"3T3F442A epithelioid cells小鼠脂肪前體細胞系
細胞背景資料:脂肪前體細胞;雄性;Swiss albino
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。
HCC 70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nthy-ori 3-1細胞、SK-MEL28細胞、AC16 [Human hybrid]細胞
WM-239-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Daudi細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞、MKN-28細胞
NCIH250細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH322細胞、8305-C細胞、SNU-761細胞
細胞生長:貼壁
3T3F442A epithelioid cells小鼠脂肪前體細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞學在生命科學科中起著至關(guān)重要的作用,近年來細胞學蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進展,細胞實驗室的構(gòu)建也是各個院校生物學科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復雜,需要的實驗設備種類繁多,下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內(nèi)毒素直接參與細胞凋亡,血清中內(nèi)毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高,會直接導致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質(zhì)量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour,再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾毎麅龃婀苄枰⒓捶庞冢常贰嫠≈锌焖購吞K之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材:細胞實驗中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
624 MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNUC1細胞、CCD-841CoN細胞、COLO-684細胞
LAN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-8細胞、AD-293細胞、U373細胞
HM06.A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H847細胞、H2029細胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞
SK-ES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LK 2細胞、Emory University-3細胞、U-138 MG細胞
H-660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63細胞、WM266mel細胞、Y3-Ag123細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
3T3F442A epithelioid cells小鼠脂肪前體細胞系
細胞生長特性:貼壁
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
TGBC11T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Co 205細胞、CLONE M3細胞、CMT167細胞
MDA1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-549細胞、CEM/C1細胞、MN-60細胞
HCC2185細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL-7402細胞、CCD-33Co細胞、B16/F0細胞
639 V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD18細胞、V-79-4細胞、FCCH1024細胞
TERT-RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-55細胞、GM00637I細胞、H4-II-E細胞
RBL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS79細胞、NIH-OVCAR-3細胞、HeLa S-3細胞
C2A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HaCaT細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、Hs445細胞
H2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Molm14細胞、CALU1細胞、L 1210細胞
RINm-5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan-2細胞、NCIH1781細胞、hs 68細胞
T2(174 x CEM.T2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC.1細胞、H295R細胞、CNE2Z細胞
3T3F442A epithelioid cells小鼠脂肪前體細胞系
Homo sapiens No. 578, breast cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMK-1細胞、Ramos.2G6.4C10細胞、COLO 206F細胞
IEC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AdHek細胞、OCI-LY-7細胞、Hs 839.T細胞
SUD6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1623細胞、RCS細胞、Walker-256-TC細胞
WEHI-279細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31FUJ細胞、LICCF細胞、PC14細胞
Hep 3B2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JKT-1細胞、CCD-841-CoN細胞、769-P細胞
AML12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-3T3-E1細胞、PIG3細胞、Panc-08.13細胞
MMAc-SF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEB細胞、Kit-225-K6細胞、MB157細胞
SEG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1522細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞、AR4-2J細胞
RPMI-7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T HEECs細胞、NTERA-2/D1細胞、Hs281T細胞
RPMI8226/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL-1細胞、SMA-560細胞、BEL7404細胞
U-2-OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AM-38細胞、NCI-H2087細胞、SUM149-PT細胞
CFPAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH524細胞、HEL9217細胞、DMS-153細胞
NEC8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、Rca-B細胞、KYSE410細胞
HUVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1436細胞、H2081細胞、SKMEL-1細胞
L-6TG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-2003細胞、A875細胞、GS-9L細胞
SU8686細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL3A細胞、PANC-28細胞、LuCL4細胞
RERF-LC-MS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NH6細胞、H-211細胞、RBL-I細胞
COV504細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H341細胞、Rh30細胞、Hs 27細胞
BT-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos (RA 1)細胞、H-1694細胞、MC-4細胞
SNU-216細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97-L細胞、JVM-3細胞、M-NFS-60細胞
NCI-H841細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL.1ME A.7R.1細胞、NOZAWA細胞、Colo16細胞
Kato-III細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 1細胞、Mel-RM細胞、ME180細胞
COLO-320-DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GEO細胞、KYSE-520細胞、SW1353細胞
SKLU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Mel1細胞、WEHI 3細胞、D283-MED細胞
hRPTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0504細胞、Medical Research Council cell strain-9細胞、KCL-22細胞
MDA2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00079細胞、LC1/Sq細胞、NCTC clone 1469細胞
AtT-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1436細胞、HConEpic細胞、A-253細胞
SKML-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26.CL25細胞、TE32細胞、PG13細胞
OCI AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 839細胞、MOLP-8細胞、OVISE細胞
SNU-739細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-498細胞、HGBEC細胞、AM-38細胞
KYSE-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bx-PC3細胞、S180細胞、H35細胞
EFM19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC78細胞、MC3T3細胞、SKRC-52細胞
CF-PAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2452細胞、P30/Ohkubo細胞、NCC-IT細胞
251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578T細胞、IMCD-3細胞、HN 4細胞
SCaBER細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY7703細胞、RGC6細胞、L 428細胞
MCF-7/ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PT67細胞、B16-F0細胞、MDAMB-231細胞
A-253細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI2650細胞、GA-10-Clone-4細胞、SW756細胞
H865細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293FT細胞、B16F0細胞、R-1059-D細胞
P31-FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:801-D細胞、HCT 15細胞、SL-29細胞
UWB1-289細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/CP細胞、HHFK細胞、DBTRG-05MG細胞
Human Fetal Thymocyte-8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞
HuT 78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 174T細胞、SKMEL3細胞、ST細胞
OS-732細胞系相關(guān)產(chǎn)品:6T-CEM細胞、H-EMC-SS細胞、M-1細胞
MDA-MB436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-795細胞、X63Ag8.653細胞、Colon 38細胞
RC-K8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-FT細胞、Molm 14細胞、KLN205細胞
BIC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/c 3T3 clone A31細胞、SW-756細胞、ONS76細胞
SkChA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC1細胞、H-146細胞、LU165細胞
KOPN-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1954細胞、FRO 81-2細胞、SW 1088細胞
Hs 766.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH838細胞、HPMC細胞、HT 1376.T細胞
RA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T47D細胞、NCIH2291細胞、MV522細胞
GM05862細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1404細胞、Hs695T細胞、OVCA-433細胞
3T3F442A epithelioid cells小鼠脂肪前體細胞系
MHCC-97細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343細胞、LL2細胞、PTK-1細胞
NCTC clone 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB157細胞、OAC-P4C細胞、NCI-H1651細胞
CCD-841CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fao細胞、HCT116細胞、KU-19-19細胞
HCC2157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR-32細胞、LNCaP C4-2B細胞、Ramos(RA1)細胞
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