"CA46 Cell:人burkitt淋巴瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：懸浮
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞源自Burkitt＇s淋巴瘤患者的B淋巴細(xì)胞，EBNA、Fc陰性。
HCAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH522細(xì)胞、H.Ep.-2細(xì)胞、PLC細(xì)胞
GM00637F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMD-8細(xì)胞、H766T細(xì)胞、X63-Ag8細(xì)胞
HSC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-578-T細(xì)胞、EPC細(xì)胞、MPC-11細(xì)胞
NCI-H719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca 9-22細(xì)胞、HLEC細(xì)胞、JG細(xì)胞
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
CA46 Cell:人burkitt淋巴瘤細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問題：可以這樣說，對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個(gè)問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長(zhǎng)的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來越差勁了。對(duì)于這個(gè)問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長(zhǎng)越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問題就是，細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭(zhēng)取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰(shuí)長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對(duì)比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細(xì)胞對(duì)胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷之外，還有一個(gè)更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài)，不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞凍存的步驟：１)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇；３)將分裝上述細(xì)胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
KBM-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BPH-1細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞、Oregon J-111細(xì)胞
Hs 840.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT-2細(xì)胞、HCC-2279細(xì)胞、Human Liver-7702細(xì)胞
KYSE-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK/293細(xì)胞、NCI-H82細(xì)胞、Nthy-ori 3.1細(xì)胞
KYSE70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TF-1細(xì)胞、H-1838細(xì)胞、52PE細(xì)胞
HS-683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori3細(xì)胞、OK-WT細(xì)胞、HCC 38細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)
CA46 Cell:人burkitt淋巴瘤細(xì)胞系
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)：體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞，并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營(yíng)養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細(xì)胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中，細(xì)胞培增３～６次。細(xì)胞傳代后，一般經(jīng)過三個(gè)階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度，即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/１００個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細(xì)胞可達(dá)３～５％；細(xì)胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時(shí)期，稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期)，適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟：１.將長(zhǎng)成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞，如果細(xì)胞變圓，相互之間不再連接成片，這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細(xì)胞懸液。３.將細(xì)胞懸液吸出２ml左右，加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細(xì)胞在２小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層，需要再次進(jìn)行傳代。
細(xì)胞形態(tài)特性：淋巴母細(xì)胞樣
3T3-442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-MeWo細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞、RKO-AS45-1細(xì)胞
GM2132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 841 CoTr細(xì)胞、H2347細(xì)胞、WEHI-3細(xì)胞
DrG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1373細(xì)胞、OAW42細(xì)胞、JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞
HA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS/MNNG細(xì)胞、UCW 100細(xì)胞、SCC VII細(xì)胞
786-O RCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA 560細(xì)胞、Murine Carcinoma-38細(xì)胞、VK2/E6E7細(xì)胞
NCIH295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TI-73細(xì)胞、NCIH1755細(xì)胞、NCI-H2591細(xì)胞
GM03570E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-2細(xì)胞、WM-239A細(xì)胞、Lu-165細(xì)胞
CA46 Cell:人burkitt淋巴瘤細(xì)胞系
HCC-1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMECs細(xì)胞、P3-X63Ag8細(xì)胞、EST50細(xì)胞
DMS114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2細(xì)胞、Nb 2細(xì)胞、HCC-9204細(xì)胞
Astrocyte type I clone細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-1細(xì)胞、H2.35細(xì)胞、SHI1細(xì)胞
K7M2-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW.620細(xì)胞、CMT93細(xì)胞、SCL-I細(xì)胞
Anip-973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D 407細(xì)胞、HR-8348細(xì)胞、RKOE6細(xì)胞
GA10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-322細(xì)胞、HCT116/L細(xì)胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞
hTERT RPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY-7703細(xì)胞、CCRFCEM細(xì)胞、G519細(xì)胞
HS 445T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA.MB.435細(xì)胞、PK15細(xì)胞、L-cells細(xì)胞
