"NCI-H2081 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來(lái)了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長(zhǎng)期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長(zhǎng)與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍,細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類(lèi)脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變,使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細(xì)胞死亡。因此,細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞,可以使冰點(diǎn)下降,提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,且對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會(huì),從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷。 WM-239-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Daudi細(xì)胞、Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞、MKN-28細(xì)胞 GM346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN 229細(xì)胞、HS-766-T細(xì)胞、NCI-H2286細(xì)胞 OCI-LY-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKO007細(xì)胞、NCI-H2591細(xì)胞、HOP-62細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 NCI-H2081 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長(zhǎng),用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái),很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長(zhǎng)得滿(mǎn)滿(mǎn)的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來(lái)也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒(méi)有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕,避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺(jué)得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng):二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò),細(xì)胞成片脫落,吹打時(shí)沒(méi)有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn):HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng),一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細(xì)胞傳代方法:隨細(xì)胞的密度而增加 MESSADX5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MALME 3M細(xì)胞、CHL/IU細(xì)胞、P3-X63.Ag8.653細(xì)胞 High Five細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN-205細(xì)胞、SW-48細(xì)胞、D-341細(xì)胞 MLE12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KATO 3細(xì)胞、Hs 606.T細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞 NEC8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞、Rca-B細(xì)胞、KYSE410細(xì)胞 PANC-03-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-HME-1細(xì)胞、G 401細(xì)胞、HEK.EBNA細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 NCI-H2081 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:聚團(tuán)懸浮 購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見(jiàn)原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過(guò)程錯(cuò)誤;冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心;懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞;培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤;細(xì)胞置于-80℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來(lái),其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過(guò)高或離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對(duì)離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部?jī)?nèi)壁的距離;rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對(duì)離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來(lái)表示單位。 LNCaP FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H446細(xì)胞、SMC-1細(xì)胞、H1092細(xì)胞 X63-Ag8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CemT4細(xì)胞、C-4-I細(xì)胞、NCIH1155細(xì)胞 Granta519細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE15細(xì)胞、Balb/c 3T3細(xì)胞、Ishikawa細(xì)胞 WEHI-164細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC 3細(xì)胞、3T3(A31)細(xì)胞、PC-3M-1E8細(xì)胞 P30/0HK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC3細(xì)胞、H2107細(xì)胞、293 Ad5細(xì)胞 Ku812F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:159PT細(xì)胞、GC-2細(xì)胞、CD-18細(xì)胞 BC-028細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHC細(xì)胞、H446細(xì)胞、IAR20細(xì)胞 Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-4細(xì)胞、ND7/23細(xì)胞、H1792細(xì)胞 HSC-T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs742T細(xì)胞、MM6細(xì)胞、HOC-1細(xì)胞 MRC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEB-3細(xì)胞、NCI-H226細(xì)胞、NCIH510細(xì)胞 NCI-H2081 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 UMUC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JJN3細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞、Rat Lung-65細(xì)胞 RGE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 683.T細(xì)胞、L615細(xì)胞、NOZC-1細(xì)胞 H-1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549-Taxol細(xì)胞、NCI-322細(xì)胞、UO-31細(xì)胞 SNU5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-C2B細(xì)胞、Hela-Ap-1細(xì)胞、HEK 293-EBNA細(xì)胞 NPC-TW 039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞、LLC PK1細(xì)胞、CAL51細(xì)胞 VMRCRCZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)-C細(xì)胞、SL1細(xì)胞、NU-GC-3細(xì)胞 VMRCRCZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)-C細(xì)胞、SL1細(xì)胞、NU-GC-3細(xì)胞 C-28I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPPVEC細(xì)胞、H-1650細(xì)胞、NCI-H1993細(xì)胞 MESSA/Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12-SM細(xì)胞、HLEC-B3細(xì)胞、MEG01細(xì)胞 HCC0366細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF/Adr細(xì)胞、RN-c細(xì)胞、NTC200細(xì)胞 RINm5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMO1細(xì)胞、U138MG細(xì)胞、SKHEP-1細(xì)胞 H1404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:He-La細(xì)胞、Hs-343-T細(xì)胞、PT-67細(xì)胞 UO-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Kidney-2細(xì)胞、PC2細(xì)胞、MC-3T3細(xì)胞 MB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-1細(xì)胞、18G3.cl 1細(xì)胞、SK-ChA-1細(xì)胞 Ra No. 