"HPDE epithelioid cells胰腺正常導(dǎo)管上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細(xì)胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱唵?，而且死板。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個(gè)問題，太長的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會(huì)死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見得太多了，別不當(dāng)會(huì)事。
HLEC-SRA 01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs675細(xì)胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞、Hs940.T細(xì)胞
293/EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-180細(xì)胞、Line 870 Emory University-4細(xì)胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞
HRA 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、NCI-H2444細(xì)胞、L02細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
HPDE epithelioid cells胰腺正常導(dǎo)管上皮細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時(shí)盡可能溫和，使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
Reuber H35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC-1[JHU-1]細(xì)胞、M-1 myeloid leukemia細(xì)胞、JM細(xì)胞
COR-L23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF Pac1細(xì)胞、J774A1細(xì)胞、NFS 60細(xì)胞
Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2107細(xì)胞、NCI-H1581細(xì)胞、NFS-60細(xì)胞
SNUC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC3細(xì)胞、PY8119細(xì)胞、AML-EOL-1細(xì)胞
National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE 135-E6E7細(xì)胞、HSCT6細(xì)胞、KYSE 410細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HPDE epithelioid cells胰腺正常導(dǎo)管上皮細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無法存活。
HUVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QG-56細(xì)胞、HCC0078細(xì)胞、CL1-5細(xì)胞
JOSK-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNO-1細(xì)胞、Colo699細(xì)胞、HcaF細(xì)胞
SMMC7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTLA4Ig-24細(xì)胞、C-6細(xì)胞、GM07404細(xì)胞
D-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8細(xì)胞、138 MG細(xì)胞、SNU1040細(xì)胞
YD15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs940T細(xì)胞、Emory University-2細(xì)胞、SKNO-1細(xì)胞
KU19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEPa2細(xì)胞、GalK1細(xì)胞、PLB-985細(xì)胞
WRL-68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS411細(xì)胞、MeT-5A細(xì)胞、SUDHL-5細(xì)胞
DR2R 1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GNM細(xì)胞、DLD 1細(xì)胞、Panc2_03細(xì)胞
B16/BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ketr 3細(xì)胞、Huh-7.5細(xì)胞、RWPE2細(xì)胞
ABC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-852-T細(xì)胞、Sci-1細(xì)胞、R1800[RA]細(xì)胞
HPDE epithelioid cells胰腺正常導(dǎo)管上皮細(xì)胞系
LN382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：526mel細(xì)胞、PL5細(xì)胞、GC1-SPG細(xì)胞
PLA801D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388-D1細(xì)胞、LU-65M細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞
BS-C-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U87-MG細(xì)胞、RCC-4細(xì)胞、H-1693細(xì)胞
CemT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1937細(xì)胞、X63-Ag8細(xì)胞、GM2219C細(xì)胞
PANC0327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 L1細(xì)胞、EU-2細(xì)胞、Granta-519細(xì)胞
OAC-P4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hut292細(xì)胞、Karpas 422細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞
OAC-P4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hut292細(xì)胞、Karpas 422細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞
EST81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1954細(xì)胞、WB-F344細(xì)胞、OVCAR.3細(xì)胞
CMT.64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv.1.Lu細(xì)胞、NCI-H2135細(xì)胞、Mel-RM細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep-3B細(xì)胞、KM12 SM細(xì)胞、HEK293E細(xì)胞
NCI-H2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML 12細(xì)胞、MC38細(xì)胞、Tu 212細(xì)胞
OAW42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAC細(xì)胞、M210B4細(xì)胞、MDA-MB-175-VII細(xì)胞
Mouse podocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 813細(xì)胞、MEC-1細(xì)胞、L5178Y-R細(xì)胞
WM451細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMB 17細(xì)胞、EFM19細(xì)胞、OCI/AML3細(xì)胞
MDA468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QSG-7701細(xì)胞、FHs74Int細(xì)胞、HFSF細(xì)胞
