"HuP-T4 epithelioid cells人胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個(gè)說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM TK negative細(xì)胞、MDAMB175細(xì)胞、OVCAR 5細(xì)胞
MV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1672細(xì)胞、Caco-2/BBe細(xì)胞、TGBC-11-TKB細(xì)胞
Ketr-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C42細(xì)胞、CCD 966SK細(xì)胞、MES-SA/Dx5細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
HuP-T4 epithelioid cells人胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動作輕，避免晃動。細(xì)胞生長挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
SK-LMS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE1細(xì)胞、MDCC-MSB-1細(xì)胞、NCI-SNU-1細(xì)胞
Mono-Mac-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ssMCF7細(xì)胞、ATC241細(xì)胞、Normal Rat Kidney細(xì)胞
CAL-120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ishikawa細(xì)胞、RAT2細(xì)胞、MBT-2細(xì)胞
CNE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 3細(xì)胞、HuPT3細(xì)胞、ECV細(xì)胞
GM17219細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM159細(xì)胞、BT483細(xì)胞、Hs-852-T細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HuP-T4 epithelioid cells人胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會臨時(shí)要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
MDA134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL 1細(xì)胞、H-1993細(xì)胞、MDCK細(xì)胞
Wien133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-CL-11細(xì)胞、BALL1細(xì)胞、LTEP-a2細(xì)胞
SNU398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 401細(xì)胞、SKUT-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞
AU565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV2細(xì)胞、COLO-741細(xì)胞、RL-952細(xì)胞
CAKI 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-6666細(xì)胞、BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞、CHL/IU細(xì)胞
U-251MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1116細(xì)胞、EC-GI-10細(xì)胞、P 3 HR 1細(xì)胞
JROECL 33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOCF細(xì)胞、BHK細(xì)胞、C3H10T1/2CL8細(xì)胞
RT112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4;11細(xì)胞、P 815細(xì)胞、HaCaT細(xì)胞
KE-37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE39細(xì)胞、6-T CEM細(xì)胞、HM1900細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tsup-1細(xì)胞、P3X63Ag8細(xì)胞、HTori-3.1細(xì)胞
HuP-T4 epithelioid cells人胰腺癌細(xì)胞系
RetroPack PT67細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAD109細(xì)胞、CAL78細(xì)胞、T84細(xì)胞
GM03569B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1819細(xì)胞、HCC1588細(xì)胞、MOLT 3細(xì)胞
Hs839T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-87MG ATCC細(xì)胞、PANC0203細(xì)胞、SK-Hep1細(xì)胞
BNCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H647細(xì)胞、IGR.OV1細(xì)胞、U-251_MG細(xì)胞
C518細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA/Dx-5細(xì)胞、SV40 MES 13細(xì)胞、HLE-SRA-01/04細(xì)胞
P-3J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE14細(xì)胞、NCI-H1944細(xì)胞、VMCUB-1細(xì)胞
KYSE410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK-1細(xì)胞、HOS (TE85, Clone F5)細(xì)胞、WPE-int細(xì)胞
NK-92.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D-Cl3細(xì)胞、H1573細(xì)胞、NCI-H146細(xì)胞
TE-85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、MDCK Type II細(xì)胞、COLO-320細(xì)胞
H1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca109細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞、EAC細(xì)胞
MCA 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeSoTheliOma-211H細(xì)胞、NSI/1-Ag4-1細(xì)胞、GC-1spg細(xì)胞
B10BR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H838細(xì)胞、OVCA5細(xì)胞、IPEC-1細(xì)胞
NCI-H2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL28細(xì)胞、L1210細(xì)胞、SCC-4細(xì)胞
HR8348細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL10細(xì)胞、LS174T細(xì)胞、DMS153細(xì)胞
MeT-5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-549細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞
NCI-H1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞、MDA-MB-435 S細(xì)胞、GM02131細(xì)胞
RCM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-82細(xì)胞、RMS 1598細(xì)胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞
