"WISH epithelioid cells人羊膜細胞系
細胞背景資料：最初以為這株細胞的起源是正常羊膜，但隨后通過同工酶分析、HeLa標記染色體和DNA指紋法分析，證實該細胞是HeLa細胞污染的；角蛋白陽性。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
TCMK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT.64細胞、OCI Ly1細胞、H-23細胞
Sf-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KAT5細胞、MiaPaca.2細胞、PC10細胞
B16 melanoma F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH69細胞、OKT3細胞、EFO-27細胞
細胞生長：貼壁
WISH epithelioid cells人羊膜細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應立即停用，更換另一批號的血清。
細胞傳代方法：１：２-１：４傳代，每周２-３次。
CL1-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞、NCIADR.RES細胞、PK(15)細胞
Med 283細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeT5A細胞、CHO-Lec1細胞、MS751細胞
EBTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE2細胞、SNU869細胞、TSU-Pr1細胞
PG-4 (S+L-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SB細胞、MCF7細胞、COC1/CDDP細胞
RCC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549細胞、KPL1細胞、COLO 320 HSR細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
WISH epithelioid cells人羊膜細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
LS-411細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1693細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞、OVCA433_Bast細胞
MDA MB 175 VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、H-1623細胞、TO 175.T細胞
IPLB-SF-21-AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL24細胞、SCC154細胞、JC細胞
NCI-H1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A3細胞、Strain V細胞、B16細胞
CEM-CCRF (CAMR)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-358細胞、SKM-1細胞、Epstein-Barr-3細胞
LCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-520細胞、ISHI細胞、GM12878細胞
UPCI-SCC-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI AML4細胞、SU-DHL-10細胞、HCCC-9810細胞
H-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞
EBNA293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-I細胞、OV-1063細胞、MiaPaCa2細胞
NH6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MonoMac6細胞、WERI細胞、HDQ-P1細胞
WISH epithelioid cells人羊膜細胞系
H1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV1細胞、HT55細胞、NL20細胞
TE 32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-5 Lec1.3c細胞、T-ALL 1細胞、NCI-H23細胞
SW 1222細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2029細胞、T. T細胞、CAL 51細胞
H-719細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caki2細胞、H1155細胞、HuT 102細胞
GES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293FT細胞、Hs832.Tc細胞、MG-HU-3細胞
OCI-Ly1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THPI細胞、Mahlavu細胞、HCC1500細胞
OCI-Ly1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THPI細胞、Mahlavu細胞、HCC1500細胞
NCIH23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mIMCD-3細胞、SUPM2細胞、U-118-MG細胞
huH 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma細胞、D283 Med細胞、343MG細胞
RK 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2405細胞、HNE3細胞、SNU601細胞
LNCaP-ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLA 144細胞、Japanese Tissue Culture-28細胞、P3HRI細胞
Hs1.Tes細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hCMEC/D3細胞、UT7細胞、RPTEC/TERT 1細胞
U-251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1116細胞、EC-GI-10細胞、P 3 HR 1細胞
OS-RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC2細胞、SF-767細胞、3T6細胞
SK MES 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.3細胞、D-283MED細胞、LNCaP C4-2細胞
HGF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAN 02細胞、SNU-869細胞、JIMT-1細胞
CORL279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MILE SVEN1細胞、SR細胞、U87 MG細胞
HS-729細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞、SKNMC細胞、RPMI 6666細胞
B5537SKIN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLTC-1細胞、HT 29細胞、OVCAR-3細胞
NRK49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN4741細胞、GM04678細胞、3T3-L1 ad細胞
HREC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1672細胞、J.E6-1細胞、PLC-PRF-5細胞
NCI-H2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DV90細胞、TGBC11T細胞、ISHI細胞
Vero 76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(1)細胞、HM細胞、PG-4 S+L-細胞
P-388細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC-3細胞、SKNBE2細胞、HLF細胞
Ramos (RA 1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hESC細胞、K7M2 wt細胞、SW-1990細胞
SK-NSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV-362細胞、HCC 38細胞、C4-1細胞
HSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-596細胞、Kasumi-1細胞、NCI-SNU-C2A細胞
FRTL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-675-T細胞、P3X63Ag8.653細胞、SO-RB50細胞
HANK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA-38細胞、H-1781細胞、NCI-H322細胞
K422細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N2a細胞、DHL-8細胞、Chang Cells細胞
MCF12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hs 68細胞、MGc80-3細胞、TM4細胞
MC38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QG56細胞、H-1238細胞、OCM1A細胞
C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCC-SUP細胞、GAK細胞、CII細胞
H1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-209細胞、HuH1細胞、Ku812細胞
BEL7402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、2PK3細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞
BLO11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H508細胞、H522細胞、C918細胞
L 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUNE-1細胞、HPAF-II/CD18細胞、H711細胞
MuM-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG細胞、KYSE 70細胞、CL34細胞
MuM-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG細胞、KYSE 70細胞、CL34細胞
T-ALL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR75-30細胞、NUGC-3細胞、OCI-Ly 19細胞
H2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo-K1細胞、P388細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞
MARC145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRH-0201細胞、IPLB-SF-21-AE細胞、HCC2157細胞
UPCI:SCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha-TC1.6細胞、HP615細胞、EFM-19細胞
T_T_細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BN-CL2細胞、NCIH82細胞、LP1細胞
H727細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM-1細胞、A2780/CP70細胞、NCI-H358細胞
HT-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS578細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、HcerEpic細胞
CNLMG-B5537SKIN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC90細胞、L 540細胞、SK-N-BE2細胞
SNU16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL39細胞、FL 62891細胞、RIN14B細胞
HCe-8693細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-16細胞、UACC893細胞、OCIAML5細胞
H-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1648細胞、NALM6細胞、H4IIE細胞
CCD 966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS 751細胞、DHL8細胞、TGBC11TKB細胞
WISH epithelioid cells人羊膜細胞系
HuH28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHH4細胞、LS 513細胞、PTK-2細胞
639V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs695T細胞、201T細胞、EAhy 926細胞
LS 180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-1080細胞、L 929細胞、JTC-28細胞
IPLB-Sf21AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H378細胞、HRA-19細胞、NS1-Ag4/1細胞
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