"SK-OV-3 epithelioid cells人卵巢癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：SK-OV-３由G.Trempe和L.J.Old在１９７３年從卵巢腫瘤病人的腹水分離得到。 此細(xì)胞對(duì)腫瘤壞死因子和幾種細(xì)胞毒性藥物包括白喉毒素、順鉑和阿霉素均耐受。 在裸鼠中致瘤，且形成與卵巢原位癌一致的中度分化的腺癌。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會(huì)受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個(gè)說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31-FUJ細(xì)胞、HCGC細(xì)胞、Hi-5細(xì)胞
293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc327細(xì)胞、BC3 H1細(xì)胞、C4-2 B細(xì)胞
L1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCA-7細(xì)胞、SVG p12細(xì)胞、TE9細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
SK-OV-3 epithelioid cells人卵巢癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時(shí)盡可能溫和，使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
P3HR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU119細(xì)胞、KYSE 450細(xì)胞、Clone 166細(xì)胞
GL-261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-746T細(xì)胞、NCI-H1623細(xì)胞、CCLP-1細(xì)胞
JJN-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOC1細(xì)胞、CW2細(xì)胞、UMUC14細(xì)胞
H2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Malme3M細(xì)胞、NK10a細(xì)胞、TB-1 Lu細(xì)胞
H-1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 863.T細(xì)胞、MCF 10A細(xì)胞、H-1238細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
SK-OV-3 epithelioid cells人卵巢癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
SCL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-266-4細(xì)胞、UCLA-SO-M20細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞
XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM 2132細(xì)胞、MFE 280細(xì)胞、R D細(xì)胞
H-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV522細(xì)胞、EOC20細(xì)胞、RBL 1細(xì)胞
SCLC-21H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPCA-1細(xì)胞、NCIH2107細(xì)胞、231-luc細(xì)胞
D324 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL細(xì)胞、FHCRC-11細(xì)胞、PANC0504細(xì)胞
GC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 4細(xì)胞、C57/B6-L細(xì)胞、TSCC1細(xì)胞
P3-x63-Ag8 653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H23細(xì)胞、NCIH2126細(xì)胞、MV3細(xì)胞
SUDHL-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-1細(xì)胞、OCI-Ly18細(xì)胞、LS123細(xì)胞
NCIH128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、EBTr (NBL-4)細(xì)胞、G361mel細(xì)胞
HSC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT125細(xì)胞、HEC251細(xì)胞、NKM-1細(xì)胞
SK-OV-3 epithelioid cells人卵巢癌細(xì)胞系
SVG(P12)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BPH1細(xì)胞、NCI-SNU-886細(xì)胞、COLO320-DM細(xì)胞
SKNFI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞、NCI-H1155細(xì)胞、WBF344細(xì)胞
EBC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 04.03細(xì)胞、NK 10a細(xì)胞、KNS-62細(xì)胞
N87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDSMC細(xì)胞、Th17細(xì)胞、L-M(TK-)細(xì)胞
RPMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RA-FLSs細(xì)胞、NeHepLxHT細(xì)胞、H2286細(xì)胞
CFSC-8B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-6 myoblast細(xì)胞、HCAEC細(xì)胞、M20 [Human melanoma]細(xì)胞
TGBC11T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co 205細(xì)胞、CLONE M3細(xì)胞、CMT167細(xì)胞
NCI-H520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs888T細(xì)胞、DC2.4細(xì)胞、HIEC-6細(xì)胞
NBL-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PT-K75細(xì)胞、GM-637細(xì)胞、WI 38細(xì)胞
ARO81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C細(xì)胞、Y3-Ag1,2,3細(xì)胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞
Meat Animal Research Center-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hu-P-T3細(xì)胞、CWR22R細(xì)胞、CCD-841-CoN細(xì)胞
OVCA5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-10-05細(xì)胞、ML2細(xì)胞、MDA-MB-134-VI細(xì)胞
HFSF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：526-mel細(xì)胞、C4-I細(xì)胞、TE15細(xì)胞
PG13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG-HOS細(xì)胞、MDST8細(xì)胞、FRTL-5細(xì)胞
AE 1201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly10細(xì)胞、L-5178-Y細(xì)胞、SNU-1040細(xì)胞
ARO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2PK3細(xì)胞、MOLM-14細(xì)胞、A375.S2細(xì)胞