NCI-H2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATO III細(xì)胞、32D/cl3細(xì)胞、KAT-5細(xì)胞
NCI-H596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK supertube細(xì)胞、Vero C1008細(xì)胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞
AtT 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN13細(xì)胞、A549/ATCC細(xì)胞、MCF7/WT細(xì)胞
DanG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：207細(xì)胞、TGW細(xì)胞、T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞
LAN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCE細(xì)胞、SKG-IIIa細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞
MDA-MB-435-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225-K6細(xì)胞、NTERA2D1細(xì)胞、Hs 737.T細(xì)胞
Hs68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 114細(xì)胞、OCI-LY-1細(xì)胞、M21細(xì)胞
P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EU-3細(xì)胞、GM 2132細(xì)胞、SHP-77細(xì)胞
HCV 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly19細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞、OSRC2細(xì)胞
RERFLCMS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI TNC-1細(xì)胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞
NCIH1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-125細(xì)胞、EB-2細(xì)胞、Soleus clone 8細(xì)胞
Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-12細(xì)胞、HSC/mHSC細(xì)胞、CAL27細(xì)胞
SVEC 4-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-711細(xì)胞、RMG-1細(xì)胞、GLC-82細(xì)胞
EA.hy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAMSCs細(xì)胞、SKMel-5細(xì)胞、HEI-193細(xì)胞
BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2218細(xì)胞、SW 1573細(xì)胞、COLO 684細(xì)胞
Beta-TC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293-F細(xì)胞、2T細(xì)胞、OCI-Ly10細(xì)胞
H-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH295R細(xì)胞、HEL 299細(xì)胞、PG-BE1細(xì)胞
L cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C38細(xì)胞、CHO-K1細(xì)胞、Hep-G2細(xì)胞
CD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU 1細(xì)胞、MARC-145細(xì)胞、HCC0827細(xì)胞
H-2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VB細(xì)胞、KE-39細(xì)胞、KP-N-RT-BM細(xì)胞
MC26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-274-T細(xì)胞、TW 01細(xì)胞、HC-11細(xì)胞
bEND.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATDC5細(xì)胞、KP-N-NS細(xì)胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細(xì)胞
Anglne細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COC1/CDDP細(xì)胞、HO-8910 PM細(xì)胞、GM03573細(xì)胞
Hs611T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F0細(xì)胞、MFD-1細(xì)胞、NCIH1385細(xì)胞
CAL85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-684細(xì)胞、GM03569D細(xì)胞、SGC-7901/DDP細(xì)胞
MRC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEB-3細(xì)胞、NCI-H226細(xì)胞、NCIH510細(xì)胞
SW48細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2452細(xì)胞、LAN5細(xì)胞、RS4:11細(xì)胞
UMNSAH-DF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U343MG細(xì)胞、WM115mel細(xì)胞、VAESBJ細(xì)胞
HFL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLaS3細(xì)胞、hTERT RPE-1細(xì)胞、SKLU-1細(xì)胞
Psi-2-DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAC-E2G8細(xì)胞、IEC-6細(xì)胞、OKa-C-1細(xì)胞
Pt K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly18細(xì)胞、PZ-HPV-7細(xì)胞、H2452細(xì)胞
NCI-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SR細(xì)胞、He La細(xì)胞、TE14細(xì)胞
HSC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-2B4細(xì)胞、OVCAR.8細(xì)胞、Ca Ski細(xì)胞
BGC823細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12SM細(xì)胞、Hep G2/C3A細(xì)胞、MLMA細(xì)胞
HuP-T4 epithelioid cells人胰腺癌細(xì)胞系
HAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞、A-72細(xì)胞、DU4475細(xì)胞
Ect1/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH-3T3-L1細(xì)胞、MEL-526細(xì)胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞
HEP3B2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hos TE-85細(xì)胞、L-6細(xì)胞、RGB細(xì)胞
SNU398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 401細(xì)胞、NCIH2030細(xì)胞、C-Lu-65細(xì)胞
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