"KP-N-YN epithelioid cells人平滑肌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題。總結(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當(dāng)會事。
NBL_S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KCL22細胞、HEK.EBNA細胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細胞
6-10B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ChA-1細胞、OVCA8細胞、SU-86-86細胞
HL60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT-3 [Human leukocytes]細胞、Farage細胞、MDA MB 436細胞
細胞生長：貼壁
KP-N-YN epithelioid cells人平滑肌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤，則將細胞做傳代培養(yǎng)。
細胞傳代方法：１：２傳代
HNE-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK ES 01細胞、SK 1細胞、HOS-MNNG細胞
A549/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2029細胞、SW 948細胞、COLO320 DM細胞
HSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-596細胞、Kasumi-1細胞、NCI-SNU-C2A細胞
MDA-1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-0細胞、VMM-5A細胞、SK BR 03細胞
WM 239-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCP1細胞、H-2106細胞、TE353.SK細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
KP-N-YN epithelioid cells人平滑肌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：上皮樣
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
UMRC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL細胞、NCI-H740細胞、CMT-93細胞
PLCPRF5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-II細胞、QBC939細胞、L929(NCTC)細胞
GMK,BSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 85 ClF-5細胞、HEK-AD293細胞、HARA-B細胞
NCI-HUT-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J HR-1細胞、RS(4;11)細胞、MF2059細胞
NCI-H2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H102細胞、Mouse podocyte細胞、Evsa-T細胞
PLA-801D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THP1細胞、PMVEC細胞、NCIH64細胞
UACC 812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-952細胞、VMM5細胞、Tu212細胞
NIH3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE 37細胞、Hs294細胞、HCC38細胞
Tu212細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FOX-NY細胞、RT4P細胞、H-1436細胞
RCC-JF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUVEC-C[HUVEC]細胞、T47D細胞、EFM19細胞
KP-N-YN epithelioid cells人平滑肌細胞系
HS5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：huH 1細胞、PLB985細胞、COLO829細胞
Colo320細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC/PRF/5細胞、RBL-I細胞、TERT-RPE1細胞
CORL88細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1819細胞、Vx2細胞、MESSA/Dx5細胞
Rainbow Trout Embryo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SupB15W細胞、BOWES細胞、TOG細胞
UPCISCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞、2PK-3細胞、3T3F442A細胞
Hs695細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB4細胞、C-33-A細胞、M109細胞
Hs695細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB4細胞、C-33-A細胞、M109細胞
LS-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO678細胞、ABC1細胞、K1735細胞
COLO-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS27細胞、P3-X63-Ag8.653細胞、SW900細胞
JB6 Cl 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、HEY-A8細胞、NCIH1184細胞
Huh-7.5.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-cells細胞、NPA87細胞、SMA-560細胞
HMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)-M17細胞、SKGT4細胞、QGP 1細胞
HuPT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU165細胞、624-mel細胞、COLO-738細胞
NTERA2D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MARC145細胞、MGH-U3細胞、H2195細胞
BHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TEC細胞、I90細胞、H2085細胞
Bovine Turbinate細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MARC-145細胞、TCC-PAN2細胞、RPMI-1846細胞
HCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-AD293細胞、AG 9細胞、WIL2-S細胞
H-1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1-Lu細胞、ES2細胞、EoL-1細胞
SNU484細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs819T細胞、NCIH64細胞、OV-2008細胞
COLO 357細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB-49細胞、PC 61-5-3細胞、AR42J細胞
CL1.0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L 105細胞、M14-MEL細胞、MMAc-Serum Free細胞
Oka-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-719細胞、NCI-H322細胞、HHFK細胞
SW839細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-2細胞、Kit 225 K6細胞、SNU182細胞
CF-PAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2452細胞、P30/Ohkubo細胞、NCC-IT細胞
IPLB-SF 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HITT15細胞、RIN Cl-5F細胞、CLL-CII細胞
8226/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCD細胞、HCC-4006細胞、293細胞
HTR8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH2細胞、Farage OL細胞、HDQP1細胞
LS-174細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN-93細胞、NCI-H1703細胞、HCC-2279細胞
Hs 746.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK_N_BE2C細胞、U87 MG細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞
210RCY3-Ag1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32 [Human melanoma]細胞、QSG-7701細胞、NCIH650細胞
SBC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACC-LM細胞、Soleus clone 8細胞、253J-Bladder-V細胞
SUDHL10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1 in Origin Simian-7細胞、B16 BL6細胞、SW1271細胞
PC-3M-2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GBC-SD細胞、HUT125細胞、Jurkat77細胞
OVCAR432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU-65M細胞、Malme-3M細胞、H-2030細胞
hUC-MSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH378細胞、CHO-ori細胞、MXI細胞
Hs 819.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPVECs細胞、NU-GC-3細胞、M3 Clone M-3細胞
Hs 895 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CP-70細胞、THP-1細胞、MLTC-1細胞
Melan-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC15細胞、HNE1細胞、HPAF-2細胞
Melan-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC15細胞、HNE1細胞、HPAF-2細胞
WM-239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 410細胞、BRL-3A細胞、Mel-624細胞
H1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jiyoye細胞、GM03671C細胞、GM2131細胞
293c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH23細胞、UO31細胞、BC-023細胞
A.704細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-EBNA細胞、16HBE140細胞、HSC-2細胞
CAL-51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 164細胞、HMVEC細胞、MC3T3細胞
SW 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD18Co細胞、UMUC-14細胞、CAOV4細胞
SW 982細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Danio rerio Gill細胞、UWB1.289細胞、WERI-Rb 1細胞
MUTZ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKM1細胞、HEK293-EBNA細胞、HIT-T15細胞
MFHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal fibroblast-10細胞、KLN205細胞、H-2198細胞
SuDHL 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DH 82細胞、Ly7細胞、H378細胞
brain-derived Endothelial cells.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NH-6細胞、RPMI 7951細胞、OCI-Ly 3細胞
RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 266-4細胞、H-2195細胞、CCD-112 CoN細胞
KP-N-YN epithelioid cells人平滑肌細胞系
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-5細胞、A-101D細胞、FCCH1018細胞
Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：451Lu細胞、MCF-7/ADR細胞、REC 1細胞
NCIH747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel 1細胞、E.G7-OVA細胞、HUC-1細胞
GM637細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly19細胞、NCI-H1563細胞、MLE 12細胞
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