"Sp2/mIL-6 Cell:小鼠骨髓瘤B淋巴細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:懸浮
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
BEL7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GDM1細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞、CAL33細(xì)胞
PSN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJ1細(xì)胞、NB-19細(xì)胞、293E細(xì)胞
SMMC7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLA4Ig-24細(xì)胞、C-6細(xì)胞、GM07404細(xì)胞
H4-II-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hmy.2 CIR細(xì)胞、PANC 203細(xì)胞、624細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Sp2/mIL-6 Cell:小鼠骨髓瘤B淋巴細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時消化的問題:可以這樣說,對于需要消化傳代的細(xì)胞,每一次的消化都是對這個細(xì)胞存活與否,狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非??隙ǖ卣f,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細(xì)胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細(xì)胞消化同樣的時間對細(xì)胞是不公平的,他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進(jìn)行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。(以難消化細(xì)胞為例);具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍,(這是前奏,即為步,目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了。)3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(你也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比。)這是第三步。4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,呵呵。繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細(xì)胞間隙明顯,細(xì)胞獨(dú)立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實(shí)際情況你自己把握)。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步,對于特別難消化的細(xì)胞和對胰酶特別敏感的細(xì)胞的話,你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài),更漂亮的樣子,沒辦法,你必須分多批多次消化,這樣才能限度地將胰酶對細(xì)胞的損傷降到最低,保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了,如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞,像RAW264.7,僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細(xì)胞時把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較,去摸索好細(xì)胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步,除了是為了避免胰酶對細(xì)胞的損傷之外,還有一個更重要的作用就是,可以程度地把細(xì)胞吹打成單個單個的狀態(tài),不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當(dāng)一個細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
GM03569D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO-211H細(xì)胞、MDA MB 175 VII細(xì)胞、HL-60 clone15細(xì)胞
NCIH810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2126細(xì)胞、NFHIOSE-29細(xì)胞、LS513細(xì)胞
MFE 296細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK UT 1細(xì)胞、RPMI-7666細(xì)胞、NCI-SNU-1040細(xì)胞
D-324 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-182細(xì)胞、HCT-116細(xì)胞、H2066細(xì)胞
PaTu 8988 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 02細(xì)胞、PLC細(xì)胞、NCTC clone 929細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:懸浮生長
Sp2/mIL-6 Cell:小鼠骨髓瘤B淋巴細(xì)胞系
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞形態(tài)特性:淋巴母細(xì)胞樣
NCIH2009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FD-LSC-1細(xì)胞、CCD1095Sk細(xì)胞、CT26.WT細(xì)胞
KRC/Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM5細(xì)胞、GT1-1細(xì)胞、P31/FUJ細(xì)胞
H-209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J-BV細(xì)胞、UCLA RO-81A-1細(xì)胞、KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞
NCI-HUT-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKUT1細(xì)胞、Karpas 299細(xì)胞、H596細(xì)胞
SW-1783細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRhK4細(xì)胞、CHOK1細(xì)胞、U14細(xì)胞
MCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-36細(xì)胞、C3H 10T1/2細(xì)胞、MFE280細(xì)胞
RBSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-C4-2細(xì)胞、MDA MB231細(xì)胞、HFT 8810細(xì)胞
Sp2/mIL-6 Cell:小鼠骨髓瘤B淋巴細(xì)胞系
Ca759細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:130T細(xì)胞、C3H10T1/2CL8細(xì)胞、OAC-P4C細(xì)胞
WTRL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AAV-293細(xì)胞、H-920細(xì)胞、DanG細(xì)胞
OVISE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954BL細(xì)胞、H2087細(xì)胞、HM細(xì)胞
MV4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞、LICR-HN6細(xì)胞、PA1細(xì)胞
H4-II-EC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-190細(xì)胞、SKRC-20細(xì)胞、T241細(xì)胞
H-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK2 (E6/E7)細(xì)胞、E304細(xì)胞、NCI-H1048細(xì)胞
TE9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03569細(xì)胞、NCIH838細(xì)胞、RPMI-6666細(xì)胞
H1650_CO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNGM細(xì)胞、SW948細(xì)胞、H295R細(xì)胞
H35 Reuber細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞、RN細(xì)胞、MMAc-SF細(xì)胞
16-HBE14o細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12-PM6細(xì)胞、HEC1-B細(xì)胞、P-388D1細(xì)胞