Cloudman M3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dami細(xì)胞、Hs600T細(xì)胞、H1650細(xì)胞
GCT0404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS766T細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞、SL1細(xì)胞
VERO76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3CA細(xì)胞、SCC090細(xì)胞、CAKI.1細(xì)胞
H-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc813細(xì)胞、Karpas299細(xì)胞、ZR75-30細(xì)胞
HCC0095細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ha Fe細(xì)胞、L-1210細(xì)胞、VMRCLCD細(xì)胞
697細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC3細(xì)胞、CCD 841 CoN細(xì)胞、NCI-H841細(xì)胞
HOS-TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkMel31細(xì)胞、MS1細(xì)胞、OCI/AML-4細(xì)胞
OC316細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320HSR細(xì)胞、WEHI-279細(xì)胞、Human Embryo Kidney-2細(xì)胞
HCC1588細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-211細(xì)胞、MDA-kb2細(xì)胞、H-3255細(xì)胞
SW480E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-361細(xì)胞、NCI-H650細(xì)胞、SU-DH-L5細(xì)胞
H1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc5.04細(xì)胞、NCIH1395細(xì)胞、190PT細(xì)胞
RPE1-hTERT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1993細(xì)胞、FRTL 5細(xì)胞、A2780S細(xì)胞
Hs 895.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 79細(xì)胞、SRA01/04細(xì)胞、HOP 92細(xì)胞
DLD1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AgC11x3A細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞、Mahlavu細(xì)胞
KNS-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH-DF-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)細(xì)胞、MNNG/HOS細(xì)胞
UCLA-SO-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H650細(xì)胞、HDSMC細(xì)胞、H-711細(xì)胞
QSG7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKUT-1細(xì)胞、CCRF-SB細(xì)胞、PGBE1細(xì)胞
Capan2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-460細(xì)胞、KMB 17細(xì)胞、DI TNC1細(xì)胞
H508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ADR-RES細(xì)胞、U 138 MG細(xì)胞、H-1819細(xì)胞
H766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs27細(xì)胞、EAHY-926細(xì)胞、Y3Ag1.2.3細(xì)胞
AMO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-AS-45-1細(xì)胞、MHCC 97-L細(xì)胞、OPM2細(xì)胞
SKHEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat 1細(xì)胞、Human Liver-7702細(xì)胞、KHYG1細(xì)胞
KOPN8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC 94細(xì)胞、OE-19細(xì)胞、BS-C-1細(xì)胞
H1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA12細(xì)胞、SW900細(xì)胞、H283細(xì)胞
SK 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-206F細(xì)胞、SW 756細(xì)胞、Hep 3B2細(xì)胞
KATOIII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-841細(xì)胞、Z310細(xì)胞、NIH:OVCAR-4細(xì)胞
HME-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACT-1細(xì)胞、GM02219C細(xì)胞、MIHA細(xì)胞
HEK;293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954 BL細(xì)胞、B16/F1細(xì)胞、PaTu 8988 S細(xì)胞
SuDHL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578.Bst細(xì)胞、LS-411細(xì)胞、ChaGo K-1細(xì)胞
Mouse podocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 813細(xì)胞、MEC-1細(xì)胞、L5178Y-R細(xì)胞
A498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-196細(xì)胞、C2-C12細(xì)胞、OSC19細(xì)胞
MDAMB-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTCTL140細(xì)胞、SUM 149PT細(xì)胞、PC3-M細(xì)胞
OCI-Ly07細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-175細(xì)胞、Nthy-ori 3-1細(xì)胞、U118MG細(xì)胞
MeT5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCIAML5細(xì)胞、H2066細(xì)胞、Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞
HCC-1187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：High 5細(xì)胞、Wistar Institute-38細(xì)胞、OCI-Ly8細(xì)胞
SK-OV-3 epithelioid cells人卵巢癌細(xì)胞系
SKNMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU812-F細(xì)胞、BC-028細(xì)胞、CAL 39細(xì)胞
HCC70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1819細(xì)胞、Hs695細(xì)胞、ECC 10細(xì)胞
MuM-2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs688(A)T細(xì)胞、T HEECs細(xì)胞、C-Li-7細(xì)胞
H4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M1細(xì)胞、U-251_MG細(xì)胞、293 EBNA細(xì)胞
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