"ARIP epithelioid cells人胰腺腫瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
GM04671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HONE-1細(xì)胞、Karpas-299細(xì)胞、H735細(xì)胞
FBHE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1781細(xì)胞、A2780/CP細(xì)胞、MHCC97L細(xì)胞
AN3 CA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV-2細(xì)胞、Ishikawa細(xì)胞、COLO 679細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
ARIP epithelioid cells人胰腺腫瘤細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時盡可能溫和，使對細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細(xì)胞傳代方法：１：３-１：６傳代；每周２-３次。
ACC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-8細(xì)胞、GM637細(xì)胞、EFO27細(xì)胞
PSN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJ1細(xì)胞、NB-19細(xì)胞、293E細(xì)胞
293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞、H-2066細(xì)胞、LADMAC細(xì)胞
B16 F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-704細(xì)胞、253JBV細(xì)胞、LNCaP subline C4-2細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeWo細(xì)胞、HCC-9724細(xì)胞、H-520細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
ARIP epithelioid cells人胰腺腫瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
DLD1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AgC11x3A細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞、Mahlavu細(xì)胞
TC-1[JHU-1]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML5細(xì)胞、BEL/FU細(xì)胞、MLA 144細(xì)胞
H1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C918細(xì)胞、THP1細(xì)胞、HGC27細(xì)胞
HTR8/SVneo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS7細(xì)胞、P19細(xì)胞、Hela-Ap-1細(xì)胞
NCTC clone 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB157細(xì)胞、SU-DHL-1細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞
High Five細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLN-205細(xì)胞、SW-48細(xì)胞、D-341細(xì)胞
U20S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP-293細(xì)胞、HNE-1細(xì)胞、GA-10(Clone 4)細(xì)胞
Tn-5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSC-19細(xì)胞、MNNG-HOS細(xì)胞、HL-60 Clone 15細(xì)胞
N-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：108CC15細(xì)胞、Hs 895 T細(xì)胞、KYSE 520細(xì)胞
NCIH1734細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-1細(xì)胞、NCI-H1395細(xì)胞、SW-403細(xì)胞
ARIP epithelioid cells人胰腺腫瘤細(xì)胞系
HN 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2細(xì)胞、EFM-192A細(xì)胞、NCI-H1915細(xì)胞
MDA-415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUVEC細(xì)胞、Mouse INsulinoma 6細(xì)胞、C22 (Clara)細(xì)胞
PL12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBE140細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞
H-647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225/K6細(xì)胞、P3X63 AG 8.653細(xì)胞、NRK49F細(xì)胞
Hep-G2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Emory University-2細(xì)胞、FK81細(xì)胞、CCC-HSF-1細(xì)胞
FET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTLL-2細(xì)胞、N-Tera-2細(xì)胞、H-1563細(xì)胞
PCI-4B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GDM-1細(xì)胞、NUGC4細(xì)胞、HUT125細(xì)胞
X63Ag8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCMEC(BL12-H)細(xì)胞、HCCLM3細(xì)胞、GNM細(xì)胞
Ej138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi5細(xì)胞、MB-49細(xì)胞、G422細(xì)胞
SKO007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L1210細(xì)胞、BL-6細(xì)胞、HNE-3細(xì)胞
Co320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOMEC細(xì)胞、H-508細(xì)胞、SU-DHL1細(xì)胞
CCC-HSF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McArdle RH-7777細(xì)胞、UMNSAH-DF-1細(xì)胞、2780細(xì)胞
NCIH2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DoHH-2細(xì)胞、RH-30細(xì)胞、GP2-293細(xì)胞
A549/ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU-4475細(xì)胞、ReNcell CX細(xì)胞、CCD-841CoTr細(xì)胞
MT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B6Tert-1細(xì)胞、XWLC-05細(xì)胞、MRC-5細(xì)胞
AMO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Th17細(xì)胞、SSP-25細(xì)胞、VP303細(xì)胞
Cates-1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHK 21細(xì)胞、AAV-293細(xì)胞、DC 2.4細(xì)胞
EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Okayama University Medical School-27細(xì)胞、H929細(xì)胞、SW480E細(xì)胞
GB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLD-1細(xì)胞、RPVSMC細(xì)胞、MOLT3細(xì)胞
HRGEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-18細(xì)胞、HTR8svn細(xì)胞、RERF-LCMS細(xì)胞
SKBr3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-281-T細(xì)胞、HFTF細(xì)胞、OAW 42細(xì)胞
NCI-H2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-5細(xì)胞、NCI-H2009細(xì)胞、KPL4細(xì)胞
SVHUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2052細(xì)胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、NCI-H716細(xì)胞
WM 239細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAEC細(xì)胞、DLD-1細(xì)胞、HCT8細(xì)胞
RD-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 675.T細(xì)胞、MDA453細(xì)胞、MES-13細(xì)胞
MC 116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM06141細(xì)胞、KFB細(xì)胞、MH-S細(xì)胞
NCI-H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM 637細(xì)胞、NT2-D1細(xì)胞、PK13細(xì)胞
Vero E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-60細(xì)胞、OCIAML3細(xì)胞、HOS TE 85細(xì)胞
HCFB（HCF）細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-231細(xì)胞、MG63細(xì)胞、OVCAR 420細(xì)胞
HLEC-SRA 01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs675細(xì)胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞、Hs940.T細(xì)胞
SNU-475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 10細(xì)胞、TF-1a細(xì)胞、SuDHL 10細(xì)胞
RBL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PFSK1細(xì)胞、B16細(xì)胞、Institute for Medical Research-32細(xì)胞
SK.MEL.28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1770細(xì)胞、U-251細(xì)胞、Z138細(xì)胞
Pan02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.5細(xì)胞、JTC-28細(xì)胞、EHEB細(xì)胞
PL12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBE140細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞
LAPC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA Dx5細(xì)胞、COR-L51細(xì)胞、B95.8細(xì)胞
WEHI 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H292細(xì)胞、Hs27F細(xì)胞、Clone 15 HL-60細(xì)胞
MUG-Chor1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv1.Lu細(xì)胞、L細(xì)胞、SW 1783細(xì)胞
WPMY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：8226細(xì)胞、K7M2-WT細(xì)胞、VM Cub 1細(xì)胞
BNCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI 2細(xì)胞、QGY-7701細(xì)胞、A72細(xì)胞
H-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266 B1細(xì)胞、NCI-H1876細(xì)胞、Panc10.05細(xì)胞
NBL_S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KCL22細(xì)胞、HEK.EBNA細(xì)胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞
HEC-151細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepG2-luc細(xì)胞、H358細(xì)胞、T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞
Dami細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1954細(xì)胞、SK-NMC細(xì)胞、U-138MG細(xì)胞
Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCaP 37細(xì)胞、H-1944細(xì)胞、NCI-UMC-11細(xì)胞
SUD4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNTEC細(xì)胞、T HEECs細(xì)胞、Hs688(A)T細(xì)胞
SW982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞、HEI-193細(xì)胞、HS 1.Tes細(xì)胞
HSC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT125細(xì)胞、HEC251細(xì)胞、NKM-1細(xì)胞
ZYM-DIEC02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPaSteC(HPSC)細(xì)胞、RPPVEC細(xì)胞、NL20SV細(xì)胞
BERH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1-S細(xì)胞、HL-7702細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞
hTERT-RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs821T細(xì)胞、STTG1細(xì)胞、DR2R 1610細(xì)胞
ARIP epithelioid cells人胰腺腫瘤細(xì)胞系
OCILY-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8-653細(xì)胞、WM 239A細(xì)胞、Cor L51細(xì)胞
6T-CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-449細(xì)胞、SLMT1細(xì)胞、FHL 124細(xì)胞
B16-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C6661細(xì)胞、Clone 15 HL-60細(xì)胞、CII細(xì)胞
H-1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1/A細(xì)胞、PLA-802細(xì)胞、C41細(xì)胞
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