"NCI-H524 epithelioid cells人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞1982年建系,源自非小細(xì)胞肺癌男性患者的轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)。 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 Wien 133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1404細(xì)胞、KLM-1細(xì)胞、MNNG細(xì)胞 HEK 293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ESC-410細(xì)胞、LC-1/sq細(xì)胞、RGC5細(xì)胞 aNK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA8細(xì)胞、BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞、NALM-6-M1細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 NCI-H524 epithelioid cells人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時(shí)因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細(xì)胞從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)運(yùn)到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室,的策略是進(jìn)行低溫保存。這對于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點(diǎn)。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時(shí),細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài),故可以長期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:凍存細(xì)胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。1ml凍存細(xì)胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù),細(xì)胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細(xì)胞/ml;培養(yǎng)細(xì)胞12到24小時(shí),更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細(xì)胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞,并且進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。細(xì)胞鋪板,細(xì)胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化:一個(gè)成年人全身細(xì)胞總數(shù)約1012個(gè),可以區(qū)分為200多種不同類型的細(xì)胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細(xì)胞均來自一個(gè)受精卵細(xì)胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化,這個(gè)過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細(xì)胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細(xì)胞周期中G1期開始時(shí)一個(gè)確定的點(diǎn)G0點(diǎn)“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞,它們的基因表達(dá)和代謝活動各不相同。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SUM-149PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU 565細(xì)胞、LIM 1215細(xì)胞、HEYA8細(xì)胞 PCI-4M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT RPE1細(xì)胞、52PE細(xì)胞、WM451Lu細(xì)胞 NCI-H1668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞、HOS TE85細(xì)胞 UACC 893細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M2-10B4細(xì)胞、RT-BM-1細(xì)胞、293S細(xì)胞 P3-Jiyoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-NFS-60細(xì)胞、SHZ-88細(xì)胞、SK-RC-39細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 NCI-H524 epithelioid cells人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:懸浮生長 細(xì)胞形態(tài)特性:圓形細(xì)胞 為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會停止生長,及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。 SKBr3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-281-T細(xì)胞、HFTF細(xì)胞、OAW 42細(xì)胞 DOK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM12878細(xì)胞、Nthy ori 3.1細(xì)胞、NB-19細(xì)胞 TN5B14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4;11細(xì)胞、SKES-1細(xì)胞、F56 [Human neoplasm]細(xì)胞 alpha TC1.6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO1N1細(xì)胞、MIN-6細(xì)胞、BC-024細(xì)胞 SCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNCL-2細(xì)胞、LNCaP subline C4-2細(xì)胞、PIG3細(xì)胞 87 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888 Lu細(xì)胞、KU.812細(xì)胞、HSC-T6細(xì)胞 UMUC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLE細(xì)胞、HFL-1細(xì)胞、H-2029細(xì)胞 MDA231-LM2-4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CSQT-2細(xì)胞、Leukemia L1210細(xì)胞、HCT-FET細(xì)胞 CAL27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 231細(xì)胞、R.K.13細(xì)胞、TO175T細(xì)胞 MeT 5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1783細(xì)胞、IPI-2I細(xì)胞、Panc 02.03細(xì)胞 NCI-H524 epithelioid cells人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 HCC-1833細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞、Panc 5.04細(xì)胞、HOCF細(xì)胞 BBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kupffer細(xì)胞、Y1細(xì)胞、HuCCT-1細(xì)胞 WM 239-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCP1細(xì)胞、H-2106細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞 SNU398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G 401細(xì)胞、SKUT-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞 AE 1201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly10細(xì)胞、L-5178-Y細(xì)胞、SNU-1040細(xì)胞 P388D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7ADR細(xì)胞、LTEP-sm細(xì)胞、HCC-70細(xì)胞 P388D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7ADR細(xì)胞、LTEP-sm細(xì)胞、HCC-70細(xì)胞 HFL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3細(xì)胞、COLO-684細(xì)胞、SKO-007細(xì)胞 H2052_MM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-368細(xì)胞、GBCSD細(xì)胞、WM 451-Lu細(xì)胞 MDAMB175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FCCH1018細(xì)胞、Reuber H-35細(xì)胞、H292細(xì)胞 CHP 212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1806細(xì)胞、H-1155細(xì)胞、KMS-11細(xì)胞 D407 RPE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H508細(xì)胞、SuDHL 10細(xì)胞、GM05384細(xì)胞 M-O7e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE-T細(xì)胞、EFO27細(xì)胞、NCIH548細(xì)胞 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA87細(xì)胞、HT-144細(xì)胞、A875細(xì)胞 H-661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-4M細(xì)胞、MKN7細(xì)胞、HCC1359細(xì)胞 Kit225-K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H358細(xì)胞、Okayama University Medical School-27細(xì)胞、HeLa.S3細(xì)胞 NCI-A549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M14-MEL細(xì)胞、AdHek細(xì)胞、U266 Bl細(xì)胞 PL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM細(xì)胞、UACC-893細(xì)胞、NTera2 cl.D1細(xì)胞 H146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC 3960細(xì)胞、CWR22-Rv1細(xì)胞、HFLS-OA細(xì)胞 University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1376.T細(xì)胞、OVCAR 433細(xì)胞、PANC 1005細(xì)胞 KYSE50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMVEC細(xì)胞、OCI-Ly10細(xì)胞、EJ-1細(xì)胞 SU.86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D6P2T細(xì)胞、U031細(xì)胞、IMR90細(xì)胞 Hs683T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1836細(xì)胞、PBL細(xì)胞、HTori3細(xì)胞 H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-GI細(xì)胞、HUSMC細(xì)胞、2T細(xì)胞 HCS-2/8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 c18細(xì)胞、PVEC細(xì)胞、GM03570細(xì)胞 COLO 824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY-270細(xì)胞、NP-69細(xì)胞、HEK293-EBNA細(xì)胞 SCC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ls-174-T細(xì)胞、TU 686細(xì)胞、A2780/CP70細(xì)胞 KMS11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B 95-8細(xì)胞、HCA-7細(xì)胞、RBMEC細(xì)胞 C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCC-SUP細(xì)胞、GAK細(xì)胞、CII細(xì)胞 RH8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVGp12細(xì)胞、Opossum Kidney細(xì)胞、NCI-H3255細(xì)胞 NCI H82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP2/0 Ag-14細(xì)胞、SNU668細(xì)胞、Clone Y-1細(xì)胞 NCIH1734細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-1細(xì)胞、NCI-H1395細(xì)胞、SW-403細(xì)胞 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H187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H748細(xì)胞、TE-7細(xì)胞、H2342細(xì)胞 no.11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE-2 [50.B1]細(xì)胞、THC-8307細(xì)胞、HCA-7細(xì)胞 HCC2185細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL-7402細(xì)胞、CCD-33Co細(xì)胞、B16/F0細(xì)胞 Metastatic Variant 522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR-75-30細(xì)胞、MV3細(xì)胞、MKN-74細(xì)胞 NCIH1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3AA細(xì)胞、KPL4細(xì)胞、HUV-EC-C細(xì)胞 H7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 18細(xì)胞、NCIH2073細(xì)胞、PY8119細(xì)胞 NCI-H524 epithelioid cells人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 VMM5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NuTu 19細(xì)胞、HCC9724細(xì)胞、EM3細(xì)胞 YD15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs940T細(xì)胞、Panc-08.13細(xì)胞、H-322細(xì)胞 H2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hFOB細(xì)胞、NCI-SNU-520細(xì)胞、MM1-S細(xì)胞 TN5B14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4;11細(xì)胞、BL6細(xì)胞、293-EBNA1細(xì)胞 "
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