"TGW epithelioid cells人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀(guān)察待細(xì)胞始脫落時(shí),棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇,因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落,對(duì)腫瘤細(xì)胞來(lái)說(shuō),這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴(lài)殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問(wèn)題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過(guò)有人說(shuō)EDTA對(duì)細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞! 32D clone3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A9細(xì)胞、4T1-A細(xì)胞、PANC-02-03細(xì)胞 H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1882細(xì)胞、SK N SH細(xì)胞、CEM.C1細(xì)胞 ACHN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCV 29細(xì)胞、BrCL18細(xì)胞、MDA-MB-468細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 TGW epithelioid cells人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的衰老:體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)證明:成纖維細(xì)胞:來(lái)自胎兒傳代50次后衰老死亡,來(lái)自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān);來(lái)自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來(lái)自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細(xì)胞衰老過(guò)程中會(huì)發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時(shí),細(xì)胞核,線(xiàn)粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細(xì)胞衰老原因,尚無(wú)定論,出現(xiàn)過(guò)好幾種理論與假說(shuō),其中得到較廣泛認(rèn)可的是“自由基損傷假說(shuō)”。細(xì)胞凋亡:細(xì)胞的死亡是個(gè)體存活的正常現(xiàn)象,常見(jiàn)的細(xì)胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細(xì)胞毒性。多細(xì)胞生物的生命活動(dòng)中,因?yàn)榄h(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導(dǎo)致一部分細(xì)胞死去,稱(chēng)為細(xì)胞的病理死亡,或細(xì)胞壞死。壞死是細(xì)胞暴露于嚴(yán)重的物理或化學(xué)刺激時(shí)導(dǎo)致的細(xì)胞死亡;細(xì)胞毒性是由細(xì)胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細(xì)胞殺傷事件,不依賴(lài)于其它兩種細(xì)胞死亡機(jī)理,如殺傷T細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。還有一種情況,一部分細(xì)胞的死亡是生物個(gè)體正常生命活動(dòng)(代謝、生長(zhǎng)、發(fā)育、分化)的一個(gè)必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細(xì)胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱(chēng)為細(xì)胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細(xì)胞死亡,是機(jī)體清除無(wú)用的或者不想要的細(xì)胞的手段。它與細(xì)胞壞死是兩個(gè)截然不同的過(guò)程,無(wú)論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來(lái)說(shuō),都有明顯的區(qū)別。細(xì)胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞增殖、分化和衰老起著互補(bǔ)與平衡的作用,在多細(xì)胞動(dòng)物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細(xì)胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結(jié)果將是可怕的:凋亡不足時(shí),易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過(guò)量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細(xì)胞凋亡及其機(jī)理具有重要的理論和實(shí)踐意義。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 SK HEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-H細(xì)胞、HTR8細(xì)胞、HTori 3細(xì)胞 OVCAR4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL45細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞、H-2195細(xì)胞 Capan-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-1細(xì)胞、SNU-520細(xì)胞、RPMI1846細(xì)胞 NCI-SNU-761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293細(xì)胞、KM12細(xì)胞、SNU-182細(xì)胞 SuDHL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSKMC細(xì)胞、BE2M17細(xì)胞、NCIH3255細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 TGW epithelioid cells人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:神經(jīng)元細(xì)胞 細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀(guān)察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí));2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。 LAD2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPEC-1細(xì)胞、RGB細(xì)胞、WERIRb1細(xì)胞 SUSM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2073細(xì)胞、Hs604T細(xì)胞、MKN45細(xì)胞 GM03320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.OV.3細(xì)胞、675T細(xì)胞、L-02細(xì)胞 KP-N-RT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1563細(xì)胞、Ca-Ski細(xì)胞、HG2855細(xì)胞 NCIN87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1876細(xì)胞、NCIH841細(xì)胞、NCI-H2405細(xì)胞 OCI-Ly 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-HEP-1細(xì)胞、UCLA RO-81-A-1細(xì)胞、J 82細(xì)胞 NCI-BL2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO31細(xì)胞、H3255_DA細(xì)胞、HO8910/PM細(xì)胞 L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-12細(xì)胞、HCC2108細(xì)胞、CHP 100細(xì)胞 MB-49細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT29細(xì)胞、KOPN-8細(xì)胞、UC-3細(xì)胞 639-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU-8988S細(xì)胞、CAL27細(xì)胞、NCI-H1435細(xì)胞 TGW epithelioid cells人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 PIGI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GTL 16細(xì)胞、HS-683細(xì)胞、Y3細(xì)胞 SUPB15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12C-PM6細(xì)胞、HRPEpiC細(xì)胞、A 2058細(xì)胞 HT-144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMC-1細(xì)胞、SU-DH-L5細(xì)胞、Line 522細(xì)胞 HNE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKN-AS細(xì)胞、Panc-05.04細(xì)胞、HPAEC細(xì)胞 M4e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GBCSD細(xì)胞、JeKo 1細(xì)胞、H676B細(xì)胞 SW 620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-650細(xì)胞、SKMEL2細(xì)胞、Hs695細(xì)胞 SNU387細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3L1細(xì)胞、SNU739細(xì)胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞 IEC-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:McA-RH7777細(xì)胞、CTV1細(xì)胞、Kit 225細(xì)胞 LuCL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD 18細(xì)胞、BC-025細(xì)胞、Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞 H-727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293A細(xì)胞、U251細(xì)胞、PK-13細(xì)胞 B16F0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-FT細(xì)胞、NCI H2106細(xì)胞、MLA144細(xì)胞 Case 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2106細(xì)胞、BGC823細(xì)胞、H1666細(xì)胞 NCIH1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03570E細(xì)胞、COLO-738細(xì)胞、TOV112D細(xì)胞 JKT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEYA8細(xì)胞、NCI-SNU-449細(xì)胞、HCC0366細(xì)胞 HOCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi2-DAP細(xì)胞、RPMI1788細(xì)胞、Clone Y1細(xì)胞 SKN-SH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs606細(xì)胞、GOS-3細(xì)胞、B16-F0細(xì)胞 CHOK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC20細(xì)胞、R 1610細(xì)胞、KHYG-1細(xì)胞 K-1735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786.O細(xì)胞、Calu 6細(xì)胞、HSAS3細(xì)胞 Granta 519細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HET-1A細(xì)胞、J 774A.1細(xì)胞、Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞 RPMI No. 1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2081細(xì)胞、MDA-MB-231 #4175細(xì)胞、SK-OV-3細(xì)胞 SNU-C2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AAV293細(xì)胞、SNU-354細(xì)胞、SNU-5細(xì)胞 SUM-149PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU 565細(xì)胞、LIM 1215細(xì)胞、HEYA8細(xì)胞 IOSE-Van細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM Cub 1細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞、HMO6細(xì)胞 NCI-H292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FC33細(xì)胞、GM04671細(xì)胞、Eca-109細(xì)胞 AE 1201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly10細(xì)胞、L-5178-Y細(xì)胞、SNU-1040細(xì)胞 Hs729細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 08.13細(xì)胞、HONE1細(xì)胞、MC3T3-E細(xì)胞 PC-3M 2B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE510細(xì)胞、Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞 Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1588細(xì)胞、MPC5細(xì)胞、SW-527細(xì)胞 Ramos (RA 1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hESC細(xì)胞、K7M2 wt細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞 U87 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F56 [Human neoplasm]細(xì)胞、Chinese Hamster Lung細(xì)胞、NCI-H929細(xì)胞 MDAMB415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293F細(xì)胞、SCL-I細(xì)胞、MDA436細(xì)胞 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