"CCD-1095Sk epithelioid cells人乳腺浸潤性導管癌旁皮膚細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復蘇相關注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉速和時間,轉的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經驗總結為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候對一般細胞沒有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。 HEK 293細胞系相關產品:WM266細胞、PaTu8988s細胞、LN382細胞 NCTC-929細胞系相關產品:SW1417細胞、HGSMC細胞、HO8910PM細胞 LICR-HN6細胞系相關產品:NK10a細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、T-ALL 1細胞 細胞生長:貼壁 CCD-1095Sk epithelioid cells人乳腺浸潤性導管癌旁皮膚細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞學在生命科學科中起著至關重要的作用,近年來細胞學蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進展,細胞實驗室的構建也是各個院校生物學科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復雜,需要的實驗設備種類繁多,下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實際上普通蒸餾水經玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內毒素直接參與細胞凋亡,血清中內毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內毒素含量過高,會直接導致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉放-20℃ 1 hour,再轉入-70至-80℃過夜,之后才可以轉移到液氮內(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾毎麅龃婀苄枰⒓捶庞冢常贰嫠≈锌焖購吞K之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材:細胞實驗中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 6-10B細胞系相關產品:SK-ChA-1細胞、OVCA8細胞、SU-86-86細胞 H1915細胞系相關產品:MNNG/HOS細胞、AD293細胞、SCC 25細胞 Hs 281.T細胞系相關產品:COLO-320-DM細胞、NCM460細胞、ARH-77細胞 NCI-H1838細胞系相關產品:A3細胞、Strain V細胞、B16細胞 CHP212細胞系相關產品:CTV1細胞、T-98細胞、Farage Original Line細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 CCD-1095Sk epithelioid cells人乳腺浸潤性導管癌旁皮膚細胞系 細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 培養(yǎng)細胞真的不難,最關鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。 MDA-MB-157細胞系相關產品:A 172細胞、KGN細胞、LOUNH91細胞 LLC-MK2細胞系相關產品:Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、PC3細胞、L-M (TK-)細胞 H-1563細胞系相關產品:NCI-H2023細胞、MIN6細胞、NCIH1568細胞 CA-OV-3細胞系相關產品:HIT T15細胞、VK2 (E6/E7)細胞、L6565細胞 HTR-8/SVneo細胞系相關產品:DV-90細胞、hCMEC/D3細胞、PC-12細胞 A20細胞系相關產品:HNE2細胞、HME1細胞、95C細胞 Central Adrenergic TH-expressing a細胞系相關產品:MPC-11細胞、H-128細胞、LAPC4細胞 SUM159細胞系相關產品:DH-82細胞、GM02132C細胞、SK-RC 42細胞 KS-SLK細胞系相關產品:SNU-668細胞、Mink Lung細胞、Nthy-ori 3-1細胞 NCI-157細胞系相關產品:KP-N-RT細胞、NCIH378細胞、HCC0038細胞 CCD-1095Sk epithelioid cells人乳腺浸潤性導管癌旁皮膚細胞系 N-2a細胞系相關產品:SUDHL16細胞、B16-BL6細胞、NCI.H226細胞 CCC-HIE-2細胞系相關產品:HEK293EBNA細胞、293 H細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞 MONO-MAC 6細胞系相關產品:H-2135細胞、P30/OHK細胞、EOC 20細胞 NPC-TW01細胞系相關產品:Pfeiffer細胞、H1770細胞、C57/B6-L細胞 Rat podocyte細胞系相關產品:WM 