"Ketr-3 epithelioid cells人腎癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題。總結２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
FHs74 Int細胞系相關產(chǎn)品：HRC-99細胞、Med 283細胞、LO2細胞
JROECL33細胞系相關產(chǎn)品：LS-411N細胞、HEK AD293細胞、OCI-AML5細胞
KATO 3細胞系相關產(chǎn)品：WTRL1細胞、L929細胞、HCC1438細胞
細胞生長：貼壁
Ketr-3 epithelioid cells人腎癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法：１：２傳代
MC-38細胞系相關產(chǎn)品：OE-21細胞、SUDHL8細胞、HeLa S3細胞
H1666細胞系相關產(chǎn)品：Hs 888.Lu細胞、H-2122細胞、LA795細胞
BNCL-2細胞系相關產(chǎn)品：CAKI 2細胞、QGY-7701細胞、A72細胞
SK-N-BE(1)n細胞系相關產(chǎn)品：NSC34細胞、H-2023細胞、EAHY-926細胞
SW-527細胞系相關產(chǎn)品：293E細胞、Capan-1細胞、PASMCS細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Ketr-3 epithelioid cells人腎癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
PM6細胞系相關產(chǎn)品：H-1694細胞、hEEC細胞、HCT116細胞
J-774細胞系相關產(chǎn)品：IMR 90細胞、A9細胞、Rat-1細胞
RWPE-2細胞系相關產(chǎn)品：C 643細胞、SF-539細胞、NT2D1細胞
32D.3細胞系相關產(chǎn)品：TKB-1細胞、Hs 636.T細胞、Capan1細胞
ATDC-5細胞系相關產(chǎn)品：KMST-6細胞、OVCAR-3細胞、MBMEC細胞
Institute for Medical Research-32細胞系相關產(chǎn)品：MDA-415細胞、HCC1187細胞、COLO357細胞
Mv 1 Lu (NBL-7)細胞系相關產(chǎn)品：BCaP 37細胞、H-1944細胞、NCI-UMC-11細胞
EC109細胞系相關產(chǎn)品：Ra No. 1細胞、Institute for Medical Research-90細胞、COLO678細胞
Large Cell Lung Cancer-103H細胞系相關產(chǎn)品：WPMY-1細胞、A2780CP細胞、NCI-SNU-423細胞
Mv 1 Lu (NBL-7)細胞系相關產(chǎn)品：BCaP 37細胞、H-1944細胞、NCI-UMC-11細胞
Ketr-3 epithelioid cells人腎癌細胞系
CL1-0細胞系相關產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞、NCIADR.RES細胞、PK(15)細胞
SPC-A1細胞系相關產(chǎn)品：H548細胞、NCIH1793細胞、HMEC-1細胞
L78細胞系相關產(chǎn)品：L929(NCTC)細胞、HEC-151細胞、MCF-12F細胞
ME1細胞系相關產(chǎn)品：TE9細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、NCI-H2228細胞
Duke University 145細胞系相關產(chǎn)品：M619細胞、D-283 Med細胞、Japanese Tissue Culture-39細胞
HT-29/CX-1細胞系相關產(chǎn)品：231-luc細胞、PC-3/M細胞、HL60細胞
HT-29/CX-1細胞系相關產(chǎn)品：231-luc細胞、PC-3/M細胞、HL60細胞
R-1059-D細胞系相關產(chǎn)品：DanG細胞、C41細胞、RBL-1細胞
HSC-T6細胞系相關產(chǎn)品：Hs742T細胞、MM6細胞、HOC-1細胞
MonoMac6細胞系相關產(chǎn)品：DMS53細胞、SUM190細胞、NCI-H810細胞
IEC6細胞系相關產(chǎn)品：HEK 293-EBNA細胞、COR-L23細胞、ME-180細胞
Los Angeles Prostate Cancer-4細胞系相關產(chǎn)品：SF295細胞、HKBML細胞、HRVEC細胞
Karpas422細胞系相關產(chǎn)品：CAL 12細胞、Hepa 1-6細胞、W133細胞
IM-9細胞系相關產(chǎn)品：SW948細胞、CPA47細胞、NCL-H548細胞
SW403細胞系相關產(chǎn)品：V-79細胞、no-11細胞、6T-CEM細胞
SKG3A細胞系相關產(chǎn)品：IOSE29細胞、B-3細胞、SW-48細胞
MV4-11細胞系相關產(chǎn)品：EBTr (NBL-4)細胞、AC16 [Human hybrid]細胞、SKLU01細胞
Kit225-K6細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H358細胞、Okayama University Medical School-27細胞、HeLa.S3細胞
