"KLN205 epithelioid cells小鼠肺鱗癌細胞系
細胞背景資料：肺；鱗癌細胞；DBA
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
MS-751細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1184細胞、COLO.205細胞、H847細胞
BAR-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293F細胞、H22-H8D8細胞、CWR-22rv1細胞
LA-N-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NIH:OVCAR-8細胞、LAD-2細胞
細胞生長：貼壁
KLN205 epithelioid cells小鼠肺鱗癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Wistar Institute-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK(15)細胞、WM115細胞、PC 61-5-3細胞
CAL-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mRMEC細胞、KYSE180細胞、HS766T細胞
WISH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN 93細胞、OVCA433細胞、SW-1116細胞
hTERT-RPE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA'87細胞、MEG-01細胞、Adeno-293細胞
NCIH1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHG-5細胞、293-GP細胞、JIII細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
KLN205 epithelioid cells小鼠肺鱗癌細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
Michigan Cancer Foundation-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST486細胞、VP303細胞、3T3-J2細胞
MGH-UI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASH3細胞、Bovine Turbinate細胞、SK-MEL3細胞
CemT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1937細胞、X63-Ag8細胞、GM2219C細胞
SkMel31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22R-V1細胞、LS-174細胞、32D:cl3細胞
WEHI-164細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC 3細胞、3T3(A31)細胞、PC-3M-1E8細胞
UCLA RO-81-A-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 EBNA細胞、Molm 13細胞、SUDHL8細胞
CT-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Immortal Pig Intestinal-2I細胞、Hs-606-T細胞、A2780/Taxol細胞
NIH:OVCAR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK 52E細胞、Epstein-Barr-2細胞、SR細胞
MDAPC2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M07e細胞、H2106細胞、SF539細胞
SP2/0 Ag-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cloudman S91 melanoma細胞、KTA7細胞、Psi-2-DAP細胞
KLN205 epithelioid cells小鼠肺鱗癌細胞系
TE-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien-133細胞、Daudi細胞、Wien 133細胞
SKLU01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 239細胞、MM-1S細胞、ATDC-5細胞
HPAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero細胞、FBHE細胞、SK-SH-SY5Y細胞
SUM149細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM7細胞、PA317細胞、SP-2/0-AG14細胞
GLC-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2C12細胞、NCI-H292細胞、1E8-H細胞
H-711細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03570細胞、SNK1細胞、NIT-1細胞
H-711細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03570細胞、SNK1細胞、NIT-1細胞
Pro-5 Lec1.3c細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH28細胞、VM Cub 1細胞、HS-294T細胞
KY70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 4細胞、SNU398細胞、Malme-3M細胞
HEC151細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Monomac-1細胞、LN-382細胞、253J細胞
F36P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MiaPaCa-2細胞、WM-266-4細胞、373MG細胞
HPAF-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reh細胞、DMS114細胞、A375-SM細胞
HO1-N1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-8細胞、Dakiki細胞、YH-13細胞
TALL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VERO76細胞、293-H細胞、SHZ-88細胞
PK (15)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM07404D細胞、Hs-578T細胞、NCIH2286細胞
UCLA-SO-M14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C22細胞、NCIH1563細胞、MLE 12細胞
VERO76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3CA細胞、SCC090細胞、CAKI.1細胞
Kit 225細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCC-IT細胞、MC3T3-L1細胞、NFHIOSE-29細胞
D6P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL1細胞、SAS細胞、Hs 675.T細胞
D6P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL1細胞、SAS細胞、Hs 675.T細胞
IMR 90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-398細胞、SCLC-21H細胞、Sp2/mIL-6細胞
hMSC-BM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YT細胞、FAO-1細胞、NCIH1755細胞
RCC-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO-1細胞、OCI-Ly 18細胞、NCIH1355細胞
HT-144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMC-1細胞、SU-DH-L5細胞、Line 522細胞
B16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-08.13細胞、CCD33Co細胞、Panc-8_13細胞
U-251_MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGT4細胞、MDA-MB-134VI細胞、A673細胞
TW01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI3B細胞、CCD966SK細胞、SKRC-39細胞
CV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 1112SK細胞、HCPEpiC細胞、WiDrTC細胞
NCI-H2198細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca761細胞、OVCAR5細胞、DSL6A/C1細胞
CAL-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 subline B78細胞、EA.hy 926細胞、MC-3T3-E1細胞
IM-95細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-204細胞、AMJ2-C8細胞、JB6 Cl 30-7b細胞
Hs294T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAPCa-2b細胞、DanG細胞、J-82細胞
H2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reuber H-35細胞、LP-1細胞、NCI-Hut 125細胞
SNU-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSC-34細胞、751-NA-15細胞、CPA 47細胞
OVCA5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-10-05細胞、ML2細胞、MDA-MB-134-VI細胞
PL-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-29細胞、NCIH508細胞、NPC-039細胞
PATU-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHZ-88細胞、NCI-460細胞、SW620細胞
M-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW626細胞、NIH 3T6細胞、BNL-CL.2細胞
CAL-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1435細胞、COLO 680N細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞
P-388D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1063細胞、L-Wnt3A細胞、Neuro 2a細胞
KP2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs832.Tc細胞、PAa細胞、NRCC細胞
UACC 812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-952細胞、VMM5細胞、Tu212細胞
Hs 729T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA175細胞、3T3-F442A細胞、SW1463細胞
SNU216細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MyLa 2059細胞、DI-TNC1細胞、HeLa細胞
BE(2)C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 149PT細胞、NT2/D1細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞
EAHY-926細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCCPAN2細胞、RMS13細胞、RKOAS451細胞
DKMG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NR8383.1細胞、ECC 12細胞、Hs821T細胞
HEK-AD293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KASUMI1細胞、ROS1728細胞、LA-N-5細胞
HL-7702細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly3細胞、H508細胞、BPH1細胞
DHL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTHY-ORI3.1細胞、Panc-813細胞、H2110細胞
P31FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-16細胞、ME1細胞、FU-OV-1細胞
KLN205 epithelioid cells小鼠肺鱗癌細胞系
Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-84細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、PA I細胞
Hs 343.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TN5B14細胞、P31-FUJ細胞、HCC-1428細胞
H9c2 (2-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT clone H9細胞、HCC-1438細胞、HNE1細胞
CemT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1937細胞、Panc 04.03細胞、HT(H9)細胞
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