"OVISE epithelioid cells人卵巢癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng):細(xì)胞凍存好了,接下來(lái)要注意什么問(wèn)題呢?沒(méi)錯(cuò),就是記得到時(shí)間了,拿出來(lái)復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過(guò)程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬(wàn)不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長(zhǎng)行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開(kāi)始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長(zhǎng)至70%單層時(shí)收獲細(xì)胞,計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng),應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)24小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每?jī)龃婀懿怀^(guò)1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒(méi)有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個(gè)最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問(wèn)題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí),有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實(shí),細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn),不過(guò)這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會(huì)盡如人意。例如說(shuō),人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。 LA 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T/G HA-VSMC細(xì)胞、Fao細(xì)胞、BC3H-1細(xì)胞 CAL-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 678細(xì)胞、WM451細(xì)胞、hTERT-HPNE細(xì)胞 IGROV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT8細(xì)胞、NFHIOSE-80細(xì)胞、PA-1細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 OVISE epithelioid cells人卵巢癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術(shù)原因使長(zhǎng)期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會(huì)出現(xiàn)變異,有時(shí)因寄贈(zèng)、交換和購(gòu)買,培養(yǎng)細(xì)胞從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)運(yùn)到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室,的策略是進(jìn)行低溫保存。這對(duì)于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡(jiǎn)要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點(diǎn)。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時(shí),細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài),故可以長(zhǎng)期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過(guò)0~20℃階段的處理過(guò)程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:凍存細(xì)胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化,并直接加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對(duì)凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。1ml凍存細(xì)胞使用10~20ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù),細(xì)胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細(xì)胞/ml;培養(yǎng)細(xì)胞12到24小時(shí),更換新鮮的完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細(xì)胞加入到大約25ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞,并且進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。細(xì)胞鋪板,細(xì)胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化:一個(gè)成年人全身細(xì)胞總數(shù)約1012個(gè),可以區(qū)分為200多種不同類型的細(xì)胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細(xì)胞均來(lái)自一個(gè)受精卵細(xì)胞。所以,通常把發(fā)育過(guò)程中,細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過(guò)程稱為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化,這個(gè)過(guò)程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長(zhǎng)不斷分裂的細(xì)胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細(xì)胞周期中G1期開(kāi)始時(shí)一個(gè)確定的點(diǎn)G0點(diǎn)“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長(zhǎng)分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞,它們的基因表達(dá)和代謝活動(dòng)各不相同。 細(xì)胞傳代方法:5 x 10^4 cells/ml SK-MEL-MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP2-0-Ag14細(xì)胞、Ly8細(xì)胞、NEC細(xì)胞 K299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL34細(xì)胞、H-2347細(xì)胞、NK-92細(xì)胞 NUGC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP C4-2細(xì)胞、HBE 135-E6/E7細(xì)胞、H1703細(xì)胞 IGROV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT8細(xì)胞、NFHIOSE-80細(xì)胞、PA-1細(xì)胞 CAL-12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL-7404細(xì)胞、RF/6A細(xì)胞、NCI-HUT-292細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 OVISE epithelioid cells人卵巢癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞 常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中一些問(wèn)題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源,所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過(guò)20%,因?yàn)楹窟^(guò)低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不足,過(guò)高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時(shí)須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購(gòu)買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會(huì)有脫落?因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中不可避免的會(huì)有震蕩,收到后可以離心收集;4)購(gòu)買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購(gòu)買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見(jiàn)原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 U2OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hela-Ap-1細(xì)胞、BIU-87細(xì)胞、KLN-205細(xì)胞 NEC8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞、Rca-B細(xì)胞、KYSE410細(xì)胞 VMRCRCZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)-C細(xì)胞、SL1細(xì)胞、NU-GC-3細(xì)胞 67NR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs839T細(xì)胞、H2195細(xì)胞、LLCMK2細(xì)胞 MCF-7/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 62細(xì)胞、CRFK細(xì)胞、SCC9細(xì)胞 CEM-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Reuber H35細(xì)胞、AG06814-J細(xì)胞、Hs 729細(xì)胞 JCA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTC-200細(xì)胞、H-1975細(xì)胞、Fox/NY細(xì)胞 B-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-86-86細(xì)胞、U-2 OS細(xì)胞、H1975細(xì)胞 MDAMB361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH-6細(xì)胞、SW1783細(xì)胞、HT1080細(xì)胞 