"MUS-M1 Cell:小鼠小腸平滑肌細胞系
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:小腸;平滑肌
CA 46細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D283 Med細胞、WERI-Rb 1細胞、Colo741細胞
ZYM-DIEC02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPaSteC(HPSC)細胞、RPPVEC細胞、NL20SV細胞
MA-782細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKT細胞、AR41P細胞、UCLA SO M14細胞
2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293A細胞、rUCMSCs細胞、NCM460細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
MUS-M1 Cell:小鼠小腸平滑肌細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細胞都是要成片生長的,尤其是對于貼壁細胞,單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話,傳代后細胞是不能貼壁的,這樣抱團的細胞就會死亡。所以,消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài),這個啊是非??季磕愕墓Ψ虻模〖毎坏┟撀淙霊乙豪锬愫茈y再將他吹打成單個,因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開,受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-2細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到70%左右的時候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞,你在洗的時候如果是用無血清1640去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多,還會后續(xù)更新。再補充一點:傳代時PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長的時間,等到細胞一個個分離開來的時候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時間,不能時間太過了,要不然損傷細胞,細胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候,或者臨時沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細胞。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HPDE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC2細胞、CTSC-3細胞、P3X63 AG 8.653細胞
NG108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRAEC細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞、AA-Mel細胞
J45.01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-87細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、KYSE0030細胞
C22 (Clara)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-192C細胞、HCC1833細胞、NCI/ADRRES細胞
Cor L51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-3細胞、8305C細胞、MeSoTheliOma-211H細胞
細胞生長特性:貼壁
MUS-M1 Cell:小鼠小腸平滑肌細胞系
細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
GMK,BSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 85 ClF-5細胞、HEK-AD293細胞、HARA-B細胞
Nb-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C666-1細胞、SK MEL 5細胞、CL40細胞
MOVAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM159PT細胞、KHYG細胞、M-O7e細胞
MMQ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Potorous tridactylus Kidney 2細胞、PANC0504細胞、EBTr (NBL-4)細胞
H-1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A1847細胞、MDBK (NBL-1)細胞、D-341Med細胞
Ramos-2G6-4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT 549細胞、PANC0327細胞、COS7細胞
NPA87-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 52PE細胞、Y3細胞、HT 1376細胞
MUS-M1 Cell:小鼠小腸平滑肌細胞系
P3.times.63 Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-520細胞、NCI.H460細胞、MM1-S細胞
PCI-4B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GDM-1細胞、NUGC4細胞、HUT125細胞
TE-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MEL 28細胞、MFC細胞、REC-1細胞
ACC-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF10-A細胞、NFS60細胞、HN13細胞
WM-239細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8D1A細胞、Kit 225-K6細胞、2PK3細胞
NCIH1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-451Lu細胞、HUT-125細胞、OVCAR 433細胞
Hs840_T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIXC002細胞、578T細胞、EoL-1 cell細胞
HCC366細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-363細胞、KYSE70細胞、GM00637H細胞
HCC 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC1469細胞、Ku812細胞、NCI-H2171細胞
FC33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MonoMac1細胞、HEK-A細胞、AM38細胞
NBL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1 sq細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、KU19-19細胞
NCI-H889細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 88 D1細胞、MCF.10A細胞、BCAP37細胞
GM637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly19細胞、DMS273細胞、H865細胞
C-127細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McARH7777細胞、TOV112細胞、BPH-1細胞
Ly1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞、Sp2/0細胞、NCIH847細胞
RPE D407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115F細胞、MGHU3細胞、SW-480細胞
MDA-MB 468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373細胞、SKMEL5細胞、ARPE19細胞
GM03569B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1819細胞、HCC1588細胞、MOLT 3細胞
Namalwa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 253細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞、Mc Ardle 7777細胞
C32r細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB19細胞、HEI193細胞、SF763細胞
Y3-Ag 1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:0V-1063細胞、DU_145細胞、ECC-10細胞
HCT-8/V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DR2R 1610細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、TCCSUP細胞
PLB-985細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H676細胞、CAL 12細胞、KMH2細胞
MCA38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-hth74細胞、DMS 273細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞
LoVo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 270細胞、SNU878細胞、NCI-H1105細胞
Rainbow Trout Embryo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupB15W細胞、BOWES細胞、TOG細胞
NCIH1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P 815細胞、NCI H345細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞
H-596細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-661細胞、CAL62細胞、Tb1Lu細胞
OCI/AML-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDST8細胞、293FT細胞、He La細胞
BT-325細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU601細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NCI-H87細胞
PA12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R-1059-D細胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細胞、EMT-6細胞
MuM-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG細胞、KYSE 70細胞、CL34細胞
Hs895.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMU-S1細胞、D10細胞、H1395細胞
Line 522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4IIEC3細胞、F442-A細胞、hMSC-BM細胞
H-358細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M細胞、H-2126細胞、MG-63細胞
VMRC-RCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-839細胞、H-358細胞、Panc02.03細胞
HCT 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS42細胞、P-388D1細胞、WEHI 231細胞
SUDHL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly19細胞、N1E115細胞、GM05887細胞
SW 1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OB2細胞、SKMEL1細胞、U-2 OS細胞
SEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-a2細胞、OC-3-VGH細胞、WM115細胞
PANC0403細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-540細胞、RGE細胞、A704細胞
LCLC103H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-S細胞、OAC-P4C細胞、MDA-MB-134細胞
BHT-101細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO211H細胞、DV-90細胞、JeKo 1細胞
MUS-M1 Cell:小鼠小腸平滑肌細胞系
E.L.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL9217細胞、HEL299細胞、SVHUC細胞
Hep2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-660細胞、hFOB1.19細胞、LICR-LON-HN6-R細胞
NCIH2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCECs細胞、L23/P細胞、ECC1細胞
LICR-HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK10a細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、T-ALL 1細胞
MDAMB415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293F細胞、SCL-I細胞、MDA436細胞
C-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC9細胞、JIMT細胞、GM-637細胞
Hs 578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-AS細胞、F98細胞、WM 239-A細胞
HCC-2935細胞系相關(guān)產(chǎn)品:746T細胞、MOLT4細胞、253JBV細胞
V79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCKII-WT細胞、SW-948細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞
HT 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC5細胞、H2171細胞、KYSE520細胞
TE-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MEL 28細胞、MFC細胞、REC-1細胞
Be-Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-022細胞、LN382細胞、CCK81細胞
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