細(xì)胞凋亡線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒(JC-10)
中文名稱:細(xì)胞凋亡線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒(JC-10)
英文名稱:JC-10 Apoptosis Detection Kit
產(chǎn)品規(guī)格:10T|20T|50T|100T
本試劑盒可應(yīng)用于細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位檢測(cè)。大量的研究表明線粒體與細(xì)胞凋亡密切相關(guān),其中線粒體跨膜電位(△?)的破壞,被認(rèn)為是細(xì)胞凋亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)過(guò)程中最早發(fā)生的事件之一,它發(fā)生在細(xì)胞核凋亡特征(染色質(zhì)濃縮、DNA斷裂)出現(xiàn)之前,一旦線粒體跨膜電位崩潰,則細(xì)胞凋亡不可逆轉(zhuǎn)。 本試劑盒采用JC-10 (Enhanced JC-1)一種陽(yáng)離子脂質(zhì)熒光染料作為檢測(cè)線粒體跨膜電位指示劑。JC-100 可以選擇性地進(jìn)入線粒體,且由于膜電位的增加,其顏色會(huì)發(fā)生從綠色到橙色的可逆性改變。這種特性是由于JC-100 聚合物的可逆結(jié)構(gòu),在膜極化條件下,它的發(fā)射光由520nm(JC-100 單體發(fā)射光)轉(zhuǎn)移到570nm (J-聚合體發(fā)射光)。當(dāng)在490nm 處激發(fā)時(shí),JC-100 發(fā)生從綠色到橙綠色的可逆改變。這兩種顏色都可以被流式細(xì)胞儀上裝好的一般濾光器檢測(cè)到,因此綠色發(fā)射光可以通過(guò)熒光通道1(FL1)進(jìn)行分析,橙綠色發(fā)射光可以通過(guò)熒光通道2(FL2)進(jìn)行分析。它除了有潛力用于流式細(xì)胞術(shù),也可以用于熒光成像分析。 注意事項(xiàng) 1. 微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。 2. JC-10 避光保存及使用。 3. 細(xì)胞培養(yǎng)至匯合度80-90%,收集細(xì)胞量在1×106/Test。 4. 對(duì)PH 變化過(guò)于敏感的細(xì)胞建議用胎牛血清取代Buffer 孵育染色及洗滌,或延長(zhǎng)觀測(cè)時(shí)間。 5. 流式細(xì)胞儀檢測(cè)線粒體膜電位變化受到多種因素的影響,因誘導(dǎo)劑、細(xì)胞株類型,作用時(shí)間的不同而熒光強(qiáng)度比例都有不同,因此沒(méi)有通用標(biāo)準(zhǔn)的補(bǔ)償設(shè)門指南,因此每個(gè)試驗(yàn)需設(shè)陰性及陽(yáng)性對(duì)照組進(jìn)行熒光補(bǔ)償及設(shè)門。 6. 組織需先制備單細(xì)胞懸液或提取純化線粒體后方可進(jìn)行檢測(cè),可選用我司細(xì)胞懸液制備試劑盒或線粒體提取試劑盒。
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