"SN12C epithelioid cells人宮頸癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質;5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(細胞在無血清培養(yǎng)基內生長24小時)內凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內,因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 HuCCT-1細胞系相關產品:T-98細胞、AR-42J細胞、RPMI1788細胞 SUDHL4細胞系相關產品:3T3-Swiss albino細胞、MPC-11細胞、GM0637細胞 KG-1a細胞系相關產品:HVSMC細胞、ROS17/28細胞、QG-56細胞 細胞生長:貼壁 SN12C epithelioid cells人宮頸癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內,加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細胞傳代方法:2x10^4 cells/ml NCI-H498細胞系相關產品:RPE1-hTERT細胞、B16 subline B78細胞、22Rv-1細胞 HT144細胞系相關產品:PCI-4.2細胞、COLO829細胞、HEK 293-H細胞 rUCMSCs細胞系相關產品:HEK.EBNA細胞、SB細胞、ME16C細胞 MZCRC1細胞系相關產品:PNT-1A細胞、YD15細胞、HLF-a細胞 HEK293F細胞系相關產品:SUDHL-2細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞、SupT1細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 SN12C epithelioid cells人宮頸癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結:1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。 AgC11x3A細胞系相關產品:Cloudman M3細胞、SUM 102細胞、NTera 2/cl.D1細胞 HO-8910PM細胞系相關產品:3T6細胞、TYKnu細胞、T98G細胞 ES-2細胞系相關產品:OCI/AML-2細胞、GMK,BSC-1細胞、TOV-112細胞 H2227細胞系相關產品:ARPE19細胞、TW01細胞、COLO 741細胞 MDA-MB-231 #4175細胞系相關產品:REC 1細胞、EBNA293細胞、ROS17/28細胞 NCI-H187細胞系相關產品:RCK8細胞、Y 1細胞、HEK-293H細胞 PC-9/S1細胞系相關產品:SU86-86細胞、H-498細胞、D407細胞 IOSE80細胞系相關產品:NCI-H69C細胞、Jurkat E6-1細胞、MGECs細胞 MHH-CALL-2細胞系相關產品:HIEC細胞、KYSE 270細胞、OCI/AML-3細胞 FD-LSC-1細胞系相關產品:DI-TNC1細胞、DK-MG細胞、C127細胞 SN12C epithelioid cells人宮頸癌細胞系 Liver-02細胞系相關產品:MC-4細胞、GM00637F細胞、Ca-Ski細胞 University of Arizona Cell Culture-812細胞系相關產品:WEHI 231細胞、HCC-1143細胞、NCIH460細胞 A101D細胞系相關產品:SNU-C2B細胞、NCI-A549細胞、B6Tert-1細胞 A-172 MG細胞系相關產品:HCC-827細胞、COLO-824細胞、MEC1細胞 DF-1細胞系相關產品:H1184細胞、UPCI:SCC090細胞、NCIH727細胞 C26細胞系相關產品:LS123細胞、TNC-1B12B4細胞、H9c2細胞 SBC-5細胞系相關產品:SACC-LM細胞、Soleus clone 8細胞、253J-Bladder-V細胞 HEK 293T/17細胞系相關產品:SKML-28細胞、FHs 74 Int細胞、BHT-101細胞 IPI-2I細胞系相關產品:KP-N-RT-BM-1細胞、Hs870T細胞、TE-14細胞 BL2141細胞系相關產品:CAL148細胞、MOVAS-1細胞、PL 45細胞 RPMI 6666細胞系相關產品:TOV-112細胞、Fetal Human Colon細胞、NCI-H1437細胞 NCI-H520細胞系相關產品:Hs888T細胞、DC2.4細胞、HIEC-6細胞 