"NCI-H2029 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! RGC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-295細胞、MFE 296細胞、KYSE 180細胞 M-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW626細胞、NIH 3T6細胞、BNL-CL.2細胞 Hela-Ap-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-2/ad細胞、HSKMC細胞、MKN1細胞 細胞生長:貼壁 NCI-H2029 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴(yán)重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。 細胞傳代方法:1:3-1:5傳代; Sp2/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1623細胞、LS180細胞、NCIH187細胞 COLO 320 DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1197.T細胞、WPMY1細胞、SK-MEL-2-LUC細胞 CHP-126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKT 3細胞、CCC-HIE-2細胞、HOC1細胞 P30/0HK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC3細胞、H2107細胞、293 Ad5細胞 SN12-PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc08.13細胞、CNE-1細胞、108CC15細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 NCI-H2029 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 A1847細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H345細胞、NCI-H647細胞、P-2003細胞 NRK-52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wistar Institute, Susan Hayflick細胞、Mia PACA 2細胞、PC9細胞 8305C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN28細胞、NCI-H719細胞、SK-MEL2細胞 hTERT-HPNE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-8/ADR細胞、LUDLU1細胞、Lewis lung carcinoma細胞 RIN-m5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIN87細胞、CCC-HHM-2細胞、639V細胞 CCD 1112SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-432細胞、OV1-P細胞、H-1650細胞 NCI-H520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888T細胞、DC2.4細胞、HIEC-6細胞 NCIH2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-148細胞、NCI-H2073細胞、LICR-LON-HN6細胞 MOLP8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341MD細胞、LX-2細胞、McCoy B細胞 MFM-223細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLU-1細胞、KM12-SM細胞、P3X63Ag8-6-5-3細胞 NCI-H2029 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 MDA-MB436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-795細胞、X63Ag8.653細胞、Colon 38細胞 NS653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1869細胞、LAPC-4細胞、PLA-802細胞 UWB1.289+BRCA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan 1細胞、MDA-MB-435細胞、SUM149細胞 NCIH647細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit 225-K6細胞、Tca-83細胞、CX1細胞 MV-4-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-3細胞、SPC-A1細胞、UACC-893細胞 H-2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-99A細胞、WiDr細胞、WM115F細胞 H-2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-99A細胞、WiDr細胞、WM115F細胞 RKN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu177細胞、OE33細胞、ECV304細胞 Human Hepatocyte Line 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO206F細胞、NB.4細胞、Huh7.5細胞 PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1694細胞、hEEC細胞、HCT116細胞 M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB-1細胞、COLO-320細胞、MDA-MB-435S細胞 AR4IP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341 Med細胞、IEC 6細胞、SUDHL-16細胞 M059K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NMCG1細胞、C-Lu65細胞、M07e細胞 SK-ML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR L279細胞、Sp2/0-Ag14細胞、J 111細胞 Ly3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H295R細胞、MDA-MB-330細胞、LLC-WRC 256細胞 Hs852T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA NPA871細胞、NCI-H1573細胞、KTA-7細胞 WTRL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AAV-293細胞、H-920細胞、DanG細胞 NCI-H810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACHN細胞、JB6 Cl 30-7b細胞、H2228細胞 Experimental Mammary Tumour-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 354.T細胞、bEND.3細胞、QGY7703細胞 FRO81-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m細胞、SW1088細胞、NCI-H196細胞 H-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞 T-98G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320DM細胞、TC7細胞、MV-522細胞 D283MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu99A細胞、HEK293S細胞、DoTc2細胞 JeKo-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM2細胞、BCP-1細胞、H1734細胞 373MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:624 MEL細胞、ARPE19細胞、HMEL細胞 RPMI-6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG3A細胞、MC-116細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞 MC3T3-E1 Subclone 24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1666_DA細胞、526mel細胞、Lung cancer-1/squamous細胞 Mono Mac6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:138 MG細胞、KATOIII細胞、SCC-9細胞 C3H10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1573細胞、PCI-04B細胞、HCEpiC細胞 AC29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-1-B細胞、H8細胞、GM3190細胞 COLO206細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NALM-6-M1細胞、H-II-E-C3細胞、SU-DHL-16細胞 SHEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-39細胞、Panc-08.13細胞、Hs940T細胞 Roswell Park Memorial Institute 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone Y1細胞、H-2087細胞、SRA 01/04細胞 H865細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293FT細胞、B16F0細胞、R-1059-D細胞 H-2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS17/28細胞、SKRC20細胞、Epstein-Barr-1細胞 HECV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 19Lu細胞、NCTC 3960細胞、PANC-28細胞 UMNSAH/DF#1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 149細胞、HELF細胞、IEC-18細胞 C3H10T1/2 clone8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS-1細胞、MCF10A細胞、NCIH322細胞 RH-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IAR-20細胞、SK-N-BE2C細胞、CMT 93細胞 HMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H226細胞、MCF12A細胞、H4細胞 Keio University-19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF539細胞、RPMI no 8226細胞、IHH-4細胞 HLEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca8113細胞、AAV293細胞、DHL5細胞 H-1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M細胞、Calu-3細胞、SK MEL 28細胞 HPAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero細胞、FBHE細胞、SK-SH-SY5Y細胞 H-498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHRF細胞、SNU368細胞、COLO 320 DM細胞 H2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epstein-Barr-1細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、H1618細胞 HO-8910PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T6細胞、TYKnu細胞、T98G細胞 BC3H-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:769P細胞、ETCC007細胞、GEO細胞 H1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVSAHO細胞、LC-2-Ad細胞、SkChA1細胞 NCI-Hut 125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R1800[RA]細胞、NMCG-1細胞、Strain V細胞 OsACL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、LU65細胞、SUM-159-PT細胞 NCI-H2029 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 ZR75-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1522細胞、SCC VII細胞、HEC1-B細胞 SK MES 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.3細胞、HuT 102細胞、HHUA細胞 BCP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8-6-5-3細胞、WEHI 231細胞、Panc02-H0細胞 8305C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN28細胞、WPMY-1細胞、C12細胞 "
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