"NIT-1 epithelioid cells小鼠胰腺β細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過(guò)大生存空間不足而引起營(yíng)養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過(guò)三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長(zhǎng)成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。 SBC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-C2A細(xì)胞、KLE細(xì)胞、RD細(xì)胞 SW626細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:XWLC-05細(xì)胞、VMRC-LCD細(xì)胞、HCV29細(xì)胞 LNCaP-FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL26細(xì)胞、NCI-H250細(xì)胞、RA 1細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 NIT-1 epithelioid cells小鼠胰腺β細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前,細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來(lái)凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細(xì)胞條件無(wú)血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無(wú)血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無(wú)血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存:計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細(xì)胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以1×10(7)到5×10(7)細(xì)胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無(wú)血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存:使用分離試劑從基層分離細(xì)胞,分離時(shí)盡可能溫和,使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細(xì)胞,確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以5×10(6)到1×10(6)細(xì)胞/ml密度,在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代,每周換液1-2次 C518細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA/Dx-5細(xì)胞、SV40 MES 13細(xì)胞、HLE-SRA-01/04細(xì)胞 SKNO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-151細(xì)胞、IEC-18細(xì)胞、C32 [Human melanoma]細(xì)胞 REC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-7細(xì)胞、HEMCSS細(xì)胞、CEM clone 7細(xì)胞 FL62891細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-SG231細(xì)胞、SNU-601細(xì)胞、SNU-668細(xì)胞 HCC-9724細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN299細(xì)胞、L-6 myoblast細(xì)胞、697細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 NIT-1 epithelioid cells小鼠胰腺β細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣 細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來(lái)選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過(guò)夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過(guò)夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見(jiàn),凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。 Panc05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCPEpiC細(xì)胞、SW.620細(xì)胞、AtT20細(xì)胞 BJA-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3Ag1.2.3細(xì)胞、NE-1細(xì)胞、BC-020細(xì)胞 COLO-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OUMS27細(xì)胞、P3-X63-Ag8.653細(xì)胞、SW900細(xì)胞 Panc 05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMST6細(xì)胞、CMEC/D3細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞 RKOE6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 190PT細(xì)胞、BCECs細(xì)胞、BC-3-H-I細(xì)胞 WERI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV3121細(xì)胞、AHH1細(xì)胞、HAC-84細(xì)胞 IBMF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC/mHSC細(xì)胞、SW954細(xì)胞、L5178-R細(xì)胞 SV-HUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AD-293細(xì)胞、231-luc細(xì)胞、NCM356細(xì)胞 Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE30細(xì)胞、RCC 7860細(xì)胞、Farage細(xì)胞 Mel RM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFC細(xì)胞、HEK-293-F細(xì)胞、H2135細(xì)胞 NIT-1 epithelioid cells小鼠胰腺β細(xì)胞系 LICCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Emory University-3細(xì)胞、DB細(xì)胞、EJ1細(xì)胞 Epstein-Barr-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HK2細(xì)胞、MLTC-1細(xì)胞、SKMES細(xì)胞 MOLP8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341MD細(xì)胞、LX-2細(xì)胞、McCoy B細(xì)胞 H-1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo699細(xì)胞、BJ [Human fibroblast]細(xì)胞、SK-N-AS細(xì)胞 CW2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epstein-Barr-2細(xì)胞、MJ細(xì)胞、HS 683T細(xì)胞 HLFa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1563細(xì)胞、SNU-398細(xì)胞、H2196細(xì)胞 HLFa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1563細(xì)胞、SNU-398細(xì)胞、H2196細(xì)胞 V 79-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs 74 Int細(xì)胞、K 562細(xì)胞、AU-565細(xì)胞 ME 180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞、RD 2細(xì)胞、IR 983F細(xì)胞 SNU1040細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE14o-細(xì)胞、PLA-801D細(xì)胞、RSC 96細(xì)胞 T-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22-Rv1細(xì)胞、32D