LTPA細胞系相關產品:NCIH244細胞、HT-55細胞、NCIH1299細胞 MDCK細胞系相關產品:SK-BR-3細胞、PNEC30細胞、293/EBNA-1細胞 TE12細胞系相關產品:UMNSAH/DF#1細胞、Rat podocyte細胞、OCI-Ly 1細胞 801-D細胞系相關產品:IPEC1細胞、Panc02細胞、PANC0813細胞 M20 [Human melanoma]細胞系相關產品:WM115細胞、MeT5A細胞、SUM 159細胞 SUM 149PT細胞系相關產品:3-LL細胞、SHEE細胞、PE CA PJ34細胞 2780CP細胞系相關產品:KOPN8細胞、TFH細胞、CHP-100細胞 HUT-125細胞系相關產品:HEL-92_1_7細胞、hTERT-RPE-1細胞、VeroE6細胞 SUM 102細胞系相關產品:Swiss-3T3細胞、ID8/MOSEC細胞、NFS60細胞 kms 11細胞系相關產品:Hopkins-92細胞、293-EBNA1細胞、H-1155細胞 251 MG細胞系相關產品:2BS細胞、NCIH1618細胞、Hep G2/C3A細胞 Hs 606.T細胞系相關產品:NCI-SNU-16細胞、TM3細胞、HDSMC細胞 Hs742T細胞系相關產品:Colo741細胞、CEM-C7細胞、SUM190PT細胞 IHC-ST1細胞系相關產品:Be-Wo細胞、H-3255細胞、HPC-Y5細胞 SW-1783細胞系相關產品:FRhK4細胞、CHOK1細胞、U14細胞 PL11細胞系相關產品:BHK細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞、PF-382細胞 L6565細胞系相關產品:GM00637F細胞、MB157細胞、DU145細胞 3T3J2細胞系相關產品:UMRC2細胞、CAL-39細胞、HEK-293-FT細胞 MT2細胞系相關產品:HS-294-T細胞、BIU87細胞、DMS273細胞 BRL3A細胞系相關產品:WEHI-164細胞、NTera-2D1細胞、COLO-205細胞 H1373細胞系相關產品:Opossum Kidney細胞、SUP-T1細胞、JEKO細胞 MDA231-LM2細胞系相關產品:NCI H716細胞、MA-782細胞、Reuber H-35細胞 CAL85-1細胞系相關產品:COLO-684細胞、GM03569D細胞、SGC-7901/DDP細胞 TK-1細胞系相關產品:TM3細胞、PC-3M細胞、GLC-15細胞 Kupffer細胞系相關產品:Hs-729-T細胞、HN 4細胞、SUM 190PT細胞 H-2085細胞系相關產品:BC-PAP細胞、GTL16細胞、NCTC 3960細胞 HCT116/L細胞系相關產品:PANC 1005細胞、LAC細胞、U-2-OS細胞 OC316細胞系相關產品:COLO320HSR細胞、WEHI-279細胞、Human Embryo Kidney-2細胞 Kasumi-1細胞系相關產品:NCIH1623細胞、HL-60 Clone 15細胞、NCI-H1155細胞 PNT-1A細胞系相關產品:SV40 MES 13細胞、A9 (Hamprecht)細胞、GMK,BSC-1細胞 WERI-Rb 1細胞系相關產品:C4-2細胞、RK13細胞、Y3-Ag1,2,3細胞 MC-3T3細胞系相關產品:CESS細胞、A-172MG細胞、RFL 6細胞 OSC19細胞系相關產品:BL-6細胞、SEG-1細胞、SU86_86細胞 HEYA8細胞系相關產品:Hs675T細胞、SJRH30細胞、FET細胞 Hs 819.T細胞系相關產品:MPVECs細胞、NU-GC-3細胞、M3 Clone M-3細胞 SV40-HCEC細胞系相關產品:IOSE-Mar細胞、Capan 2細胞、Nthy ori 3.1細胞 EC-109細胞系相關產品:HRIF細胞、P3-X63Ag8.653細胞、SUDHL-1細胞 NCIH1693細胞系相關產品:C4-2 B細胞、Metastatic Variant-522細胞、COLO-320DM細胞 SKLMS-1細胞系相關產品:NTERA2D1細胞、ASPC1細胞、16-HBE14o細胞 SN12C epithelioid cells人宮頸癌細胞系 Caco-2/BBe細胞系相關產品:TB-1 Lu細胞、NB4細胞、TE 671細胞 H295R-S1細胞系相關產品:AU565細胞、SF-126細胞、NHA細胞 MFD-1細胞系相關產品:LAPC-4細胞、H-128細胞、HCC0038細胞 ES-2細胞系相關產品:OCI/AML-2細胞、H-2135細胞、GM 2132細胞 "
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