"COLO 320 epithelioid cells人結(jié)腸癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時(shí),從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對(duì)細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來(lái)的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無(wú)酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺(jué)得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來(lái)。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無(wú)法使組織上的細(xì)胞脫落下來(lái)。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來(lái)。優(yōu)點(diǎn)是:對(duì)細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過(guò)程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺(tái)上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 293-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI/ADRRES細(xì)胞、SKNAS細(xì)胞、Vero E-6細(xì)胞 R1800[RA]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-192A細(xì)胞、NCI H716細(xì)胞、NCI-SNU-398細(xì)胞 HO-8910PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T6細(xì)胞、TYKnu細(xì)胞、T98G細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 COLO 320 epithelioid cells人結(jié)腸癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長(zhǎng),用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái),很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來(lái)也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒(méi)有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕,避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺(jué)得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng):二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò),細(xì)胞成片脫落,吹打時(shí)沒(méi)有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn):HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng),一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HemECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Beta-TC-6細(xì)胞、H-1184細(xì)胞、COS-7細(xì)胞 B5537SKIN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLTC-1細(xì)胞、HT 29細(xì)胞、OVCAR-3細(xì)胞 COLO320/DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-Lec1.3C細(xì)胞、Jurkat-FHCRC細(xì)胞、GOTO細(xì)胞 MEF (CF-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDE6c7細(xì)胞、RMG-I細(xì)胞、1301細(xì)胞 Panc 03.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Scott細(xì)胞、PANC-04-03細(xì)胞、MAVER1細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 COLO 320 epithelioid cells人結(jié)腸癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:淋巴母細(xì)胞 造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見(jiàn)情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見(jiàn)污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時(shí)間,有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí),不開(kāi)紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開(kāi)始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒(méi)用,未檢測(cè)是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面,東西太多太亂:超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)!這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來(lái)后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好,啥時(shí)候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒(méi)清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒(méi)了要記得加,還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔?xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無(wú)菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí),喜歡說(shuō)話聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢! SU-DHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs695細(xì)胞、HEC1B細(xì)胞、Mono-Mac-6細(xì)胞 COR-L 105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP212細(xì)胞、MDCKII細(xì)胞、HCCLM3細(xì)胞 MS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1522細(xì)胞、MS-751細(xì)胞、YES-2細(xì)胞 NCIH1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:High Five細(xì)胞、A-20細(xì)胞、RMS 1598細(xì)胞 SW 1271細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774 A1細(xì)胞、T-T細(xì)胞、COLO-699細(xì)胞 NIH/3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAPC2B細(xì)胞、MDA-MB 468細(xì)胞、MX-1細(xì)胞 HEK293-EBNA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE細(xì)胞、M21細(xì)胞、IPECJ2細(xì)胞 MDA MB 453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-G63細(xì)胞、T47D:A細(xì)胞、C32-mel細(xì)胞 RCC10 RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1187細(xì)胞、HEC-1B細(xì)胞、Rat Skin 1細(xì)胞 NB-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LYR細(xì)胞、HEM細(xì)胞、HEK-AD 293細(xì)胞 COLO 320 epithelioid cells人結(jié)腸癌細(xì)胞系 H1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1581細(xì)胞、MUGCHOR1細(xì)胞、GM00215A細(xì)胞 GA-10 clone 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P388.D1細(xì)胞、Hs 636 T細(xì)胞、SNU-869細(xì)胞 HEC-1-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-DLCL2細(xì)胞、U-87 MG細(xì)胞、Ramos.2G6.4C10細(xì)胞 PanC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TB1 Lu細(xì)胞、OLN-93細(xì)胞、M-20細(xì)胞 AR41P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW527細(xì)胞、P3/X63/Ag8.653細(xì)胞、EC-GI-10細(xì)胞 Daudi細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 837細(xì)胞、SK-Mel 1細(xì)胞、NKM1細(xì)胞 