BCIP/NBT堿性磷酸酯酶顯色試劑盒
中文名稱:BCIP/NBT堿性磷酸酯酶顯色試劑盒
英文名稱:BCIP/NBT Alkaline Phosphatase Color Development Kit
產(chǎn)品規(guī)格:共100ml
BCIP/NBT 堿性磷酸酯酶顯色試劑盒是一種用于免疫組化顯色、Western 等膜顯色和誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞iPS 鑒定等的試劑盒。 BCIP/NBT 是堿性磷酸酯酶的常用底物。在堿性磷酸酯酶的催化下,BCIP 會(huì)被水解產(chǎn)生強(qiáng)反應(yīng)性的產(chǎn)物,該產(chǎn)物會(huì)和NBT 發(fā)生反應(yīng),形成不溶性的深藍(lán)色至藍(lán)紫色的NBT-formazan。 本試劑盒可以用于細(xì)胞或組織的堿性磷酸酯酶顯色包括誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞iPS 的鑒定,也可以用于Western 等結(jié)合有堿性磷酸酯酶的膜的顯色檢測(cè)。同時(shí)也可以用于細(xì)胞或組織內(nèi)源性的堿性磷酸酯酶顯色。 組份規(guī)格: 試劑A:堿性磷酸酯酶顯色緩沖液 100ml 試劑B:BCIP 溶液(300X) 350μl 試劑C:NBT 溶液(150X) 700μl 使用說(shuō)明 1. 對(duì)于組織切片或細(xì)胞樣品或膜,在與堿性磷酸酯酶標(biāo)記的抗體或其它形式的探針?lè)跤?,用適當(dāng)洗滌液洗滌3-5 次,每次3-5 分鐘。對(duì)于檢測(cè)內(nèi)源性堿性磷酸酯酶的組織或細(xì)胞樣品,在適當(dāng)固定后,也用適當(dāng)洗滌液洗滌3-5 次,每次3-5 分鐘。 2. 按照如下比例依次加入各溶液,混勻后即配制成BCIP/NBT 染色工作液,配方如下:試劑A:堿性磷酸酯酶顯色緩沖液 3mL試劑B:BCIP 溶液(300X) 10μL試劑C:NBT 溶液(150X) 20μL染色工作液總體積:3.03mL 3. 最后一次洗滌完畢后,去除洗滌液,加入適量BCIP/NBT 染色工作液,確保能充分覆蓋樣品。 4. 室溫避光孵育5-30 分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間(可長(zhǎng)達(dá)24 小時(shí)),直至顯色至預(yù)期深淺。 5. 去除BCIP/NBT 染色工作液,用蒸餾水洗滌1-2 次即可終止顯色反應(yīng)。 6. 對(duì)于組織切片或細(xì)胞樣品,顯色反應(yīng)終止后,如有必要可以用中性紅染色液(neutral red staining solution)染色,以便于觀察。對(duì)于膜,顯色反應(yīng)終止后,可以室溫晾干避光保存。 儲(chǔ)存:4℃,有效期一年。
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