"RGM1 epithelioid cells大鼠正常胃黏膜上皮細胞系
細胞背景資料:胃黏膜;上皮細胞;自發(fā)永生;Wistar
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題。總結(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當(dāng)會事。
GT1-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LY-R細胞、BCaP 37細胞、2B4細胞
IPLB-SF 21AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKO3細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、HCC-2108細胞
RL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC90細胞、NCIH596細胞、C22細胞
細胞生長:貼壁
RGM1 epithelioid cells大鼠正常胃黏膜上皮細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
Colo-206F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞、V-79細胞、NCI-H1930細胞
Potorous tridactylus Kidney 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE30細胞、RCC 7860細胞、Farage細胞
H-7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSU-Pr1細胞、TGBC-11-TKB細胞、HEp-2細胞
SW837細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC 5細胞、293AD細胞、EBC-1細胞
MDA-PCa-2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2110細胞、HT144mel細胞、MLMEC細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
RGM1 epithelioid cells大鼠正常胃黏膜上皮細胞系
細胞生長特性:貼壁
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
L 428細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU475細胞、HCC-1833細胞、QGP1細胞
Hs 888.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT細胞、PL12細胞、P3J細胞
B16/F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_05_04細胞、CAL 39細胞、HCC366細胞
HSC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1105細胞、mIMCD-3細胞、NSH細胞
End1/E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero E6細胞、HECCL-1細胞、H1869細胞
SKNBE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C17細胞、ECV細胞、JiyoyeP-2003細胞
HCT 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS42細胞、P-388D1細胞、WEHI 231細胞
Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 12細胞、NCI-H810細胞、Hs 578.T細胞
Murine Lung Epithelial-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-10細胞、JEG3細胞、HBVP細胞
EC9706細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EA hy 926細胞、COR-L 105細胞、McA-RH 8994細胞
RGM1 epithelioid cells大鼠正常胃黏膜上皮細胞系
A375細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LOUNH91細胞、NTC-200細胞、Lewis Lung Cancer細胞
COS7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3 cl. A31細胞、HR1K細胞、Vx2細胞
DMS153細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-9細胞、NCI-H1819細胞、SK-Mel1細胞
HEC-151細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepG2-luc細胞、H358細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞
RPE D407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115F細胞、MGHU3細胞、SW-480細胞
R-1059-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DanG細胞、C41細胞、RBL-1細胞
R-1059-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DanG細胞、C41細胞、RBL-1細胞
SKMEL28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 05.04細胞、Pt K1細胞、PC3M-1E8細胞
Tn5 B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL51細胞、UCLA-RO 81細胞、B-3細胞
CAL120細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR90細胞、OCILY-19細胞、RK-13細胞
Mink Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1915細胞、HCC-44細胞、LNCaP clone FGC細胞
SN12C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H727細胞、D283-MED細胞、TJ905細胞
S91細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM192細胞、Walker-256細胞、MDAMB134細胞
MV3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE7細胞、IHH-4細胞、RD-2細胞
H4IIEC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞、MM1-S細胞、HCC2108細胞
HT144細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-4.2細胞、COLO829細胞、HEK 293-H細胞
CATH-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M210B4細胞、HCFB(HCF)細胞、Hs-688A-T細胞
HECCL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K422細胞、OK細胞、H-1694細胞
Y-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞、Panc4.03細胞、HEC251細胞
SKRC20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32 mel細胞、SV40-HCEC細胞、CCD-112CoN細胞
UACC-893細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGC27細胞、NCIH810細胞、NB19細胞
HGSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE12細胞、RC92A細胞、NCI H82細胞
CATHa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMB17細胞、GM 637細胞、GM 637細胞
MPC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-HSR細胞、CCRF.CEM細胞、H-2052細胞
Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MES1細胞、P3.653細胞、Human Embryonic Skin細胞
NCTC-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1417細胞、HGSMC細胞、HO8910PM細胞
RT-BM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL6細胞、H-740細胞、OKAC1細胞
HO-8910細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2081細胞、LA-795細胞、SUM159PT細胞
GES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCET細胞、PC-14細胞、GI-1細胞
OCI Ly1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1437細胞、P3X63 Ag8.653細胞、SUDHL-2細胞
HuH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-8細胞、DHL10細胞、NCI-H2291細胞
HEP-3B2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE-2Z細胞、OCLY8細胞、KMM-1細胞
Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC VII細胞、OCI/AML5細胞、MONO-MAC 6細胞
RT-BM 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B95.8細胞、SK MEL-28細胞、CemT4細胞
SK-RC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT 26細胞、L 1210細胞、TE 32.T細胞
EB-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1783細胞、SK-NM-C細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞
Hs281T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBdSMC細胞、T9細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞
H1666_DA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RK13細胞、NCI-SNU-387細胞、ARO細胞
H1666_DA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RK13細胞、NCI-SNU-387細胞、ARO細胞
CEM T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL5細胞、Douglas Foster-1細胞、NPA 87細胞
LAN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH460細胞、KMM1細胞、BTI-Tn5B14細胞
NCI H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF-21細胞、Human podocyte細胞、TE671/RD細胞
MV(4;11)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC12(高分化)細胞、WISH細胞、451-LU細胞
MB49細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOC細胞、SF-763細胞、Mhh-Call 2細胞
SY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DBTRG-05MG細胞、BHT-101細胞、TE11細胞
Reh細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA922細胞、BT-474細胞、FHs74 Int細胞
PG-4 S+L-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLMVEC細胞、SW-780細胞、HSC-3細胞
Caki2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2C細胞、OKT 3細胞、CAL-78細胞
OCI-Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m 14B細胞、Hs 578T細胞、P388.D1細胞
TCMK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT.64細胞、OCI Ly1細胞、H-23細胞
MAntle cell VERona-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL88細胞、PASMCS細胞、Tu686細胞
RGM1 epithelioid cells大鼠正常胃黏膜上皮細胞系
IPECJ2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOC-20細胞、CAL-12T細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞
OCM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTV-1細胞、HEK 293-F細胞、HuP-T4細胞
COV434細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRS-82細胞、HT 1197.T細胞、SUM190細胞
B16/F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_05_04細胞、Nakata-1細胞、SKNAS細胞
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