"Mel-RM epithelioid cells人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：黑色素瘤；神經(jīng)節(jié)轉(zhuǎn)移；男性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會(huì)受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個(gè)說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
3T3F442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Microbiological Associates-104細(xì)胞、JB-6 Cl 30細(xì)胞、NWA細(xì)胞
LL/2(LLc1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL/IU細(xì)胞、MDA-MB-361細(xì)胞、SW 1463細(xì)胞
HR1K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、TM-4細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
Mel-RM epithelioid cells人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享：支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長(zhǎng)，營(yíng)養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個(gè)世界性問題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá)，又不能通過可視法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，而且它對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)率影響較小，不易引起注意。國(guó)內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的，國(guó)外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞，有的細(xì)胞株可以同時(shí)污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個(gè)方面來預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作；細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后，特別是重要的細(xì)胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁，一般來講，對(duì)作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對(duì)多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對(duì)支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對(duì)支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
2PK-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC-3-VGH細(xì)胞、MLA 144細(xì)胞、A 2780 CP細(xì)胞
Hs-578T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV411細(xì)胞、SGC-996細(xì)胞、H-2126細(xì)胞
3T3 Swiss Albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVTOKO細(xì)胞、BNL CL2細(xì)胞、CCK81細(xì)胞
Rca-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT39細(xì)胞、MDA-MB 231細(xì)胞、NCI-H1792細(xì)胞
VM-CUB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC4細(xì)胞、MSCs（mUCMSCs）細(xì)胞、SW-948細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
Mel-RM epithelioid cells人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
GM00346B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ReNcell CX細(xì)胞、RCC10 RGB細(xì)胞、TR-146細(xì)胞
Eca 109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO8910/PM細(xì)胞、PC 12細(xì)胞、SNU869細(xì)胞
N1S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera2 cl.D1細(xì)胞、373MG細(xì)胞、RCF細(xì)胞
Mino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1-cell細(xì)胞、LM6細(xì)胞、RPMI.8226細(xì)胞
KU-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC14細(xì)胞、2008細(xì)胞、NKT細(xì)胞
OVCAR-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IAR20細(xì)胞、NK-92MI細(xì)胞、Hs 895.T細(xì)胞
H2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BrCL12細(xì)胞、PTK2細(xì)胞、EB2細(xì)胞
NGEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Duke University 145細(xì)胞、TCam-2細(xì)胞、SF-763細(xì)胞
T2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-38細(xì)胞、Mel-624細(xì)胞、Hs-695-T細(xì)胞
MES13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FTC-133細(xì)胞、COLO201細(xì)胞、A-2780細(xì)胞
Mel-RM epithelioid cells人黑色素瘤細(xì)胞系
PL 45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RK 13細(xì)胞、HC-11細(xì)胞、Human Embryo Lung-1細(xì)胞
293F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1876細(xì)胞、T_T_細(xì)胞、MV4;11細(xì)胞
C-643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AD293細(xì)胞、RA.1細(xì)胞、Granta519細(xì)胞
LM8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV 304細(xì)胞、PK-13細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞
HLEC-B3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT 16細(xì)胞、BN-CL2細(xì)胞、MTEC1細(xì)胞
SKCol1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT 20細(xì)胞、NCIH250細(xì)胞、OVCAR-8/ADR細(xì)胞
SKCol1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT 20細(xì)胞、NCIH250細(xì)胞、OVCAR-8/ADR細(xì)胞
COLO680N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HSF-1細(xì)胞、SNU182細(xì)胞、LS411N細(xì)胞
T/GHA-VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-7901細(xì)胞、NCIH441細(xì)胞、KOSC2細(xì)胞
Y3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCLM3細(xì)胞、DiFi細(xì)胞、DHL8細(xì)胞
Jijoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283細(xì)胞、SRA 01/04細(xì)胞、Mo 59J細(xì)胞
Dakiki細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS411N細(xì)胞、DU 145細(xì)胞、U031細(xì)胞
