"HCA7 epithelioid cells人結(jié)腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:結(jié)腸腺癌;女性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長(zhǎng)成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。
HCASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR-8383細(xì)胞、J-774細(xì)胞、MA-104細(xì)胞
MMAc-SF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEB細(xì)胞、Kit-225-K6細(xì)胞、MB157細(xì)胞
3T3J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMRC2細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
HCA7 epithelioid cells人結(jié)腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長(zhǎng),用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來,很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕,避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng):二、細(xì)胞細(xì)化太過,細(xì)胞成片脫落,吹打時(shí)沒有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn):HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng),一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
RMS 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1793細(xì)胞、EBC1細(xì)胞、LC-1Sq細(xì)胞
ACC-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF10-A細(xì)胞、NFS60細(xì)胞、HN13細(xì)胞
KYSE70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TF-1細(xì)胞、H-1838細(xì)胞、52PE細(xì)胞
NCI-H1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKGIIIA細(xì)胞、HuH28細(xì)胞、TK.10細(xì)胞
NCIH69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD 2細(xì)胞、H-1963細(xì)胞、ASPC1細(xì)胞
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HCA7 epithelioid cells人結(jié)腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。
OCI AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 839細(xì)胞、MOLP-8細(xì)胞、OVISE細(xì)胞
HCFB(HCF)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-231細(xì)胞、MG63細(xì)胞、OVCAR 420細(xì)胞
GM04671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HONE-1細(xì)胞、Karpas-299細(xì)胞、H735細(xì)胞
GC9811-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip973細(xì)胞、HNE-3細(xì)胞、BE2_C細(xì)胞
NCIH1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMSC細(xì)胞、D341細(xì)胞、T. T細(xì)胞
MDA2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00079細(xì)胞、LC1/Sq細(xì)胞、NCTC clone 1469細(xì)胞
MDA-MB-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H28細(xì)胞、3T3 L1細(xì)胞、HEK 293FT細(xì)胞
ROS 17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLFa細(xì)胞、293 Ad5細(xì)胞、UMNSAH-DF 1細(xì)胞
SW-1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞、MODE-K細(xì)胞
Panc4.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMG-1細(xì)胞、EB2細(xì)胞、Melanoma 14細(xì)胞
HCA7 epithelioid cells人結(jié)腸腺癌細(xì)胞系
LK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAEC細(xì)胞、COLO 829細(xì)胞、A1847細(xì)胞
Y3Ag1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLMS1細(xì)胞、SNU16細(xì)胞、MDA MB 361細(xì)胞
NB1-RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D10.G4.1細(xì)胞、SW 1116細(xì)胞、C-4 I細(xì)胞
CHL-CL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AE1201細(xì)胞、H-2228細(xì)胞、H125細(xì)胞
HT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM35細(xì)胞、MIHA細(xì)胞、SNU1細(xì)胞
HCV 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly19細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞、OSRC2細(xì)胞
HCV 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly19細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞、OSRC2細(xì)胞
BNL CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT 20細(xì)胞、MDA2B細(xì)胞、Hs-600-T細(xì)胞
Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM-5A細(xì)胞、SU-DHL-2細(xì)胞、RASMCs細(xì)胞
EFO-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA-802細(xì)胞、NCIH1092細(xì)胞、PNT1A細(xì)胞
Walker/LLC-WRC 256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05384細(xì)胞、Panc8.13細(xì)胞、HCT 8細(xì)胞
HuPT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-38細(xì)胞、Loucy細(xì)胞、SJSA1細(xì)胞
GAK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC-364細(xì)胞、C-28I2細(xì)胞、SVEC4-10細(xì)胞
MES-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSK-1細(xì)胞、CTLL(2)細(xì)胞、Calu3細(xì)胞
HEK-293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞、Caki2細(xì)胞、GES-1細(xì)胞
