"TMK-1 epithelioid cells人胃癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：胃癌；男性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí)，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細(xì)胞施加胰酶選擇，因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落，對腫瘤細(xì)胞來說，這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對于較難消化的細(xì)胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn)，直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對細(xì)胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細(xì)胞！
OC-3-VGH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-6細(xì)胞、PJ34細(xì)胞、SUD-4細(xì)胞
NL20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN m5F細(xì)胞、MLFC細(xì)胞、LTEP-sm 1細(xì)胞
M-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCC9810細(xì)胞、CAL148細(xì)胞、MUVEC細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
TMK-1 epithelioid cells人胃癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
KBM-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY-50細(xì)胞、GS-9L細(xì)胞、SK-N-MC細(xì)胞
Cloudman M3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dami細(xì)胞、Hs600T細(xì)胞、H1650細(xì)胞
MDA-MB-231-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ細(xì)胞、LuCL4細(xì)胞、BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞
MEL-526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tj-905細(xì)胞、HEK 293-H細(xì)胞、WILL2細(xì)胞
MDA175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL28細(xì)胞、HN6細(xì)胞、MDA-MB-435細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
TMK-1 epithelioid cells人胃癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散；３)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細(xì)胞密度達(dá)到８０%以后重復(fù)１項(xiàng)操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細(xì)胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長不宜超過７２小時(shí))；２)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。
SKMEL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker256細(xì)胞、ST 486細(xì)胞、MC3T3-E1細(xì)胞
CEM C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW 039細(xì)胞、A2008細(xì)胞、BeWo細(xì)胞
YAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THLE-3細(xì)胞、Hu-P-T3細(xì)胞、THP 1細(xì)胞
H-748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel624細(xì)胞、MARC 145細(xì)胞、SK-RC 39細(xì)胞
CCRF-SB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-BM 1細(xì)胞、NS1-1 Ag4.1細(xì)胞、C12細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLRK 13細(xì)胞、EJ1細(xì)胞、HTR-8/SVneo細(xì)胞
CHOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 7細(xì)胞、HBE 135-E6E7細(xì)胞、TYKnu細(xì)胞
COV 504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGBEC細(xì)胞、NCI-H520細(xì)胞、L-132細(xì)胞
SNU638細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR3細(xì)胞、SP2-0-Ag14細(xì)胞、AD293細(xì)胞
MRC 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2-C細(xì)胞、PE CA PJ34細(xì)胞、RC-4B細(xì)胞
TMK-1 epithelioid cells人胃癌細(xì)胞系
NCI-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL12T細(xì)胞、GFP-Olig2細(xì)胞、MKN-7細(xì)胞
P3HR1-BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pan02細(xì)胞、MCA-205細(xì)胞、SK-ES-1細(xì)胞
SCC 25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1650細(xì)胞、hESC細(xì)胞、PAN 02細(xì)胞
SNU251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 513細(xì)胞、L-Wnt-3A細(xì)胞、AN3-CA細(xì)胞
MDA-MB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hUC-MSC細(xì)胞、CZ-1細(xì)胞、SUM-102細(xì)胞
Rat Skin 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA SO M21細(xì)胞、B16BL-6細(xì)胞、CAL39細(xì)胞
Monomac-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2228細(xì)胞、Panc 10.05細(xì)胞、SUM190細(xì)胞
HCC1954BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HA1800細(xì)胞、S-16細(xì)胞、LOU-NH-91細(xì)胞
THP-1(ATCC)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J.E6-1細(xì)胞、BLO-11細(xì)胞、Vero 76細(xì)胞
Hs683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-F細(xì)胞、LK 2細(xì)胞、Line 697細(xì)胞
OVCA 433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞、HPAF-II細(xì)胞、H-1944細(xì)胞
207細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHOS細(xì)胞、Panc-03.27細(xì)胞、HEC1-A細(xì)胞
DHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞、HCC0070細(xì)胞
Jurkat細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt-K1細(xì)胞、ACC2細(xì)胞、mRMEC細(xì)胞
