WST-1細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒

中文名稱：WST-1細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒

英文名稱：WST-1 Cell Proliferation & Cell Viability Detection Kit

產(chǎn)品規(guī)格：100T|500T

疊氮類四唑鹽是一種類似于MTT 的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶能夠被還原成橙黃色水溶性的甲月贊。生成的甲臜能夠溶解在組織培養(yǎng)基中，生成的甲臜量與活細(xì)胞數(shù)量成正比。細(xì)胞增殖越多越快，則顏色越深；細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺。

此法是用于測(cè)定細(xì)胞增殖或毒性試驗(yàn)中活細(xì)胞數(shù)目的一種高靈敏度、高穩(wěn)定性且無(wú)放射性的比色檢測(cè)法。實(shí)驗(yàn)的靈敏度比其它四唑鹽如MTT, XTT, MTS 高，線性范圍更寬。

我司四唑鹽對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性。加入我司四唑鹽顯色后，可以在不同時(shí)間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀板，使檢測(cè)時(shí)間更加靈活，便于找到測(cè)定時(shí)間。

注意事項(xiàng)
1. 本試劑盒的檢測(cè)依賴于脫氫酶催化的反應(yīng)，如果待檢測(cè)體系中存在較多的還原劑，例如一些抗氧化劑會(huì)干擾檢測(cè)，需設(shè)法去除。
2. 如果待測(cè)溶液有還原性，測(cè)定不含細(xì)胞，但含有我司四唑鹽的待測(cè)溶液在450 nm 處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入我司四唑鹽，如果吸光度相對(duì)較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的100 μl 培養(yǎng)基和10 μl 我司四唑鹽進(jìn)行檢測(cè)。
3. 用酶標(biāo)儀檢測(cè)前請(qǐng)確?？變?nèi)沒(méi)有氣泡，否則會(huì)干擾測(cè)定。
4. 為保證您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

操作方法
1. 96 孔板加入細(xì)胞100μL/孔（約1×104），置37℃ 5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 小時(shí)。
2. 加入適當(dāng)濃度的受試化合物。
3. 將96 孔板在37℃，含5% CO2 空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4. 向各孔中加入10 μl 的我司四唑鹽工作液。
5. 37℃下孵育1～4 小時(shí)。
6. 酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度。

結(jié)果分析
1. 細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加我司四唑鹽，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加我司四唑鹽，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
2. 求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。
 

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！