clone3細(xì)胞、SBC-5細(xì)胞 MCA 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeSoTheliOma-211H細(xì)胞、NSI/1-Ag4-1細(xì)胞、GC-1spg細(xì)胞 Colo-206F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞、V-79細(xì)胞、NCI-H1930細(xì)胞 SK-NSH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-362細(xì)胞、HCC 38細(xì)胞、C4-1細(xì)胞 EFO 27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TU 686細(xì)胞、Kit-225細(xì)胞、JB6 [Mouse]細(xì)胞 OE21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H508細(xì)胞、ECV304細(xì)胞、H64細(xì)胞 NCI-H28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nittby-Salford 1細(xì)胞、L929(NCTC)細(xì)胞、H774細(xì)胞 ROS17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI細(xì)胞、HOS TE 85細(xì)胞、SKNAS細(xì)胞 PZ-HPV-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-216細(xì)胞、174xCEM.T2細(xì)胞、HEK-293FT細(xì)胞 H2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-13細(xì)胞、H-2405細(xì)胞、NCIH69細(xì)胞 SF 539細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU739細(xì)胞、HTR-8/SV-neo細(xì)胞、NH6細(xì)胞 KU-19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1.S細(xì)胞、SK-NEP-1細(xì)胞、HT細(xì)胞 PC-3/M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:184A1細(xì)胞、NCM356細(xì)胞、H1155細(xì)胞 TJ905細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HEL-1細(xì)胞、SNU-407細(xì)胞、Pa017C細(xì)胞 JC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H157細(xì)胞、THEECs細(xì)胞、MDCKII-WT細(xì)胞 SNU-216細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97-L細(xì)胞、JVM-3細(xì)胞、M-NFS-60細(xì)胞 184A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B2_1-7細(xì)胞、BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞、RK13細(xì)胞 SW620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Granta 519細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞、Vero-76細(xì)胞 MHCC-97細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343細(xì)胞、LL2細(xì)胞、PTK-1細(xì)胞 Panc327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL-1細(xì)胞、BEL-7402細(xì)胞、COLO-320HSR細(xì)胞 LTEP a2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 AG 8.653細(xì)胞、870細(xì)胞、Malme-3 M細(xì)胞 NCI660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:87 MG細(xì)胞、NCI-H23細(xì)胞、MV 4;11細(xì)胞 3-LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 966 SK細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞、SW-954細(xì)胞 COLO 357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB-49細(xì)胞、PC 61-5-3細(xì)胞、AR42J細(xì)胞 SUD4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNTEC細(xì)胞、T HEECs細(xì)胞、Hs688(A)T細(xì)胞 LM2-4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞、MHCC97細(xì)胞、T-98G細(xì)胞 NCI-H510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1755細(xì)胞、BE(2)M17細(xì)胞、BI-Mel細(xì)胞 MDA-PCa-2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2110細(xì)胞、HT144mel細(xì)胞、MLMEC細(xì)胞 SUP-B15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92.05細(xì)胞、PC-3M 2B4細(xì)胞、Hs 742.T細(xì)胞 HCCLM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM3細(xì)胞、639 V細(xì)胞、Capan 2細(xì)胞 HSC-T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs742T細(xì)胞、MM6細(xì)胞、HOC-1細(xì)胞 CTLL(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-19-19細(xì)胞、SLMT-1細(xì)胞、MC9細(xì)胞 RC-K8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-FT細(xì)胞、Molm 14細(xì)胞、KLN205細(xì)胞 FRO81-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m細(xì)胞、SW1088細(xì)胞、NCI-H196細(xì)胞 BNL.CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFK-1細(xì)胞、MA-104細(xì)胞、NCIH244細(xì)胞 Hs-606-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKES1細(xì)胞、NCIH1838細(xì)胞、LP-1細(xì)胞 HCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-AD293細(xì)胞、AG 9細(xì)胞、WIL2-S細(xì)胞 SLK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52-PE細(xì)胞、SK_N_BE2C細(xì)胞、CAMA細(xì)胞 SUDHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-1 spg細(xì)胞、ZR7530細(xì)胞、Huh 7.5.1細(xì)胞 Kit-225-K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA-420細(xì)胞、H4IIEC3細(xì)胞、ABE8.1/2細(xì)胞 Panc-02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC3細(xì)胞、LC-2 ad細(xì)胞、MARC-145細(xì)胞 NIT-1 epithelioid cells小鼠胰腺β細(xì)胞系 IB-RS-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE細(xì)胞、RIMEC細(xì)胞、MDA-MB-435-S細(xì)胞 SW-620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L51細(xì)胞、BT.549細(xì)胞、SKG IIIa細(xì)胞 CAL 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK2細(xì)胞、L-540細(xì)胞、DHL-6細(xì)胞 COLO-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OUMS27細(xì)胞、MKN-45細(xì)胞、P815細(xì)胞 "
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