NS-I/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3J2細(xì)胞、WRL-68細(xì)胞、SNUC2B細(xì)胞
HuH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H747細(xì)胞、Wien133細(xì)胞、AKR細(xì)胞
NCI-H1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L23細(xì)胞、Madison 109細(xì)胞、C643細(xì)胞
TF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chang liver細(xì)胞、Alexander cells細(xì)胞、hTERT RPE1細(xì)胞
Rat Skin 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA SO M21細(xì)胞、B16BL-6細(xì)胞、CAL39細(xì)胞
EAhy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU86_86細(xì)胞、SK-MES-1細(xì)胞、huH 1細(xì)胞
PANC0203細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-BR3細(xì)胞、SNU423細(xì)胞、HeLa 229細(xì)胞
McG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3.AG.1.2.3細(xì)胞、HPDEC細(xì)胞、ECV-304細(xì)胞
L 1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHP10-3細(xì)胞、NCI-SNU-5細(xì)胞、NCI-H2073細(xì)胞
SW1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JEKO細(xì)胞、MOLM-16細(xì)胞、Hs1.Tes細(xì)胞
OCUM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-157細(xì)胞、NCI-H1666細(xì)胞、HEK (AD293)細(xì)胞
CAL33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-1846細(xì)胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞、F-81細(xì)胞
Panc4.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMG-1細(xì)胞、EB2細(xì)胞、Melanoma 14細(xì)胞
PLB985細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-5WgaRI3C細(xì)胞、P30-OHKUBO細(xì)胞、Panc-05.04細(xì)胞
RPMI7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、HT144細(xì)胞、TGW-nu細(xì)胞
T-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22-Rv1細(xì)胞、32D clone3細(xì)胞、SBC-5細(xì)胞
GM03569D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO-211H細(xì)胞、MDA MB 175 VII細(xì)胞、HL-60 clone15細(xì)胞
TE-85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、MDCK Type II細(xì)胞、COLO-320細(xì)胞
UCLA SO M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAVER-1細(xì)胞、Mono Mac 6細(xì)胞、SF-295細(xì)胞
Hs 706.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC4細(xì)胞、HCC1438細(xì)胞、HCC-1599細(xì)胞
TE-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-20細(xì)胞、C33A細(xì)胞、HEC1A細(xì)胞
SF17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2157細(xì)胞、OCI-Ly3細(xì)胞、SK-N-BE-2細(xì)胞
SHG-44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4細(xì)胞、A253細(xì)胞、SF295細(xì)胞
GRSL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Granta519細(xì)胞、DBTRG-05MG細(xì)胞、NCI-H1836細(xì)胞
Hs27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K299細(xì)胞、OS-732細(xì)胞、HCC-44細(xì)胞
MKN7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 1細(xì)胞、HS-445細(xì)胞、WM266mel細(xì)胞
NCIH740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:95C細(xì)胞、NCI-H3255細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞
SBC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC4006細(xì)胞、NCIH716細(xì)胞、RM-1細(xì)胞
LS 1034細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞、LY細(xì)胞、OVCA 433細(xì)胞
MOLP2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA231細(xì)胞、Panc2.03細(xì)胞、PTK1細(xì)胞
HOP92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF.7細(xì)胞、OCI-Ly03細(xì)胞、KYSE-270細(xì)胞
PF-382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT-102細(xì)胞、Hs888 Lu細(xì)胞、SNU-398細(xì)胞
SNU-354細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK RC 20細(xì)胞、Ketr-3細(xì)胞、NCTC-1469細(xì)胞
DSL6A/C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-4細(xì)胞、SW 900細(xì)胞、LK-2細(xì)胞
CPA 47細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954-BL細(xì)胞、CEM T4細(xì)胞、FHL-124細(xì)胞
H-2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S-16細(xì)胞、hOMF細(xì)胞、BCaP 37細(xì)胞
HCA7 epithelioid cells人結(jié)腸腺癌細(xì)胞系
D-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8細(xì)胞、138 MG細(xì)胞、SNU1040細(xì)胞
SW982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞、NCIH2405細(xì)胞、HepG2/C3A細(xì)胞
FUOV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320 DM細(xì)胞、SW 948細(xì)胞、MDAMB330細(xì)胞
GM04154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE-1細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞、Caov-3細(xì)胞
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