠膠質(zhì)細胞系
H-2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WILL-2細胞、Y-79細胞、RN-c細胞
MA-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rin-M-5F細胞、HNSC細胞、SU-DH-L5細胞
HT-55細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-474細胞、COR-L88細胞、TE9細胞
MCF/Adr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)M-17細胞、BMSCs(mBMSCs)細胞、MKN45細胞
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