"JB6 [Mouse] epithelioid cells小鼠表皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：表皮；自發(fā)永生；BALB/c
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會(huì)受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個(gè)說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
H22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 70細(xì)胞、Y3Ag1.2.3細(xì)胞、Glioma 261細(xì)胞
EAhy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU86_86細(xì)胞、SK-MES-1細(xì)胞、huH 1細(xì)胞
WI 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-346細(xì)胞、MOLT-4細(xì)胞、Okayama University Medical School-27細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
JB6 [Mouse] epithelioid cells小鼠表皮細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個(gè)月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因?yàn)闀?huì)阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”，常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會(huì)使此沈淀物增多，更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號(hào)的血清。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
RCC-10RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2細(xì)胞、HCC0038細(xì)胞、NHLF細(xì)胞
Nb 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3F442A細(xì)胞、A-549細(xì)胞、G401細(xì)胞
T-ALL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR75-30細(xì)胞、NUGC-3細(xì)胞、OCI-Ly 19細(xì)胞
MiaPaCa2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC151細(xì)胞、CA 46細(xì)胞、KM12SM細(xì)胞
NCIH2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCECs細(xì)胞、L23/P細(xì)胞、ECC1細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
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細(xì)胞生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
AC16 [Human hybrid]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU86.86細(xì)胞、L2細(xì)胞、L23/P細(xì)胞
P-815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8細(xì)胞、Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞、Panc-327細(xì)胞
HA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS/MNNG細(xì)胞、UCW 100細(xì)胞、SCC VII細(xì)胞
NCI-H187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCK8細(xì)胞、Y 1細(xì)胞、HEK-293H細(xì)胞
ETCC-007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92-1-7細(xì)胞、UT-7細(xì)胞、HCC1187細(xì)胞
HCC-1143細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞、VMCUB-1細(xì)胞、M-07e細(xì)胞
LO2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE 29細(xì)胞、NR 8383細(xì)胞、Hs 695T細(xì)胞
Psi2 DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH128細(xì)胞、A9(Hamprecht)細(xì)胞、ML2細(xì)胞
MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCF細(xì)胞、H184A1細(xì)胞、CAL 148細(xì)胞
RPTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES13細(xì)胞、293A細(xì)胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞
JB6 [Mouse] epithelioid cells小鼠表皮細(xì)胞系
MDA-MB-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V79-4細(xì)胞、H82細(xì)胞、Ra No. 1細(xì)胞
NCIH647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225-K6細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞、CX1細(xì)胞
MCF7-CTRL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK HEP-1細(xì)胞、RS411細(xì)胞、Caco-2細(xì)胞
NCIH2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-865細(xì)胞、SHG 44細(xì)胞、143TK-細(xì)胞
B16/F0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/ag細(xì)胞、SW-839細(xì)胞、ATN1細(xì)胞
M 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D.cl3細(xì)胞、NCIH187細(xì)胞、639 V細(xì)胞
M 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D.cl3細(xì)胞、NCIH187細(xì)胞、639 V細(xì)胞
SV40-HCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-Mar細(xì)胞、Capan 2細(xì)胞、Nthy ori 3.1細(xì)胞
TKB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryo Lung-1細(xì)胞、AMC-HN-8細(xì)胞、KYSE270細(xì)胞
HCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HARAB細(xì)胞、VSC4.1細(xì)胞、B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞
HTori-3.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7405細(xì)胞、TEC細(xì)胞、P3HR-1細(xì)胞
OVCAR-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WML2細(xì)胞、MBT2細(xì)胞、H-2591細(xì)胞
Panc05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCPEpiC細(xì)胞、SW.620細(xì)胞、AtT20細(xì)胞
Kit-225細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC8024細(xì)胞、ST486細(xì)胞、NCIH209細(xì)胞