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 852.T細(xì)胞、Li-7細(xì)胞、TCC-SUP細(xì)胞 COLO394細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:373 MG細(xì)胞、BE2-M17細(xì)胞、RGM1細(xì)胞 SGC 7901細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2932細(xì)胞、UK Pan-1細(xì)胞、P30/0HK細(xì)胞 CoC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D324細(xì)胞、L540細(xì)胞、74Int細(xì)胞 HOEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT(H9)細(xì)胞、GDM1細(xì)胞、EA. hy 926細(xì)胞 C4-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-II-E-C3細(xì)胞、FRO81-2細(xì)胞、LCD細(xì)胞 SF 763細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM2131細(xì)胞、RD細(xì)胞、HT-29細(xì)胞 FU-97細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCl-H157細(xì)胞、MAD109細(xì)胞、Hs819T細(xì)胞 C3H10T1/2CL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNFI細(xì)胞、TE-15細(xì)胞、H-2073細(xì)胞 MDA-MB 468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373細(xì)胞、SKMEL5細(xì)胞、ARPE19細(xì)胞 WM115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE1細(xì)胞、SN12PM6細(xì)胞、Jurkat FHCRC細(xì)胞 NCIH64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo-201細(xì)胞、HL-1細(xì)胞、HOP62細(xì)胞 BHT-101細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO211H細(xì)胞、DV-90細(xì)胞、JeKo 1細(xì)胞 Hs294細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT細(xì)胞、COLO 201細(xì)胞、MDA-MB435細(xì)胞 MFD-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAPC-4細(xì)胞、JHH-7細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞 HO1N1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Case 3細(xì)胞、Clone M-3細(xì)胞、VMM5A細(xì)胞 OCI AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 839細(xì)胞、MOLP-8細(xì)胞、OVISE細(xì)胞 RL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC90細(xì)胞、NCIH596細(xì)胞、C22細(xì)胞 HEK293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343-MG細(xì)胞、HIMEC細(xì)胞、Murine Carcinoma-38細(xì)胞 SK-RC 52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BLO11細(xì)胞、McCoy細(xì)胞、Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞 Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-UMC-11細(xì)胞、Saos2細(xì)胞、GT39細(xì)胞 H-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGP-1細(xì)胞、UPCI-SCC090細(xì)胞、CPAE細(xì)胞 SNU520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2170細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞、MPASMC細(xì)胞 Hs294T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAPCa-2b細(xì)胞、DanG細(xì)胞、J-82細(xì)胞 RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDE細(xì)胞、TOV-21G細(xì)胞、H-2107細(xì)胞 NCI-H1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE13細(xì)胞、HUT-226細(xì)胞、PCI:SG-231細(xì)胞 SK MEL 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Human Colon細(xì)胞、NP69細(xì)胞、HREC細(xì)胞 SHG 44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HD-LM-2細(xì)胞、Hs840T細(xì)胞、RT4-D6P2T細(xì)胞 C41細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-A細(xì)胞、C2A細(xì)胞、EMT6細(xì)胞 Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST486細(xì)胞、VP303細(xì)胞、3T3-J2細(xì)胞 NCIH2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1.0細(xì)胞、SK-N-BE(1)細(xì)胞、LA 4細(xì)胞 WERI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV3121細(xì)胞、AHH1細(xì)胞、HAC-84細(xì)胞 MLA-144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1963細(xì)胞、WEHI 231細(xì)胞、P3X63Ag8653細(xì)胞 hTERT-RPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SAS細(xì)胞、MASMC細(xì)胞、TE32細(xì)胞 MDA157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mink Lung細(xì)胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、UCLA NPA-87-1細(xì)胞 WM 2664細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-9細(xì)胞、SK-MEL24細(xì)胞、MV411細(xì)胞 G-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-118MG細(xì)胞、U-87MG細(xì)胞、HCMEC細(xì)胞 NCI-H2081 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 MEL-526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tj-905細(xì)胞、HEK 293-H細(xì)胞、WILL2細(xì)胞 Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/O-Ag14細(xì)胞、SCLC-21H細(xì)胞、High 5細(xì)胞 Hs940T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549/ATCC細(xì)胞、RBE4細(xì)胞、N1E115細(xì)胞 Granta-519細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS13細(xì)胞、A-20細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞 "
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