"NCI-H1963 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術。目前,細胞凍存最常用的技術是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細胞內(nèi)部空間結構紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內(nèi)結構成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術的關鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少胞內(nèi)形成冰結晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。 RCF細胞系相關產(chǎn)品:HA細胞、Malme-3 M細胞、MRASMC細胞 Human ErythroLeukemia細胞系相關產(chǎn)品:EBC-1細胞、LAN6細胞、GM3570細胞 266 Bl細胞系相關產(chǎn)品:GM03671C細胞、KM-H2細胞、SACC-83細胞 細胞生長:貼壁 NCI-H1963 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結構特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。 細胞傳代方法:每周換液2次。 SK RC 52細胞系相關產(chǎn)品:RCC-10細胞、NCI-BL2141細胞、H-322細胞 HRVEC細胞系相關產(chǎn)品:CCK-81細胞、COLO_320DM細胞、L-6細胞 OVCAR 4細胞系相關產(chǎn)品:TSCC1細胞、HIEC細胞、NPA-87細胞 GAK細胞系相關產(chǎn)品:RSC-364細胞、C-28I2細胞、SVEC4-10細胞 A-10細胞系相關產(chǎn)品:Co-115細胞、CF-PAC1細胞、SJ-RH30細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 NCI-H1963 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 細胞生長特性:懸浮生長 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。 JS1細胞系相關產(chǎn)品:786-O RCC細胞、GM07404A細胞、CHP-126細胞 HFLS細胞系相關產(chǎn)品:MPC11細胞、HCC-9204細胞、HEM細胞 TC-1 [Mouse lung]細胞系相關產(chǎn)品:Hs 274細胞、HuH-28細胞、NCIH2023細胞 A498細胞系相關產(chǎn)品:H-196細胞、C2-C12細胞、OSC19細胞 ANA1細胞系相關產(chǎn)品:C-127細胞、KBM7細胞、H-2081細胞 VMRCRCZ細胞系相關產(chǎn)品:BE(2)-C細胞、SL1細胞、NU-GC-3細胞 LA-N-5細胞系相關產(chǎn)品:Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NIH:OVCAR-8細胞、LAD-2細胞 OEC19細胞系相關產(chǎn)品:TE671細胞、PE/CA-PJ34細胞、Mia PACA 2細胞 X63.Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品:NCIH211細胞、GC9811-P細胞、NCI-BL1339細胞 Y-1細胞系相關產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞、Panc4.03細胞、HEC251細胞 NCI-H1963 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 Panc_03_27細胞系相關產(chǎn)品:A2780/Taxol細胞、Strain KB細胞、GP293細胞 MUG-Chor1細胞系相關產(chǎn)品:Mv1.Lu細胞、L細胞、SW 1783細胞 Hs695細胞系相關產(chǎn)品:NB4細胞、C-33-A細胞、M109細胞 F442A細胞系相關產(chǎn)品:TO 175.T細胞、H23細胞、SN12-PM6細胞 HOCF細胞系相關產(chǎn)品:Psi2-DAP細胞、RPMI1788細胞、Clone Y1細胞 SUM102PT細胞系相關產(chǎn)品:H-920細胞、TE 354.T細胞、Chang liver細胞 SUM102PT細胞系相關產(chǎn)品:H-920細胞、TE 354.T細胞、Chang liver細胞 SUDHL-16細胞系相關產(chǎn)品:F-81細胞、Porcine Kidney-13細胞、NCIH1781細胞 SUM 159PT細胞系相關產(chǎn)品:GM02132細胞、TE-5細胞、P3-X63Ag8.653細胞 Ramos-2G6-4C10細胞系相關產(chǎn)品:BT 549細胞、PANC0327細胞、COS7細胞 U138-MG細胞系相關產(chǎn)品:HN-6細胞、ST-2細胞、BIU87細胞 NCI H226細胞系相關產(chǎn)品:Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞、HCC78細胞、BAR-T細胞 EFM192C細胞系相關產(chǎn)品:C3H/10T1/2-clone8細胞、LS411N細胞、H3255_DA細胞 SCaBER細胞系相關產(chǎn)品:QGY7703細胞、RGC6細胞、L 428細胞 NEC-8細胞系相關產(chǎn)品:TE-10細胞、Panc2_03細胞、KTA7細胞 CCRF-CEM C7細胞系相關產(chǎn)品:1301細胞、Colon 26細胞、Alexander細胞 FL62891細胞系相關產(chǎn)品:PCI-SG231細胞、SNU-601細胞、SNU-668細胞 H2286細胞系相關產(chǎn)品:KU-812F細胞、MUVEC細胞、SuDHL 8細胞 PL-12細胞系相關產(chǎn)品:MOLT-3細胞、NCIH747細胞、NIE-115細胞 SUNE 1細胞系相關產(chǎn)品:Buffalo Rat Liver-3A細胞、SUDHL6細胞、GLAG-66細胞 WC00079細胞系相關產(chǎn)品:A549ATCC細胞、MKN74細胞、D 407細胞 95-D細胞系相關產(chǎn)品:Line 870 Emory University-4細胞、SHP77細胞、SCI1細胞 MSTO-211H細胞系相關產(chǎn)品:H-748細胞、Bx-PC3細胞、ECGI10細胞 OVCA433_Bast細胞系相關產(chǎn)品:AE 1201細胞、Bat lung細胞、T1-73細胞 Hs-606-T細胞系相關產(chǎn)品:SKES1細胞、NCIH1838細胞、LP-1細胞 H1688細胞系相關產(chǎn)品:T/G HA VSMC細胞、KLM1細胞、HEL-299細胞 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