SK MEL-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv 1 Lu細(xì)胞、SK-ChA1細(xì)胞、RGCs細(xì)胞 OVISE epithelioid cells人卵巢癌細(xì)胞系 Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Det. 562細(xì)胞、MV522細(xì)胞、MAC1細(xì)胞 NCIH660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-14細(xì)胞、UM-RC-2細(xì)胞、KAT5細(xì)胞 UMNSAH/DF#1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 149細(xì)胞、HELF細(xì)胞、IEC-18細(xì)胞 GC-1 spg細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H3255細(xì)胞、CHL-CL-11細(xì)胞、NMC-G1細(xì)胞 231-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTT739細(xì)胞、HCC-2185細(xì)胞、RPE1-hTERT細(xì)胞 GB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD-1細(xì)胞、RPVSMC細(xì)胞、MOLT3細(xì)胞 SMC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM07404A細(xì)胞、FRTL5細(xì)胞、Caki-2細(xì)胞 HTori-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM6細(xì)胞、Hs 746T細(xì)胞、MUG-Chor1細(xì)胞 NG10815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30-OHK細(xì)胞、B78細(xì)胞、IOSE-80細(xì)胞 WB-F344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H211細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞、WM239A細(xì)胞 SKMel-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00097細(xì)胞、Hepatoma-22細(xì)胞、HL-1細(xì)胞 RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDE細(xì)胞、TOV-21G細(xì)胞、H-2107細(xì)胞 RCC10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAPC4細(xì)胞、H2108細(xì)胞、P116細(xì)胞 NGEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Duke University 145細(xì)胞、TCam-2細(xì)胞、SF-763細(xì)胞 TF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB1-RGB細(xì)胞、SHEP1細(xì)胞、BetaTC6細(xì)胞 Reuber H35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC-1[JHU-1]細(xì)胞、M-1 myeloid leukemia細(xì)胞、JM細(xì)胞 NR 8383細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH-30細(xì)胞、SF 539細(xì)胞、PLC8024細(xì)胞 NCI-H378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WRL-68細(xì)胞、RC-4B細(xì)胞、KHYG細(xì)胞 PECAPJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT細(xì)胞、C518細(xì)胞、Hs611T細(xì)胞 NCI-H69C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.MEL.28細(xì)胞、KNS42細(xì)胞、HEK;293細(xì)胞 CAKI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip 973細(xì)胞、159 PT細(xì)胞、HTR8svn細(xì)胞 MCF7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHG5細(xì)胞、GES-1細(xì)胞、L132細(xì)胞 IMR90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Natural Killer-92細(xì)胞、Line 522細(xì)胞、COLO684細(xì)胞 BNCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H647細(xì)胞、IGR.OV1細(xì)胞、U-251_MG細(xì)胞 MHCC97L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSADX5細(xì)胞、COLO 741細(xì)胞、CEM-C7細(xì)胞 Strain KB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:6-T CEM細(xì)胞、RPMI 8226細(xì)胞、H-1792細(xì)胞 2PK-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC-3-VGH細(xì)胞、MLA 144細(xì)胞、A 2780 CP細(xì)胞 RCC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549細(xì)胞、KPL1細(xì)胞、COLO 320 HSR細(xì)胞 HHL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H322細(xì)胞、HTori3細(xì)胞、DOK細(xì)胞 SCC-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2052細(xì)胞、COLO 320 DM細(xì)胞、SNG-M細(xì)胞 OSA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHIN3細(xì)胞、SUDHL-4細(xì)胞、OCI-Ly07細(xì)胞 WM-239A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 410細(xì)胞、BRL-3A細(xì)胞、Mel-624細(xì)胞 OCI Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞、MDAMB436細(xì)胞、CESS細(xì)胞 MC 116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM06141細(xì)胞、KFB細(xì)胞、MH-S細(xì)胞 H-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGP-1細(xì)胞、UPCI-SCC090細(xì)胞、CPAE細(xì)胞 Human ErythroLeukemia細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBC-1細(xì)胞、LAN6細(xì)胞、GM3570細(xì)胞 BEL-7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1793細(xì)胞、OSKM-1細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞 Hs934T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit-225-K6細(xì)胞、hRPTC細(xì)胞、HEK293F細(xì)胞 MDCK.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞、Hep G2-Luc細(xì)胞 NCI-H740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-6細(xì)胞、AM細(xì)胞、Panc_08_13細(xì)胞 H441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHL5細(xì)胞、H748細(xì)胞、MNNG/HOS Clone F-5細(xì)胞 NB-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-125細(xì)胞、HCC-1438細(xì)胞、HT clone H9細(xì)胞 GM04679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-2細(xì)胞、CO115細(xì)胞、SK-RC-42細(xì)胞 SC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU145細(xì)胞、HT 115細(xì)胞、H87細(xì)胞 58F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL CL2細(xì)胞、H1395細(xì)胞、NCI-H2135細(xì)胞 BeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-5細(xì)胞、TE-3A細(xì)胞、UM-UC-3細(xì)胞 NCI-H522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJCRH30細(xì)胞、RIN-m 14B細(xì)胞、H2170細(xì)胞 HAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞、A-72細(xì)胞、DU4475細(xì)胞 T9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801D細(xì)胞、CWR22-R1細(xì)胞、NCIH250細(xì)胞 LLCPK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NMC細(xì)胞、B-CPAP細(xì)胞、HBEpiC細(xì)胞 SNU620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H196細(xì)胞、NCI-H1838細(xì)胞、DU-145細(xì)胞 OVISE epithelioid cells人卵巢癌細(xì)胞系 WTRL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AAV-293細(xì)胞、H-920細(xì)胞、DanG細(xì)胞 CG-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 4.03細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞、P3/NS-1細(xì)胞 PC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-69細(xì)胞、DKMG細(xì)胞、CCD18細(xì)胞 VMRCRCZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)-C細(xì)胞、W133細(xì)胞、HL-60 clone15細(xì)胞 "
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