"NCI-H1092 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。 CEM-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Reuber H35細胞、AG06814-J細胞、Hs 729細胞 SKNBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PZ-HPV-7細胞、L-132細胞、H-446細胞 Mel526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-MS細胞、KCL-22細胞、KRC/Y細胞 細胞生長:貼壁 NCI-H1092 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。 細胞傳代方法:隨細胞的密度而增加 U-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 606細胞、293E細胞、CT26-clone 25細胞 SK-MES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:624-mel細胞、BBE細胞、MPP 89細胞 IBRS-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis Lung Cancer細胞、OV2008細胞、NCIH1092細胞 RS(4;11)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞 HL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HK-2 [Human kidney]細胞、H1792細胞、OCI-Ly7細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 NCI-H1092 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 細胞生長特性:懸浮生長 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 SKG3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE29細胞、B-3細胞、SW-48細胞 MHCC97H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Melanoma 14細胞、M-O7e細胞、H2030細胞 SW-839細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY19細胞、H-87細胞、Hi5細胞 CCC-ESF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1781細胞、Namalwa細胞、MB231細胞 BNCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H647細胞、IGR.OV1細胞、U-251_MG細胞 TE-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GOS-3細胞、Hs 675.T細胞、SNT-8細胞 NCIH1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:High Five細胞、A-20細胞、RMS 1598細胞 CG4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu 8988s細胞、PLC/PRF/5細胞、HCC1954-BL細胞 TK10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY70細胞、SK HEP-1細胞、NCI-H1651細胞 RAW2647細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30/OHK細胞、0V-1063細胞、SNU520細胞 NCI-H1092 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 H-1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD-2細胞、CHG-5細胞、HSC4細胞 TE5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN-9D細胞、NCI-H2066細胞、TE-5細胞 CRFK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCC-PAN2細胞、JVM3細胞、NCI.H522細胞 PaTu8988s細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs863T細胞、HCEC-B4G12細胞、HPBALL細胞 CNE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT15細胞、RMC-1細胞、MDA-330細胞 Huh-7.5.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-cells細胞、NPA87細胞、SMA-560細胞 Huh-7.5.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-cells細胞、NPA87細胞、SMA-560細胞 Li-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC clone 929細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞、VM-CUB-I細胞 DMS-79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U031細胞、AM38細胞、UMUC1細胞 RPMI-8226S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCSMC細胞、C32 mel細胞、HT115細胞 P3/NS1/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EU-3細胞、GM 2132細胞、SHP-77細胞 Swiss/3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Fetal Thymocyte-8810細胞、LL/2 (LLC1)細胞、NCI-H2085細胞 PaTu-8988s細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305-C細胞、EBC-1/original細胞、SCC154細胞 CMT 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FaDu細胞、Hs445細胞、P3/NS-1細胞 CESS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-19細胞、B16 melanoma細胞、CaSki細胞 BHT101細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-7細胞、MB231細胞、UMUC-3細胞 Lewis Lung Cancer細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Embryonic Bovine Tracheal cells細胞、HEL-1細胞、Caki-1細胞 CAL-120細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ishikawa細胞、RAT2細胞、MBT-2細胞 Walker 256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞、GBC-SD細胞、BHP 10-3細胞 OCM-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A.704細胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、OCILY3細胞 PC 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-2650細胞、RPMI 6666細胞、SKN-SH細胞 OCI AML5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1693細胞、Hs-688A-T細胞、X63Ag8.653細胞 PLA801C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBT-2細胞、CCD-19Lu細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞 HuH-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCCAR細胞、Hs934T細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞 EFM-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMES細胞、RD-ES細胞、HT-115細胞 COV-434細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-1376細胞、PNT-1A細胞、B16BL6細胞 Caco2-BBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs729細胞、OCI-AML5細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞 Kit-225細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC8024細胞、ST486細胞、NCIH209細胞 L-Wnt3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hk-2細胞、Hs1.Tes細胞、MUGCHOR1細胞 My-La 2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-266 AR1細胞、H345細胞、MIMVEC細胞 MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YH-13細胞、SLK細胞、NCIH1869細胞 PANC-02-03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-EBNA細胞、MSTO211H細胞、MeWo細胞 BrCL18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUTZ3細胞、SKMEL-2細胞、VK-2/E6E7細胞 AE 1201細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly10細胞、L-5178-Y細胞、SNU-1040細胞 SO-Rb 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293/EBNA細胞、H-1385細胞、RASMC細胞 NPA87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU 145細胞、Sc-1細胞、SHEP1細胞 RK13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCLP1細胞、AMJ2C8細胞、H-2444細胞 H9c2(2-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE296細胞、PLCPRF5細胞、HCC0044細胞 BALB/3T3 cl. A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCK-8細胞、HEK 293-F細胞、CTV-1細胞 WM 266-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 167細胞、SNU484細胞、CTLL-2細胞 HTh-74細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel-MeWo細胞、HSC-I細胞、YD-15細胞 A253細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE-hTERT細胞、ME16C細胞、LED-WiDr細胞 NCIH727細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-N87細胞、TN5B14細胞、SW1573細胞 769P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AHH1細胞、AU-565細胞、H-1770細胞 WiDr/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb1細胞、MDCK (NBL-2)細胞、Hs-343-T細胞 SW 1463細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC202細胞、H-345細胞、GT38細胞 SK-N-BE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ID8/MOSEC細胞、BpRc1細胞、SK-CO-1細胞 M4e細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GBCSD細胞、JeKo 1細胞、H676B細胞 Panc 05.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMST6細胞、CMEC/D3細胞、NUGC-4細胞 PAN 02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFM-223細胞、MTEC1細胞、RAW-264.7細胞 M14-MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB 361細胞、SW982細胞、CCD-966SK細胞 NCI-H1092 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 C3H 10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA 46細胞、H2126細胞、HCC44細胞 SV40-MES13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KRC Y細胞、LAN1細胞、NPA 87細胞 Hs 695T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NS1/1-Ag4-1細胞、BE(2)C細胞、OVCAR 8細胞 SW-839細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY19細胞、NRCC細胞、Ketr-3細胞 "
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