239-A細胞、HCC2185細胞、CHL-1細胞 WERIRb1細胞系相關產品:Clone 15 HL-60細胞、HCC0070細胞、Ly18細胞 WERIRb1細胞系相關產品:Clone 15 HL-60細胞、HCC0070細胞、Ly18細胞 BIU87細胞系相關產品:H2591細胞、NCI-H358細胞、HSAEC1-KT細胞 SF126細胞系相關產品:KMH-2細胞、MCA 205細胞、MKN 7細胞 CSQT-2細胞系相關產品:Blotchy fibroblast-11細胞、COR-L88細胞、BT-474細胞 EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞系相關產品:Okayama University Medical School-27細胞、H929細胞、SW480E細胞 D341細胞系相關產品:hFOB1.19細胞、CAL-120細胞、KASUMI6細胞 SHP-77細胞系相關產品:NG108-15細胞、COLO-679細胞、Hs-27細胞 H1838細胞系相關產品:DCS細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDAMB157細胞 NCI-SNU-C2B細胞系相關產品:X63-Ag8細胞、SUM 52細胞、GL261細胞 NPA87-1細胞系相關產品:SUM 52PE細胞、Y3細胞、HT 1376細胞 McA-RH 7777細胞系相關產品:H157細胞、Gerner 7666細胞、COR-L279細胞 H2342細胞系相關產品:HGE細胞、3AA細胞、MC 3T3-E1細胞 CEL細胞系相關產品:FCCH1024細胞、U266S細胞、H-2342細胞 Panc 5.04細胞系相關產品:WBF344細胞、CA-OV-3細胞、MESSA Dx5細胞 HN4細胞系相關產品:LA4細胞、MDA361細胞、H-1618細胞 SCL-2細胞系相關產品:BNCL-2細胞、LNCaP subline C4-2細胞、PIG3細胞 Panc-05.04細胞系相關產品:SW 1353細胞、WEHI164細胞、EVSA/T細胞 S180細胞系相關產品:SK-N-BE(2)細胞、HT clone H9細胞、NCI-H1975細胞 Hs 839.T細胞系相關產品:NCI-H661細胞、HEK 293細胞、HEK293-A細胞 MDA MB 453細胞系相關產品:M-G63細胞、T47D:A細胞、C32-mel細胞 MDA PCa 2b細胞系相關產品:COLO357細胞、NCI-H78細胞、HCT/FU細胞 NG 108-15細胞系相關產品:GM03569B細胞、MDA-MB-436細胞、A431細胞 RC13細胞系相關產品:JF305細胞、BE2-C細胞、HSC5細胞 MDCC MSB1細胞系相關產品:MLA-144細胞、DoTc2-4510細胞、Porcine Kidney-13細胞 NCIH244細胞系相關產品:LIPF155C細胞、MF2059細胞、EJ細胞 Kasumi 1細胞系相關產品:Nb2-11細胞、PC.3細胞、SK_N_FI細胞 MEC-1細胞系相關產品:HPAF-I細胞、HCC-2935細胞、NCI-H889細胞 QBC-939細胞系相關產品:RC13細胞、TSUpr1細胞、P31/Fujioka細胞 HN-6細胞系相關產品:ANA-1細胞、MDA-MB 453細胞、OSA細胞 Malme3M細胞系相關產品:NCIH1993細胞、MDCK2細胞、HEP3B2細胞 MDAPC2B細胞系相關產品:M07e細胞、H2106細胞、SF539細胞 GMK,BSC-1細胞系相關產品:TE 85 ClF-5細胞、HEK-AD293細胞、HARA-B細胞 GMK,BSC-1細胞系相關產品:TE 85 ClF-5細胞、HEK-AD293細胞、HARA-B細胞 RKO細胞系相關產品:WM451Lu細胞、SKML-28細胞、HSC(Human Schwann)細胞 MES-23.5細胞系相關產品:P3J.HR1K細胞、TMD-8細胞、RT4細胞 PA1細胞系相關產品:Nb2a細胞、EJ-1細胞、K-562細胞 Bovine Turbinate細胞系相關產品:MARC-145細胞、TCC-PAN2細胞、RPMI-1846細胞 H2107細胞系相關產品:38C-13細胞、HIT T-15細胞、KB細胞 HPB-ALL細胞系相關產品:Eca 109細胞、H3396細胞、PCI-4.2細胞 DMS79細胞系相關產品:RBL-1細胞、SK MES 1細胞、BGC-823細胞 MHCC-97細胞系相關產品:U-343細胞、LL2細胞、PTK-1細胞 Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞系相關產品:LIM 1215細胞、HMC-1細胞、HuH28細胞 Hela-Ap-1細胞系相關產品:LC-2/ad細胞、HSKMC細胞、MKN1細胞 RAMSCs細胞系相關產品:H920細胞、DHL-6細胞、A3細胞 JB-6細胞系相關產品:H322細胞、NCIH740細胞、COLO 824細胞 CCD-1095Sk epithelioid cells人乳腺浸潤性導管癌旁皮膚細胞系 HRPEpiC細胞系相關產品:HDQ-P1細胞、RSC-364細胞、QBI-HEK 293A細胞 SUNE 1細胞系相關產品:Buffalo Rat Liver-3A細胞、HCC-1500細胞、MDA-MB-231 #4175細胞 CMT167細胞系相關產品:NS1/1-Ag4.1細胞、HOS (TE85)細胞、MN9D細胞 H1563細胞系相關產品:GM00346細胞、GM346細胞、KU1919細胞 "
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