NCTC929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OAW-42細(xì)胞、GM07404細(xì)胞、SK-N-BE(1)n細(xì)胞
U-251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 606細(xì)胞、293E細(xì)胞、CT26-clone 25細(xì)胞
Hi-five細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTh-74細(xì)胞、CAL851細(xì)胞、NCIH211細(xì)胞
Karpas299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DAN-G細(xì)胞、PL-11細(xì)胞、MDAPCa2b細(xì)胞
OVCAR420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SiHa細(xì)胞、MDA MB 134VI細(xì)胞、SF767細(xì)胞
NCI-H650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK 1細(xì)胞、COLO394細(xì)胞、Hs 600.T細(xì)胞
Karpas422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 12細(xì)胞、Hepa 1-6細(xì)胞、W133細(xì)胞
CHL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-03.27細(xì)胞、MALME.3M細(xì)胞、SUDHL-8細(xì)胞
LS-411N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-87細(xì)胞、H1648細(xì)胞、MESSA細(xì)胞
LS-174細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN-93細(xì)胞、NCI-H1703細(xì)胞、HCC-2279細(xì)胞
HCC78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-SH細(xì)胞、SK-MEL2細(xì)胞、SW-837細(xì)胞
NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293GP細(xì)胞、KY70細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞
HCC827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 148細(xì)胞、CHO-S細(xì)胞、NTERA-2/D1細(xì)胞
OVCAR 433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO394細(xì)胞、SMMC7721細(xì)胞、RPMI 8226細(xì)胞
COLO 320HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 72細(xì)胞、OV90細(xì)胞、HHL-5細(xì)胞
PLA 802細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7ADR細(xì)胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞、MGH-UI細(xì)胞
SUM149-PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC-LM3細(xì)胞、Vero E-6細(xì)胞、NOMO-1細(xì)胞
H322T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H676B細(xì)胞、MV-522細(xì)胞、U138MG細(xì)胞
Hs 821.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH-35細(xì)胞、SK Mel 24細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞
HFLS-OA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFF-1細(xì)胞、L5178-R細(xì)胞、COV 434細(xì)胞
SW48細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2452細(xì)胞、LAN5細(xì)胞、RS4:11細(xì)胞
PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHSY5Y細(xì)胞、QBI-293A細(xì)胞、NCIH1623細(xì)胞
SU-DHL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SL-1細(xì)胞、H2227細(xì)胞、B-CPAP細(xì)胞
Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/O-Ag14細(xì)胞、PG-LH7細(xì)胞、CAL-27細(xì)胞
THEECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE2細(xì)胞、NTC200細(xì)胞、L-5178-Y-R細(xì)胞
NK92MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 450細(xì)胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞、Lu99A細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO-81細(xì)胞、A2058細(xì)胞、AdHek細(xì)胞
C17.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U 138 MG細(xì)胞、Eca109細(xì)胞、U266S細(xì)胞
PJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HRI細(xì)胞、SNU-878細(xì)胞、HOP 62細(xì)胞
MOLM16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16-HBE14o細(xì)胞、CEM-CCRF細(xì)胞、HSF細(xì)胞
MHHCALL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-24細(xì)胞、Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞、WM35細(xì)胞
786-O RCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA 560細(xì)胞、Murine Carcinoma-38細(xì)胞、VK2/E6E7細(xì)胞
RBL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBVEC細(xì)胞、Hs 604.T細(xì)胞、GM00215細(xì)胞
870細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650細(xì)胞、BTI-Tn5B14細(xì)胞、EFO 27細(xì)胞
DMS 273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN-3細(xì)胞、OCI-Ly7細(xì)胞、Hs940-T細(xì)胞
TCC Sup細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 695.T細(xì)胞、OCI-Ly01細(xì)胞、OCILY10細(xì)胞
HPDE epithelioid cells胰腺正常導(dǎo)管上皮細(xì)胞系
HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1S1細(xì)胞、M-07e細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞
HT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM35細(xì)胞、NCI-H460細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞
NL20SV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA-c細(xì)胞、SKG-IIIa細(xì)胞、H716細(xì)胞
SMMC7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTLA4Ig-24細(xì)胞、AML193細(xì)胞、A875細(xì)胞
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