SK-NSH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV-362細(xì)胞、HCC 38細(xì)胞、C4-1細(xì)胞
NCI-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SL1細(xì)胞、SW 48細(xì)胞、NCIH1651細(xì)胞
NCI522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-kb2細(xì)胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞、OCI-LY-19細(xì)胞
RPMI-1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1693細(xì)胞、LK2細(xì)胞、SCC-1395細(xì)胞
SK-ML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR L279細(xì)胞、Sp2/0-Ag14細(xì)胞、J 111細(xì)胞
Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SupT1細(xì)胞、G 292 Clone A 141B1細(xì)胞、IR983F細(xì)胞
293 HEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FAO-1細(xì)胞、Huh 7.5細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞
SU-DHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WiDr-TC細(xì)胞、PC3-M細(xì)胞、MCA 38細(xì)胞
LAD 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1細(xì)胞、SN4741細(xì)胞、Hs 746T細(xì)胞
TE-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-79細(xì)胞、MCF/Adr細(xì)胞、ECC10細(xì)胞
MCF.10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEP-3B2細(xì)胞、P1-Raji細(xì)胞、F442A細(xì)胞
L929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1792細(xì)胞、HuCC-T1細(xì)胞、293 EBNA細(xì)胞
MHCC-97細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-343細(xì)胞、LL2細(xì)胞、PTK-1細(xì)胞
NBL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1 sq細(xì)胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞、KU19-19細(xì)胞
Colon26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ABE8.1/2細(xì)胞、TE 85.T細(xì)胞、BCECs細(xì)胞
Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCaP 37細(xì)胞、H-1944細(xì)胞、NCI-UMC-11細(xì)胞
HIBEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-BL1339細(xì)胞、DOK細(xì)胞、NG-108-15細(xì)胞
BDCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML2細(xì)胞、Plaepi 34細(xì)胞、SUIT-2細(xì)胞
A2780CP70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞、THLE2細(xì)胞、B16 melanoma細(xì)胞
K-562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GFP-Olig2細(xì)胞、Colo205細(xì)胞、H3255細(xì)胞
HT-55細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-474細(xì)胞、NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、HLEB-3細(xì)胞
KMB17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Verda reno細(xì)胞、CNE-2Z細(xì)胞、801-D細(xì)胞
MDCK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134細(xì)胞、Jurkat77細(xì)胞、SPC-A-1細(xì)胞
HuO9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1990細(xì)胞、MDA-436細(xì)胞、BT.549細(xì)胞
NCIH2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT/Taxo1細(xì)胞、CAOV4細(xì)胞、RKO_AS45細(xì)胞
Lu-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LO2細(xì)胞、NCIH661細(xì)胞、MDAMB175細(xì)胞
RBL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMAc.SF細(xì)胞、NK92MI細(xì)胞、H747細(xì)胞
Hs940.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 HEK細(xì)胞、UMNSAH-DF 1細(xì)胞、IGROV細(xì)胞
Colon-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM/0細(xì)胞、786-0WT細(xì)胞、LTEP-s細(xì)胞
NCI-441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-996細(xì)胞、HCC-1569細(xì)胞、A 253細(xì)胞
LC1sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞、RPMI-8226S細(xì)胞、RenCa細(xì)胞
SK_HEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2 S細(xì)胞、Panc 03.27細(xì)胞、Hk-2細(xì)胞
PNT1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE-1細(xì)胞、HCCLM6細(xì)胞、HLEC-SRA 01/04細(xì)胞
SHIN-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ball 1細(xì)胞、N2a細(xì)胞、HTR8細(xì)胞
COLO320-DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuO9細(xì)胞、RBMEC細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞
HFL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA Paca2細(xì)胞、Panc 04.03細(xì)胞、HCC-1937細(xì)胞
Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEK細(xì)胞、HB 611細(xì)胞、FLC-7細(xì)胞
TMK-1 epithelioid cells人胃癌細(xì)胞系
rUCMSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK.EBNA細(xì)胞、SB細(xì)胞、ME16C細(xì)胞
A 253細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31 FUJ細(xì)胞、HCC1937細(xì)胞、F-81細(xì)胞
HCC1438細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE-2細(xì)胞、L 540細(xì)胞、H-1092細(xì)胞
YAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THLE-3細(xì)胞、NCI-H596細(xì)胞、BL2141細(xì)胞
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