"RSC96 epithelioid cells大鼠雪旺細胞系 細胞背景資料:雪旺細胞;自發(fā)永生 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 NCI-H1882細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOPC細胞、SEM細胞、SKCO-1細胞 H-1876細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-6細胞、SNU-182細胞、AML-193細胞 MFE-280細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSAS3細胞、JB6Cl30細胞、L- cell細胞 細胞生長:貼壁 RSC96 epithelioid cells大鼠雪旺細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞學在生命科學科中起著至關(guān)重要的作用,近年來細胞學蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進展,細胞實驗室的構(gòu)建也是各個院校生物學科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復(fù)雜,需要的實驗設(shè)備種類繁多,下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內(nèi)毒素直接參與細胞凋亡,血清中內(nèi)毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高,會直接導(dǎo)致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質(zhì)量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour,再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾毎麅龃婀苄枰⒓捶庞冢常贰嫠≈锌焖購?fù)蘇之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材:細胞實驗中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 H735細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 934.T細胞、IPLB-Sf21AE細胞、CAL 12細胞 U937細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kasumi-6細胞、Rat Lung-65細胞、SF 126細胞 HCC-366細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2591細胞、A 549細胞、LC-1細胞 HuT102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA-801D細胞、RPMI-8226細胞、NCl-H157細胞 HEK293-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI:SCC154細胞、H-2170細胞、C-4-I細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 RSC96 epithelioid cells大鼠雪旺細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當;比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。 PLC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs739T細胞、RPMI-1788細胞、OVCA-432細胞 SNU-C2A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AAV293細胞、SNU-354細胞、SNU-5細胞 Hep 3B2.1-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB134細胞、LAPC4細胞、BT-325細胞 VMCUB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh 7.5.1細胞、NB1RGB細胞、NOR10細胞 NCI-H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S3-HeLa細胞、Glioma 261細胞、NCI-H865細胞 SW-839細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY19細胞、H-87細胞、Hi5細胞 H660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE5細胞、MC3T3-E1(C4)細胞、UPCI-SCC-90細胞 SK_N_FI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC1細胞、SUDHL4細胞、HMC-1細胞 PC-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR-22rv1細胞、V79-GalK1細胞、JJN3細胞 CL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、MGH-U3 (RN)細胞、RC13細胞 RSC96 epithelioid cells大鼠雪旺細胞系 SK-MEL28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 606.T細胞、Hs863T細胞、FRTL-5 Cl 2細胞 ASPC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-144細胞、TE671/RD細胞、MFM223細胞 293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1876細胞、T_T_細胞、MV4;11細胞 AtT-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1436細胞、HConEpic細胞、A-253細胞 IOSE-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、LO2細胞、H1781細胞 H-1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD-2細胞、CHG-5細胞、HSC4細胞 H-1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD-2細胞、CHG-5細胞、HSC4細胞 CCK81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLE-B3細胞、IOSE29細胞、NCI H23細胞 VMM-5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CC-LP-I細胞、AtT20細胞、PL-9細胞 SW-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B35細胞、RH35細胞、MCF-7B細胞 H1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca109細胞、HEK-293-FT細胞、EAC細胞 JeKo-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM2細胞、BCP-1細胞、H1734細胞 SUDHL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-Swiss albino細胞、MPC-11細胞、GM0637細胞 GM12878細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM-12細胞、COR-L26細胞、HDLM2細胞 Caco-2/ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1944細胞、R D細胞、SUD4細胞 Hepatoma-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H522細胞、Colo320細胞、B-104細胞 Clone 166細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-33Co細胞、COLO 320F細胞、SV40 MES 13細胞 CFPAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH524細胞、HEL9217細胞、DMS-153細胞 MG-HU-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-32細胞、CCD-1112sk細胞、LTEPa2細胞 BrCL18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUTZ3細胞、SKMEL-2細胞、VK-2/E6E7細胞 H-727細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293A細胞、U251細胞、PK-13細胞 3T3-L1 ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283 Med細胞、Hs 819.T細胞、H2009細胞 H1650_CO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNGM細胞、SW948細胞、H295R細胞 HEC251細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1-0細胞、IHH4細胞、MDA453細胞 OCI-Ly 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305C細胞、F81細胞、P-3J細胞 Hs940T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549/ATCC細胞、OCI AML5細胞、SGC-996細胞 H1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-250細胞、211H細胞、BE2C細胞 LM(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0015細胞、373 MG細胞、B/C3T3細胞 BTI-Tn-5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMC細胞、H1581細胞、OKT 3細胞 M-07e細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-2細胞、TGW-nu-1細胞、NCI-H2108細胞 PaTu 8988s細胞系相關(guān)產(chǎn)品:22Rv1細胞、HK2細胞、NCTC 929細胞 751-NA-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMA-560細胞、SW 480細胞、KYSE 70細胞 SU-DHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WiDr-TC細胞、PC3-M細胞、MCA 38細胞 HFL-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tregs細胞、HT1376細胞、H-295細胞 KMST6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MH7A細胞、SUM102PT細胞、NB19-RIKEN細胞 SKNSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 432細胞、Pfeiffer細胞、AR41P細胞 P-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF/CD18細胞、184A1細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞 C4I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V 79-4細胞、SL-1細胞、MUM2B細胞 LCLC103H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-S細胞、OAC-P4C細胞、MDA-MB-134細胞 WB F344細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-HSC細胞、LS-174T細胞、RPMI8226/S細胞 LTEP-sm 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono-Mac-6細胞、UPCI-SCC-090細胞、SNU-475細胞 H-196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC941122細胞、NCIH510細胞、X63Ag8-653細胞 COLO320/DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-Lec1.3C細胞、Jurkat-FHCRC細胞、GOTO細胞 SW-403細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TF-1a細胞、HSC5細胞、Lewis-Lung細胞 HF-91細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-7細胞、10T1/2細胞、Ramos-RA1細胞 HuP-T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN-6細胞、OCI/AML-2細胞、EL4細胞 H841細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 F1細胞、MonoMac1細胞、TE-671細胞 MDA435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-3細胞、MFE280細胞、JEG3細胞 RERF-LC-MS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NH6細胞、H-211細胞、RBL-I細胞 NCI-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL12T細胞、GFP-Olig2細胞、MKN-7細胞 DLD 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3細胞、MCF-12A細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞 RSC96 epithelioid cells大鼠雪旺細胞系 LYR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL6細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞、HSC6細胞 H2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、H596細胞、PFSK1細胞 MC-3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CESS細胞、MDAMB436細胞、HEK 293A細胞 Hep 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RA細胞、MOLM-13細胞、LLC-PK-1細胞 "
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