KYSE50細胞系相關產(chǎn)品：HMVEC細胞、OCI-Ly10細胞、EJ-1細胞
Jurkat E6細胞系相關產(chǎn)品：JHH-2細胞、P3J-HR-1細胞、MOLM13細胞
SK-Mel 2細胞系相關產(chǎn)品：GMK,BSC-1細胞、YAC細胞、Tb 1 Lu細胞
Hs-578T細胞系相關產(chǎn)品：MV411細胞、SGC-996細胞、H-2126細胞
BetaTC6細胞系相關產(chǎn)品：NIH-OVCAR-3細胞、Hs895.T細胞、A-172細胞
AR42J細胞系相關產(chǎn)品：COR-L88細胞、TI-73細胞、HeLa S 3細胞
H3255_DA細胞系相關產(chǎn)品：HCS2/8細胞、KPL-4細胞、OCI Ly3細胞
HCAEC細胞系相關產(chǎn)品：NCIH522細胞、H.Ep.-2細胞、PLC細胞
H-498細胞系相關產(chǎn)品：NHRF細胞、SNU368細胞、COLO 320 DM細胞
SLMT1細胞系相關產(chǎn)品：L 428細胞、SK-N-F1細胞、HEC-1-B細胞
COV-434細胞系相關產(chǎn)品：HT-1376細胞、PNT-1A細胞、B16BL6細胞
MHH-CALL2細胞系相關產(chǎn)品：D-283MED細胞、W133細胞、BE(2)-C細胞
OCI/AML3細胞系相關產(chǎn)品：hRMECs細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、PC.3細胞
FRH-0201細胞系相關產(chǎn)品：LNCaP-Clone-FGC細胞、H-125細胞、SCLC-21H細胞
OVCA420細胞系相關產(chǎn)品：H 9細胞、MGH-U1細胞、CEM-CCRF細胞
NRK 49F細胞系相關產(chǎn)品：MCA205細胞、YAC-1細胞、T-CAM2細胞
Vero 76細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE(1)細胞、HM細胞、PG-4 S+L-細胞
M-NFS-60細胞系相關產(chǎn)品：ACC-2細胞、EOL1細胞、Caco-2 BBe細胞
J 111細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2030細胞、MRMT-1細胞、L929細胞
RH8994細胞系相關產(chǎn)品：SVGp12細胞、Opossum Kidney細胞、NCI-H3255細胞
Wistar Institute-38細胞系相關產(chǎn)品：PK(15)細胞、WM115細胞、PC 61-5-3細胞
NWA細胞系相關產(chǎn)品：NCI H2106細胞、OCI AML3細胞、Natural Killer-92細胞
SMA-560細胞系相關產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞、801-D細胞、Tu-686細胞
QSG-7701細胞系相關產(chǎn)品：SW 626細胞、Y3-Ag1.2.3細胞、RPTC細胞
HCC1438細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE-2細胞、OVCA-433細胞、A-673細胞
CCC-HIE-2細胞系相關產(chǎn)品：HEK293EBNA細胞、293 H細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞
COLO 678細胞系相關產(chǎn)品：OVCA-432細胞、NCIH295R細胞、Panc-1-P細胞
RSC-364細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H-128細胞、KMBC細胞、MES-SA細胞
3T3L1細胞系相關產(chǎn)品：CATHa細胞、RKOAS451細胞、HCC-2185細胞
MPP 89細胞系相關產(chǎn)品：KY180細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞、INS1細胞
KALS1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH209細胞、2BS細胞、Cloudman S91 melanoma細胞
CAL 12細胞系相關產(chǎn)品：PTK2細胞、HO8910/PM細胞、IPLB-SF 21細胞
HeLaS3細胞系相關產(chǎn)品：KP-N-RT-BM細胞、HCC0202細胞、AC29細胞
Ketr-3 epithelioid cells人腎癌細胞系
BT 549細胞系相關產(chǎn)品：DU4475細胞、HS-729細胞、Mouse podocyte細胞
KE-39細胞系相關產(chǎn)品：Hs706T細胞、LAD-2細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞
H1666_DA細胞系相關產(chǎn)品：RK13細胞、RT-BM 1細胞、ECC 12細胞
RWPE-2細胞系相關產(chǎn)品：C 643細胞、NIH3T3細胞、Panc-03.27細胞
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