"NCI-H1568 epithelioid cells人非小細胞肺癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當(dāng)會事。 N-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:108CC15細胞、Hs 895 T細胞、KYSE 520細胞 ACT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-2-Ad細胞、SW1990細胞、H1688細胞 SuDHL 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin-Darby Canine Kidney細胞、CATHa細胞、SK-MEL 28細胞 細胞生長:貼壁 NCI-H1568 epithelioid cells人非小細胞肺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞學(xué)在生命科學(xué)科中起著至關(guān)重要的作用,近年來細胞學(xué)蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進展,細胞實驗室的構(gòu)建也是各個院校生物學(xué)科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復(fù)雜,需要的實驗設(shè)備種類繁多,下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標(biāo)準(zhǔn)方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內(nèi)毒素直接參與細胞凋亡,血清中內(nèi)毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高,會直接導(dǎo)致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質(zhì)量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour,再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水浴:從液氮或超低溫冰箱中取出細胞凍存管需要立即放于37℃水浴中快速復(fù)蘇之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材:細胞實驗中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。 細胞傳代方法:1:3-1:6傳代;每周換液2-3次。 A-673細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2085細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、KG-1a細胞 VP 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-680N細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞、UM-UC3細胞 HITT15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE-1細胞、Lu-65細胞、HR-1細胞 SNUC2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu 8988 S細胞、H-727細胞、C-28/I2細胞 NCIH211細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-10細胞、MDA-361細胞、NCI-H740細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 NCI-H1568 epithelioid cells人非小細胞肺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 OCI-LY-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-251細胞、SK-ES-1細胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞 WEHI164細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS 13細胞、BL2141細胞、HCC0202細胞 U 138 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375-MEL細胞、R-1059-D細胞、32D-Cl3細胞 Hs675細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1755細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞、Panc 1細胞 C3H 10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA 46細胞、H2126細胞、HCC44細胞 Fortner's melanotic melanoma #3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4I細胞、AR4-IP細胞、NCI-H2347細胞 HCC1588細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-211細胞、MDA-kb2細胞、H-3255細胞 PLCPRF5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-II細胞、QBC939細胞、L929(NCTC)細胞 130 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2106細胞、3396細胞、MDAMB231細胞 MIN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC090細胞、DCS細胞、Caov-4細胞 NCI-H1568 epithelioid cells人非小細胞肺癌細胞系 ROS17/28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Immortalized Human Hepatocytes細胞、MC57G細胞、IGROV-1細胞 PTK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIII細胞、OVCAR3細胞、MDA-MB-435 S細胞 DoTc2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 688(A).T細胞、FU-OV-1細胞、MV4:11細胞 HCC1954-BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-A細胞、SK-MEL-3細胞、MyLa 2059細胞 M-NFS-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC-2細胞、EOL1細胞、Caco-2 BBe細胞 MC/9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A7r5細胞、H-1355細胞、CMEC/D3細胞 HIBEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293A細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞、H2107細胞 Dami細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1954細胞、SK-NMC細胞、U-138MG細胞 MOLM16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:16-HBE14o細胞、CEM-CCRF細胞、HSF細胞 HConEpic細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero 76 clone E-6細胞、KP-N-RT細胞、NCIH929細胞 SH-SY5Y Parental細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-70細胞、YD38細胞、Calu6細胞 HIEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 600.T細胞、DoHH-2細胞、CCRF.CEM細胞 NCI-H292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FC33細胞、GM04671細胞、Eca-109細胞 H-358細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M細胞、H-2126細胞、MG-63細胞 alpha-TC1.6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Line 522細胞、MV 4;11細胞、Leydig細胞 NCI-H187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCK8細胞、Y 1細胞、HEK-293H細胞 MDA435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-3細胞、MFE280細胞、JEG3細胞 Hs683T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1836細胞、PBL細胞、HTori3細胞 AN-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373MG細胞、COLO 320細胞、HCM細胞 AU-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO-AS45-1細胞、B 95-8細胞、NCI-157細胞 MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY10細胞、RCC23細胞、CRFK細胞 Daudi細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 837細胞、SK-Mel 1細胞、NKM1細胞 GBCSD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vx2細胞、IGROV細胞、Hs 274.T細胞 SNU-484細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T.T細胞、KTC-1細胞、EBNA293細胞 U-373 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-132細胞、Huh7.5.1細胞、GS9L細胞 HO8910PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGBC-11-TKB細胞、SK.MEL.5細胞、NCI-H220細胞 HOS(TE85)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HAVSMC細胞、NCI-841細胞、NCIH2347細胞 PLA801-95D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJSA細胞、Panc05.04細胞、MPC 11細胞 MCF12A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EST50細胞、NCI-SNU-C2B細胞、GC-2細胞 RINm-5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan-2細胞、NCIH1781細胞、hs 68細胞 OVCA5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-10-05細胞、ML2細胞、MDA-MB-134-VI細胞 GLRK 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IB-RS-2細胞、RCC_7860細胞、67NR細胞 TN5B14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4;11細胞、SKES-1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞 OK-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BBE細胞、AML-193細胞、PLA-801C細胞 CAMA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Microglia Clone 3細胞、PC3M-IE8細胞、WERI細胞 Duke University 4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-190PT細胞、EM3細胞、CMT64細胞 HMEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-sm 1細胞、PCI-4B細胞、MDA-MB-134 VI細胞 KMS26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kuramochi細胞、NCI-441細胞、3T3 Swiss Albino細胞 KOSC-2 cl3-43細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu6細胞、MDCC-MSB1細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞 SHEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-39細胞、Panc-08.13細胞、Hs940T細胞 KP-N-YN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-954細胞、Bovine ENDometrial cells細胞、COV504細胞 BIC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1563細胞、Adeno 293細胞、Panc-3_27細胞 Hi-five細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh-74細胞、CAL851細胞、NCIH211細胞 M109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JAR細胞、RGC5細胞、Hs895.T細胞 UCLA NPA871細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MADB106細胞、A2780 CP70細胞、MDAMB361細胞 MDA-MB-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM/0細胞、MRASMC細胞、SCC090細胞 MDA231-LM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H716細胞、MA-782細胞、Reuber H-35細胞 HEC-1-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-DLCL2細胞、U-87 MG細胞、Ramos.2G6.4C10細胞 Verda reno細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、H9c2(2-1)細胞、KG1A細胞 SU86.86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2D1細胞、BIC細胞、H-1435細胞 HLMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 7細胞、ML-2細胞、HPaSteC(HPSC)細胞 NCI-H1568 epithelioid cells人非小細胞肺癌細胞系 TE10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V-79-4細胞、GM12878細胞、MPC5細胞 NCI H508細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB9細胞、EOC 20細胞、H-1838細胞 QGY7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U343細胞、H1651細胞、NCI-BL1339細胞 U 138 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375-MEL細胞、H28細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞 "
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