Sp2/0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1623細(xì)胞、LS180細(xì)胞、NCIH187細(xì)胞
LC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAa細(xì)胞、EA. hy 926細(xì)胞、AN3 CA細(xì)胞
HCA 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-292細(xì)胞、GC1-SPG細(xì)胞、AR4-IP細(xì)胞
M059J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞、RPE D407細(xì)胞、CFSC-8B細(xì)胞
Human Kidney-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1975細(xì)胞、B16-F10細(xì)胞、H-1876細(xì)胞
A-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD 2細(xì)胞、IOSE 29細(xì)胞、ETCC-007細(xì)胞
ROS1728細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T_T_細(xì)胞、SW962細(xì)胞、SW 954細(xì)胞
Simpson細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RERFLCMS細(xì)胞、TE-9細(xì)胞、UMRC-2細(xì)胞
CAL 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1S細(xì)胞、NCI-H1522細(xì)胞、MMAc.SF細(xì)胞
SU86_86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL-I細(xì)胞、Melan-a細(xì)胞、L-Wnt3A細(xì)胞
SKHEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat 1細(xì)胞、Human Liver-7702細(xì)胞、KHYG1細(xì)胞
NTera 2/cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1155細(xì)胞、OVCAR432細(xì)胞、ssMCF-7細(xì)胞
Nthy-ori 3.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL 1-5細(xì)胞、LLC-PK(1)細(xì)胞、IPEC1細(xì)胞
3LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-22細(xì)胞、PA-TU S細(xì)胞、SH-SY5Y Parental細(xì)胞
DC 2.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:526細(xì)胞、HFLS-OA細(xì)胞、NBL-S細(xì)胞
CNE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE33細(xì)胞、KMS-11細(xì)胞、HEK-293細(xì)胞
AtT20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138MG細(xì)胞、HS-766T細(xì)胞、PA12細(xì)胞
A2780S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE-33細(xì)胞、3T3 clone A31細(xì)胞、WSU-DLCL2細(xì)胞
CMT 64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGBC11T細(xì)胞、M20 [Human melanoma]細(xì)胞、NEC8細(xì)胞
Human Kidney-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1975細(xì)胞、B16-F10細(xì)胞、H-1876細(xì)胞
SW 1088細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera2/D1細(xì)胞、Hs888T細(xì)胞、ECV 304細(xì)胞
SNU-119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL7702細(xì)胞、IBRS2細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞
SKNEP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138MG細(xì)胞、U14細(xì)胞、BIC1細(xì)胞
NE1-E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU668細(xì)胞、H-1105細(xì)胞、MOLT 4細(xì)胞
C-28I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPPVEC細(xì)胞、H-1650細(xì)胞、NCI-H1993細(xì)胞
PanC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TB1 Lu細(xì)胞、OLN-93細(xì)胞、M-20細(xì)胞
KATO III細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES 23.5細(xì)胞、PLC8024細(xì)胞、TGW-I-nu細(xì)胞
HCC-1171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-10A細(xì)胞、LNCaP.FGC細(xì)胞、FDC-P1細(xì)胞
RCC23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 929細(xì)胞、BHK-21細(xì)胞、HCC-1438細(xì)胞
GC1-SPG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SaOS-2細(xì)胞、SUM149-PT細(xì)胞、H-1048細(xì)胞
CAL 120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1.K細(xì)胞、D562細(xì)胞、MRC9細(xì)胞
SP2/0 Ag-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cloudman S91 melanoma細(xì)胞、KTA7細(xì)胞、Psi-2-DAP細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-869細(xì)胞、SK-Col-1細(xì)胞、D341細(xì)胞
Sp2/mIL-6 Cell:小鼠骨髓瘤B淋巴細(xì)胞系
SW 1088細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera2/D1細(xì)胞、Hs888T細(xì)胞、ECV 304細(xì)胞
HPAFII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC-1細(xì)胞、SKG-3a細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細(xì)胞
SNU-368細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML12細(xì)胞、MS 751細(xì)胞、5-8F細(xì)胞
HCV 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly19細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞、OSRC2細(xì)胞
Hepatoma 22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03190A細(xì)胞、NCI-H1563細(xì)胞、OCILY-19細(xì)胞
HCC1954BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HA1800細(xì)胞、S-16細(xì)胞、LOU-NH-91細(xì)胞
MES-SA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-12A細(xì)胞、SUNE 1細(xì)胞、6-10B細(xì)胞
JTC-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H460細(xì)胞、OS-RC-2細(xì)胞、MOLT-4細(xì)胞
LK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H3396細(xì)胞、PaTu 8988 S細(xì)胞、PC-3M 2B4細(xì)胞
Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono Mac 6細(xì)胞、HOS-MNNG細(xì)胞、LN-229細(xì)胞
ST 486細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEC-B4G12細(xì)胞、KLN 205細(xì)胞、BMF細(xì)胞
RAMSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H920細(xì)胞、NHA細(xì)胞、SBC5細(xì)胞
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