"ACHN epithelioid cells人腎細胞腺癌細胞系 細胞背景資料:該細胞1979年建系,源自一名22歲患有腎細胞腺癌的白人男性的胸腔積液。干擾素可抑制該細胞的生長,該細胞多用于干擾素及其誘導(dǎo)劑的抗增殖研究。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。 NCIH1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J45.01細胞、293 F細胞、Kasumi 1細胞 mousepodocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HH [Human lymphoma]細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、MCA-38細胞 CHL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-03.27細胞、MALME.3M細胞、SUDHL-8細胞 細胞生長:貼壁 ACHN epithelioid cells人腎細胞腺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴,浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養(yǎng)液,吹打使細胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細胞時,處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請立即通知細胞實驗室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細胞回溫至37°C,并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中,或細胞已長滿盤,則將細胞做傳代培養(yǎng)。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代,每周2-3次。 NPA 87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6TG細胞、32Dcl3細胞、Swiss 3T3細胞 SKES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison 109細胞、Hs819.T細胞、HONE1細胞 751細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NEP-1細胞、H-1792細胞、RIN-14B細胞 HCC-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H358細胞、RPMC細胞、L-Wnt-3A細胞 MV-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 102細胞、451-LU細胞、Caki2細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 ACHN epithelioid cells人腎細胞腺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣 培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。 PSN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVEC4-10細胞、TOV21G細胞、DiFi細胞 H-1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM-1細胞、3T3NIH細胞、HBL-100細胞 H-647細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit225/K6細胞、P3X63 AG 8.653細胞、NRK49F細胞 CAL 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK2細胞、HO8910/PM細胞、IPLB-SF 21細胞 SW-1088細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMO-1細胞、C17細胞、PL45細胞 MCF7-CTRL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK HEP-1細胞、RS411細胞、Caco-2細胞 ID8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPI-2I細胞、RA 1細胞、FHs 74 Int細胞 KB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-ALL1細胞、H-2171細胞、SUM-159PT細胞 GM03571細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Rhesus Kidney-4細胞、HCC-1395細胞、SU86.86細胞 NCI-H196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIE-115細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、L615細胞 ACHN epithelioid cells人腎細胞腺癌細胞系 H-1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNB.19細胞、H-35細胞、Rat 2細胞 TE-32細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-Jiyoye細胞、hTERT-RPE細胞、EVSAT細胞 HEP-3B2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE-2Z細胞、OCLY8細胞、KMM-1細胞 HTori3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM637A細胞、MDA330細胞、P30/Ohkubo細胞 Mel-MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UK Pan-1細胞、K562細胞、P3HR1-BL細胞 MDA-MB-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE70細胞、MLA-144細胞、CTX TNA2細胞 MDA-MB-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE70細胞、MLA-144細胞、CTX TNA2細胞 Laboratory of Allergic Diseases 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-1細胞、Hep 3B2_1-7細胞、GM-215細胞 Mv1Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63-Ag8.653細胞、KU-812細胞、BIU-87細胞 KNS-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF-1細胞、SK-N-BE(2)細胞、MNNG/HOS細胞 Pa16C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F9細胞、Panc02-H0細胞、HO-8910 PM細胞 NUGC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEpiC細胞、IGROV-1細胞、TGW-nu-1細胞 MES-SA/Dx-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS1細胞、HEK 293T/17細胞、HSCT6細胞 130 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2106細胞、3396細胞、MDAMB231細胞 NCI-H2122細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R1610細胞、U-CH1細胞、HFL1細胞 U-373-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC 3T3-E1細胞、WSU-DLCL-2細胞、PANC0327細胞 LADMAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TO175T細胞、MRC 5細胞、FHCRC subclone 11細胞 SK MEL-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv 1 Lu細胞、SK-ChA1細胞、RGCs細胞 HRA 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NCI-H2444細胞、L02細胞 NCI.H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4 (S+L-)細胞、GM03573A細胞、NS1-1 Ag4.1細胞 SKNBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PZ-HPV-7細胞、L-132細胞、H-446細胞 NH-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE-2細胞、HS0578T細胞、SK-MES1細胞 A-875細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA-433細胞、Helacyton gartleri細胞、MIA Paca2細胞 Hs 683細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RDES細胞、Hs606細胞、HuH-6細胞 MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YH-13細胞、SLK細胞、NCIH1869細胞 HCT 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS42細胞、P-388D1細胞、WEHI 231細胞 Opossum Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK RC 52細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、NHA細胞 NCIH2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA-205細胞、KY-50細胞、HBMEC細胞 C3H10T1/2CL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNFI細胞、TE-15細胞、H-2073細胞 Mono Mac 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHP-10細胞、KE 37細胞、Leukemia 1210細胞 RASMCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2932細胞、JIMT1細胞、SKNBE2C細胞 H661細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABC1細胞、BHK21細胞、TSUpr1細胞 KFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YAC-1細胞、KYSE0030細胞、TK-10細胞 74Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-BM細胞、H-1581細胞、H6c7細胞 OV-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3JHR-1細胞、RK-13細胞、OK-WT細胞 EBC-1/original細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caki-2細胞、ACC-3細胞、AN-3細胞 PC-3/M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:184A1細胞、NCM356細胞、H1155細胞 Ramos.G6.C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-3T3細胞、ONS-76細胞、HUC細胞 Ramos.G6.C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-3T3細胞、ONS-76細胞、HUC細胞 H-292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI164細胞、PC3M細胞、NCI-H-128細胞 UCLA-RO 81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-14細胞、HTori:3細胞、MDA.MB.231細胞 GM12878細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM-12細胞、COR-L26細胞、HDLM2細胞 HuH-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-C7細胞、4-1st細胞、M-1 myeloid leukemia細胞 NCI-H1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK 1細胞、HuH-6細胞、P3/NS1/Ag4-1細胞 F-36P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepa 1-6細胞、NB9細胞、PLMVEC細胞 M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB-1細胞、COLO-320細胞、MDA-MB-435S細胞 RSC 96細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ej138細胞、SKMEL-31細胞、IEC 18細胞 Hce8693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-154細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞、CMT-167細胞 IOSE-Van細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM Cub 1細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞、HMO6細胞 KAT5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori-3.1細胞、MHH-CALL2細胞、H-1404細胞 MC3T3-E1(C4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHCRC subclone 11細胞、PC 61.5.3細胞、P388D1細胞 ACHN epithelioid cells人腎細胞腺癌細胞系 MHCCLM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0095細胞、H2110細胞、SNU-719細胞 MMQ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Potorous tridactylus Kidney 2細胞、FET細胞、CemT4細胞 MDA415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2135細胞、HEK-293-F細胞、SMA560細胞 H647細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-273細胞、HDQ-P1細胞、H-146細胞 "
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