Meat Animal Research Center-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hu-P-T3細(xì)胞、CWR22R細(xì)胞、CCD-841-CoN細(xì)胞
HONE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4 S+L-細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞、H1522細(xì)胞
HT-1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMJ2C8細(xì)胞、Capan-2細(xì)胞、U266細(xì)胞
QGY7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U343細(xì)胞、CX1細(xì)胞、AM細(xì)胞
SKNBE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PGBE1細(xì)胞、C26細(xì)胞、DHL-2細(xì)胞
A 375細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 746T細(xì)胞、MCF-7/ADR細(xì)胞、451Lu細(xì)胞
HFLS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC11細(xì)胞、HCC-9204細(xì)胞、HEM細(xì)胞
ECC10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT116細(xì)胞、AM-38細(xì)胞、UPCISCC090細(xì)胞
TE-85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、MDCK Type II細(xì)胞、COLO-320細(xì)胞
L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PMVEC細(xì)胞、DU-4475細(xì)胞、NCI-SNU-668細(xì)胞
SN12CPM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40-HCEC細(xì)胞、COLO 320HSR細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞
NCIH2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-48細(xì)胞、MFE296細(xì)胞、KOPN8細(xì)胞
CEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FCCH1024細(xì)胞、U266S細(xì)胞、H-2342細(xì)胞
YD15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs940T細(xì)胞、Emory University-2細(xì)胞、SKNO-1細(xì)胞
H35 Reuber細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞、RN細(xì)胞、MMAc-SF細(xì)胞
G 292 Clone A 141B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-HEECs細(xì)胞、COV504細(xì)胞、X63-AG 8.653細(xì)胞
HB611細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8/SVneo細(xì)胞、Human Kidney-2細(xì)胞、HCFB（HCF）細(xì)胞
578T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME1細(xì)胞、MES 23.5細(xì)胞、HT 29細(xì)胞
HPAF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729細(xì)胞、SKMEL-24細(xì)胞、SNK1細(xì)胞
Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-PCa-2b細(xì)胞、HT-22細(xì)胞、293FT細(xì)胞
HEp-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-E6細(xì)胞、HCC38細(xì)胞、beta TC6細(xì)胞
PIEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-SH-SY5Y細(xì)胞、GC-1 spg細(xì)胞、WiDr-TC細(xì)胞
HCC38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2171細(xì)胞、Hs 766.T細(xì)胞、MGC803細(xì)胞
HSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 H細(xì)胞、HOP 62細(xì)胞、WI-38細(xì)胞
M 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D.cl3細(xì)胞、NCIH187細(xì)胞、639 V細(xì)胞
OCILY-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 888Lu細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞、P3X63 Ag8.653細(xì)胞
U373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASPC1細(xì)胞、BIC1細(xì)胞、Y-79細(xì)胞
A375S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1341細(xì)胞、PANC 1005細(xì)胞、PNT1-a細(xì)胞
COLO 741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H820細(xì)胞、hs 68細(xì)胞、LA-795細(xì)胞
EVSA/T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-5細(xì)胞、NCI-H196細(xì)胞、A9細(xì)胞
HCA-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP267細(xì)胞、Hep G2-Luc細(xì)胞、PBL細(xì)胞
AZ 521細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A72細(xì)胞、H1651細(xì)胞、U-343-MG細(xì)胞
Anip-973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D 407細(xì)胞、HR-8348細(xì)胞、RKOE6細(xì)胞
HFL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tregs細(xì)胞、HT1376細(xì)胞、H-295細(xì)胞
TE9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569細(xì)胞、NCIH838細(xì)胞、RPMI-6666細(xì)胞
PL9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞、CAKI1細(xì)胞、MDA-MB-231-GFP細(xì)胞
SKES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison 109細(xì)胞、Hs819.T細(xì)胞、HONE1細(xì)胞
JB6 [Mouse] epithelioid cells小鼠表皮細(xì)胞系
SW 48細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCe-8693細(xì)胞、MFHL-2細(xì)胞、Detroit-562細(xì)胞
UACC-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144-mel細(xì)胞、SKMEL28細(xì)胞、ELD-1細(xì)胞
MHCC 97-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT-26 WT細(xì)胞、SW 620細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞
HAVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC95細(xì)胞、ChaGo-K-1細(xì)胞、NCI-H1930細(xì)胞
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