SK-MEL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HemECs細(xì)胞、HUT-28細(xì)胞、SW 403細(xì)胞
NCIH2171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-148細(xì)胞、NCI-H2073細(xì)胞、LICR-LON-HN6細(xì)胞
Jijoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283細(xì)胞、SRA 01/04細(xì)胞、Mo 59J細(xì)胞
WiDr-TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞、SUM-190PT細(xì)胞、WIL2 Secreting細(xì)胞
Mink細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS 17/28細(xì)胞、SUIT2細(xì)胞、Human Microglia Clone 3細(xì)胞
CEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS 2B細(xì)胞、HS 445T細(xì)胞、Calu-1細(xì)胞
HIT-T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA560細(xì)胞、H747細(xì)胞、SNU886細(xì)胞
HIT-T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA560細(xì)胞、H747細(xì)胞、SNU886細(xì)胞
WSU-DLCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-95-2細(xì)胞、MIO-M1細(xì)胞、CEM/C1細(xì)胞
DoTc2 4510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO201細(xì)胞、SACC-83細(xì)胞、T-47-D細(xì)胞
SW.620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-215細(xì)胞、MCCAR細(xì)胞、SK-NMC細(xì)胞
MUGCHOR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：no.11細(xì)胞、HCCC-9810細(xì)胞、WIL2S細(xì)胞
Hs 683.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TPC1細(xì)胞、RPTC細(xì)胞、HS5細(xì)胞
Y 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA/Dx5細(xì)胞、U-251-MG細(xì)胞、P3J HR-1細(xì)胞
SNU-719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HcerEpic細(xì)胞、P36細(xì)胞、Sp2/0-Ag14細(xì)胞
NBL-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PT-K75細(xì)胞、GM-637細(xì)胞、WI 38細(xì)胞
AZ521細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T6 Swiss Albino細(xì)胞、X63Ag8-653細(xì)胞、Uhth-74細(xì)胞
HTh-74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel-MeWo細(xì)胞、HSC-I細(xì)胞、YD-15細(xì)胞
UO-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Kidney-2細(xì)胞、PC2細(xì)胞、MC-3T3細(xì)胞
MG-HU-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-32細(xì)胞、CCD-1112sk細(xì)胞、LTEPa2細(xì)胞
MDA-MB-175VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2108細(xì)胞、SF767細(xì)胞、BNL-HCC細(xì)胞
EL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK.2細(xì)胞、SK-MEL3細(xì)胞、SV40-HCEC細(xì)胞
A549 ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC1細(xì)胞、NCI-H2023細(xì)胞、NCIH2122細(xì)胞
BIU-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT 28細(xì)胞、COLO320DM細(xì)胞、MDA-MB-468-RED細(xì)胞
P3 NS1 Ag4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 706.T細(xì)胞、National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞、RCC-10細(xì)胞
C-33-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PVEC細(xì)胞、293c18細(xì)胞、NCI-H2107細(xì)胞
Hep-G2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Emory University-2細(xì)胞、FK81細(xì)胞、CCC-HSF-1細(xì)胞
UMR106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-nu細(xì)胞、Panc203細(xì)胞、Mouse INsulinoma 6細(xì)胞
HEI-193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNSC細(xì)胞、NIH:OVCAR-5細(xì)胞、NCI-H1819細(xì)胞
JJN-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOC1細(xì)胞、CW2細(xì)胞、UMUC14細(xì)胞
Neuro 2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A10細(xì)胞、HCC-95細(xì)胞、OLN 93細(xì)胞
Sol8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW2647細(xì)胞、Oregon J-111細(xì)胞、U-118MG細(xì)胞
HD11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05887細(xì)胞、RPMI-6666細(xì)胞、SKNDZ細(xì)胞
HCC-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss/3T3細(xì)胞、HBL100細(xì)胞、C8D1A細(xì)胞
OC-3-VGH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-6細(xì)胞、PJ34細(xì)胞、SUD-4細(xì)胞
RPMI 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC1細(xì)胞、A204細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞
PNEC30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly7細(xì)胞、FHC細(xì)胞、BCPAP細(xì)胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL16細(xì)胞、T47-D細(xì)胞、MDA-468細(xì)胞
MZ-CRC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2030細(xì)胞、KM933細(xì)胞、SUM 102細(xì)胞
Mel-RM epithelioid cells人黑色素瘤細(xì)胞系
GM00346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細(xì)胞、BT474細(xì)胞、HFL-1細(xì)胞
HLEB3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH 7777細(xì)胞、TE-12細(xì)胞、AMC-HN-8細(xì)胞
GM2132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 841 CoTr細(xì)胞、Sf21細(xì)胞、NOZAWA細(xì)胞
N1S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera2 cl.D1細(xì)胞、CEMC7細(xì)胞、OV2008細(xì)胞
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關(guān)鍵字： Mel-RM epithelioid cells人黑色素瘤細(xì)胞系
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