C2BBe 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-510細(xì)胞、Hepa-RG細(xì)胞、130T細(xì)胞
C2BBe 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-510細(xì)胞、Hepa-RG細(xì)胞、130T細(xì)胞
HEK293T/17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNSH細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞、SUM149PT細(xì)胞
H-226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSC96細(xì)胞、CAL 62細(xì)胞、NCI-H28細(xì)胞
SNU251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 513細(xì)胞、L-Wnt-3A細(xì)胞、AN3-CA細(xì)胞
CCC-ESF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1781細(xì)胞、Namalwa細(xì)胞、MB231細(xì)胞
SKG-3a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TALL1細(xì)胞、NIT-1細(xì)胞、Hs 604.T細(xì)胞
NCIH1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-10A細(xì)胞、Hs 683細(xì)胞、A-172MG細(xì)胞
CAL-148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J-Bladder-V細(xì)胞、T-47-D細(xì)胞、COLO680N細(xì)胞
hADSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CLONE M3細(xì)胞、MESSA Dx5細(xì)胞、J82COT細(xì)胞
HPASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW780細(xì)胞、Hs-600-T細(xì)胞、PAMC82細(xì)胞
AU-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-AS45-1細(xì)胞、B 95-8細(xì)胞、NCI-157細(xì)胞
SCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞、4175細(xì)胞、TFK-1細(xì)胞
H-2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：rUCMSCs細(xì)胞、HDQP1細(xì)胞、H-1688細(xì)胞
SNU-182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-104細(xì)胞、Hep 3B細(xì)胞、MDA-MB-175細(xì)胞
HEK-293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32Dcl3細(xì)胞、Bac 1.2F5細(xì)胞、BALB/3T3 clone A31細(xì)胞
MDA-MB-231-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ細(xì)胞、LuCL4細(xì)胞、BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞
MESSADX5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MALME 3M細(xì)胞、CHL/IU細(xì)胞、P3-X63.Ag8.653細(xì)胞
TFK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ID8細(xì)胞、H520細(xì)胞、HCC1143細(xì)胞
751-NA-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA-560細(xì)胞、SW 480細(xì)胞、KYSE 70細(xì)胞
J774.A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS114細(xì)胞、UMR 106細(xì)胞、RGC-6細(xì)胞
Hs-578T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV411細(xì)胞、SGC-996細(xì)胞、H-2126細(xì)胞
Mel-RM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB436細(xì)胞、DR2R1610細(xì)胞、SCC 4細(xì)胞
HCC-1833細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞、Panc 5.04細(xì)胞、HOCF細(xì)胞
OVCA420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H 9細(xì)胞、MGH-U1細(xì)胞、CEM-CCRF細(xì)胞
WEHI 231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn 5B1-4細(xì)胞、H1793細(xì)胞、H647細(xì)胞
LN382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：526mel細(xì)胞、PL5細(xì)胞、GC1-SPG細(xì)胞
HLEC-SRA 01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs675細(xì)胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞、Hs940.T細(xì)胞
COR L279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-1細(xì)胞、BLO 11細(xì)胞、MDA-157細(xì)胞
HCC202細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKM1細(xì)胞、WEHI 164 TC細(xì)胞、SUDHL16細(xì)胞
TE-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NGEC細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、SUPB-15細(xì)胞
HOPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC-893細(xì)胞、Normal Rat Kidney細(xì)胞、H209細(xì)胞
RH8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVGp12細(xì)胞、Opossum Kidney細(xì)胞、NCI-H3255細(xì)胞
HS-68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1438細(xì)胞、CCD-112 CoN細(xì)胞、ChaGo-K-1細(xì)胞
X63-AG 8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-5細(xì)胞、OVCAR433細(xì)胞、H-157細(xì)胞
CA46 Cell:人burkitt淋巴瘤細(xì)胞系
SF-126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGSMC細(xì)胞、OCIAML2細(xì)胞、Lu-99A細(xì)胞
CAL120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR90細(xì)胞、OCILY-19細(xì)胞、RK-13細(xì)胞
MCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-36細(xì)胞、C3H 10T1/2細(xì)胞、MFE280細(xì)胞
UCLA-RO 81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-14細(xì)胞、HTori:3細(xì)胞、MDA.MB.231細(xì)胞
H-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞、ZR751細(xì)胞、NCI-H661細(xì)胞
ANA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-127細(xì)胞、KBM7細(xì)胞、H-2081細(xì)胞
NCIH727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-N87細(xì)胞、TN5B14細(xì)胞、SW1573細(xì)胞
MB 157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC090細(xì)胞、Z-138細(xì)胞、Hepatoma 22細(xì)胞
TF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chang liver細(xì)胞、Alexander cells細(xì)胞、hTERT RPE1細(xì)胞
Hs863T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1836細(xì)胞、LC-1細(xì)胞、RDES-1細(xì)胞
Hu-P-T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM1細(xì)胞、NCI-H28細(xì)胞、526mel細(xì)胞
NCI/ADRRES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：118 MG細(xì)胞、KE-37細(xì)胞、SW 900細(xì)胞
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