Daudi細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 837細(xì)胞、SK-Mel 1細(xì)胞、NKM1細(xì)胞 H1522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss 3T3細(xì)胞、AML193細(xì)胞、CTLA4Ig-24細(xì)胞 MN-9D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono Mac6細(xì)胞、BT549細(xì)胞、H-2405細(xì)胞 UWB1-289細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/CP細(xì)胞、HHFK細(xì)胞、DBTRG-05MG細(xì)胞 WM2664細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172 MG細(xì)胞、P3J HR1-K細(xì)胞、KYSE 50細(xì)胞 SKNDZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:751-NA-15細(xì)胞、HCC366細(xì)胞、PFSK-1細(xì)胞 B-cell with DC Morphology細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL2細(xì)胞、Caco-2/ATCC細(xì)胞、CA46細(xì)胞 HCC-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRMT-1細(xì)胞、Swiss 3T3細(xì)胞、OCI-Ly1細(xì)胞 DHL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTHY-ORI3.1細(xì)胞、Panc-813細(xì)胞、H2110細(xì)胞 FL83B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H847細(xì)胞、SW 837細(xì)胞、WM266-4細(xì)胞 HKF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-157細(xì)胞、OV1063細(xì)胞、NCIH520細(xì)胞 HEL-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 737.T細(xì)胞、NCIH1184細(xì)胞、PT-K75細(xì)胞 Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOMA細(xì)胞、McCoy B細(xì)胞、MES-SA Dx5細(xì)胞 COLO678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30 OHK細(xì)胞、PANC403細(xì)胞、H9細(xì)胞 CV 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hADSCs細(xì)胞、BALL-1細(xì)胞、Z310細(xì)胞 G402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP2細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞、PANC403細(xì)胞 KMS26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kuramochi細(xì)胞、NCI-441細(xì)胞、3T3 Swiss Albino細(xì)胞 MDAMB175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FCCH1018細(xì)胞、Reuber H-35細(xì)胞、H292細(xì)胞 CNE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 3細(xì)胞、HuPT3細(xì)胞、ECV細(xì)胞 MV-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 102細(xì)胞、451-LU細(xì)胞、Caki2細(xì)胞 NCIH1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK-49F細(xì)胞、Hs343T細(xì)胞、NS-1細(xì)胞 RBL.2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT20細(xì)胞、HCC 70細(xì)胞、GM346細(xì)胞 MDA-MB361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-53細(xì)胞、LA4細(xì)胞、Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞 TF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB1-RGB細(xì)胞、SHEP1細(xì)胞、BetaTC6細(xì)胞 SUD4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNTEC細(xì)胞、T HEECs細(xì)胞、Hs688(A)T細(xì)胞 mRMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375mel細(xì)胞、SCL-II細(xì)胞、SK-GT-2細(xì)胞 NUGC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEpiC細(xì)胞、IGROV-1細(xì)胞、TGW-nu-1細(xì)胞 SNU-119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL7702細(xì)胞、IBRS2細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞 KMS-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MALME.3M細(xì)胞、TCam 2細(xì)胞、HH [Human lymphoma]細(xì)胞 DI TNC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MXI細(xì)胞、KP-4細(xì)胞、SW948細(xì)胞 SKM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGMC細(xì)胞、GM00637H細(xì)胞、L cells細(xì)胞 Human Microglia Clone 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2108細(xì)胞、SCL2細(xì)胞、32Dcl3細(xì)胞 HASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS TE 85細(xì)胞、LIPF178C細(xì)胞、OCI Ly1細(xì)胞 IEC18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB231細(xì)胞、SU-DHL1細(xì)胞、QBC-939細(xì)胞 GT39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H460細(xì)胞、RPMI8226細(xì)胞、HCC1588細(xì)胞 H498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-23.5細(xì)胞、NCI-H676細(xì)胞、Mel-MeWo細(xì)胞 HMy2.CIR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 Ag8.653細(xì)胞、OCI/AML3細(xì)胞、MC-38細(xì)胞 DK-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-12T細(xì)胞、NRCC細(xì)胞、OCI-LY-18細(xì)胞 Reuber H-35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:STO細(xì)胞、Hs940-T細(xì)胞、PL 5細(xì)胞 SBC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-C2A細(xì)胞、KLE細(xì)胞、RD細(xì)胞 TE6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEF細(xì)胞、Hs 274.T細(xì)胞、DLM8細(xì)胞 Anip-973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D 407細(xì)胞、HR-8348細(xì)胞、RKOE6細(xì)胞 AML12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-3T3-E1細(xì)胞、PIG3細(xì)胞、Panc-08.13細(xì)胞 H-2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A253細(xì)胞、VCaP細(xì)胞、Be Wo細(xì)胞 Chang Cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z138細(xì)胞、G-361細(xì)胞、KYSE450細(xì)胞 COLO 320 epithelioid cells人結(jié)腸癌細(xì)胞系 NTHY-ORI3.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hEEC細(xì)胞、Mv1Lu細(xì)胞、HMy2.CIR細(xì)胞 Vero-E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-513細(xì)胞、NFHIOSE-29細(xì)胞、OCI Ly3細(xì)胞 Panc_05_04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIMT1細(xì)胞、MOLT16細(xì)胞、HBdSMC細(xì)胞 MS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1522細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞、PTK 2細(xì)胞 "
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