"HuTu 80 epithelioid cells人十二指腸腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶?jī)?nèi)沒有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉! MZCRC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT-1A細(xì)胞、YD15細(xì)胞、HLF-a細(xì)胞 KBM-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY-50細(xì)胞、GS-9L細(xì)胞、SK-N-MC細(xì)胞 WM266mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepatoma-22細(xì)胞、HEK-293細(xì)胞、CEMC1細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 HuTu 80 epithelioid cells人十二指腸腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前,細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存:計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細(xì)胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以1×10(7)到5×10(7)細(xì)胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存:使用分離試劑從基層分離細(xì)胞,分離時(shí)盡可能溫和,使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細(xì)胞,確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以5×10(6)到1×10(6)細(xì)胞/ml密度,在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。 細(xì)胞傳代方法:1:2—1:5傳代,每周換液2-3次 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA87細(xì)胞、HT-144細(xì)胞、A875細(xì)胞 NCI-H735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA433細(xì)胞、MES-SA Dx5細(xì)胞、OsACL細(xì)胞 Ramos-2G6-4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT 549細(xì)胞、PANC0327細(xì)胞、COS7細(xì)胞 hTERT-HPNE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-8/ADR細(xì)胞、LUDLU1細(xì)胞、Lewis lung carcinoma細(xì)胞 L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293S細(xì)胞、A375mel細(xì)胞、H4IIEC3細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 HuTu 80 epithelioid cells人十二指腸腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 SK-N-DZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-1847細(xì)胞、EC109細(xì)胞、BEL 7405細(xì)胞 MKN-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H820細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞、HTh 74細(xì)胞 P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2444細(xì)胞、IR 983F細(xì)胞、LC1細(xì)胞 THLE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:7860細(xì)胞、SCC90細(xì)胞、SNK-6細(xì)胞 BEAS 2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2細(xì)胞、MM1.S細(xì)胞、NCI-HUT-125細(xì)胞 MADB 106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT FET細(xì)胞、KMS18細(xì)胞、KMS18細(xì)胞 Hs 611.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞、P3/X63-Ag8細(xì)胞、HPAF/CD18細(xì)胞 NPA87-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 52PE細(xì)胞、Y3細(xì)胞、HT 1376細(xì)胞 HANK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJAB-1細(xì)胞、HCT/FU細(xì)胞、SUP-B1細(xì)胞 EB2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CX1細(xì)胞、786O細(xì)胞、NCIH524細(xì)胞 HuTu 80 epithelioid cells人十二指腸腺癌細(xì)胞系 OVTOKO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-65細(xì)胞、Tn 5B1-4細(xì)胞、ketr 3細(xì)胞 ReNcell CX細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HM06.A1細(xì)胞、U251MG細(xì)胞、P3-x63-Ag8 653細(xì)胞 NCI-H1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCCSUP細(xì)胞、H1703細(xì)胞、LYR細(xì)胞 RPMI #8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:He La細(xì)胞、LICR-LON-HN6-R細(xì)胞、SKNBE-2細(xì)胞 CCD-1095Sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 9細(xì)胞、hFOB 1.19細(xì)胞、HCO細(xì)胞 SNU182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266細(xì)胞、CC-LP-1細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞 SNU182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266細(xì)胞、CC-LP-1細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞 SNU-668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mac-1細(xì)胞、EU-4細(xì)胞、NCI-H660細(xì)胞 Panc-8_13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUV-EC-C細(xì)胞、KMST6細(xì)胞、NCIH838細(xì)胞 beta TC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI1788細(xì)胞、HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞、STTG1細(xì)胞 Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH441細(xì)胞、T24(ECV304)細(xì)胞、H4-II-E-C3細(xì)胞 MES-SA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-12A細(xì)胞、SUNE 1細(xì)胞、6-10B細(xì)胞 Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1588細(xì)胞、MPC5細(xì)胞、SW-527細(xì)胞 MDAMB435S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2/BBe 1細(xì)胞、TOV21細(xì)胞、NCI-SNU-520細(xì)胞 UT7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEG01細(xì)胞、TE-671細(xì)胞、T/GHA-VSMC細(xì)胞 MEF (CF-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDE6c7細(xì)胞、RMG-I細(xì)胞、1301細(xì)胞 3T3-L1 ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283 Med細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞、H2009細(xì)胞 NCI-H345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOVAS-1細(xì)胞、MAC1細(xì)胞、K-1735細(xì)胞 Ketr3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRA19細(xì)胞、VE細(xì)胞、RPMI7666細(xì)胞 CD-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 melanoma F10細(xì)胞、NCIH1573細(xì)胞、RAEC細(xì)胞 10RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCM1A細(xì)胞、TKB-1細(xì)胞、CEM-T4細(xì)胞 JCA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-Hut 125細(xì)胞、Sp2/O細(xì)胞、H-64細(xì)胞 T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC.1細(xì)胞、H295R細(xì)胞、CNE2Z細(xì)胞 GM05887細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL.2H3細(xì)胞、H-209細(xì)胞、ZR75_1細(xì)胞 TC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMBC細(xì)胞、LC2/Ad細(xì)胞、A-72細(xì)胞 Namalva細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nakata-1細(xì)胞、FF-WT-BJ細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞 SK-Mel 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 683細(xì)胞、KYSE 140細(xì)胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞 H-1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD-2細(xì)胞、CHG-5細(xì)胞、HSC4細(xì)胞 JurkatE6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-256-TC細(xì)胞、NR8383.1細(xì)胞、28SC細(xì)胞 NCIH889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS180細(xì)胞、SK-HEP-1細(xì)胞、FHL 124細(xì)胞 U-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-WRC 256細(xì)胞、TE-12細(xì)胞、McArdle RH-7777細(xì)胞 C-8161細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLB-985細(xì)胞、BS-C-1細(xì)胞、SNU-423細(xì)胞 HS940細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_02_03細(xì)胞、Anip-973細(xì)胞、A-9細(xì)胞 ESC-410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS-143B細(xì)胞、FOXNY細(xì)胞、HANK-1細(xì)胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHEK細(xì)胞、T-HEECs細(xì)胞、SV40-MES13細(xì)胞 Pa017C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA802細(xì)胞、CWR22Rv1細(xì)胞、Li-7細(xì)胞 A-172 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-827細(xì)胞、COLO-824細(xì)胞、MEC1細(xì)胞 D341Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2405細(xì)胞、U20S細(xì)胞、MDA-MB-157細(xì)胞 MGHU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM2664細(xì)胞、MDA-MB-415細(xì)胞、RC-K8細(xì)胞 WM-266-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-966SK細(xì)胞、T-HSC細(xì)胞、MCF-7/ADR-RES細(xì)胞 MDA-MB-134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA432細(xì)胞、Tu212細(xì)胞、624-mel細(xì)胞 SGC-7901/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-841CoTr細(xì)胞、DHL5細(xì)胞、LLCPK1細(xì)胞 MDAPCa2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE3細(xì)胞、JM1細(xì)胞、Lieming Xu-2細(xì)胞 NH6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MonoMac6細(xì)胞、WERI細(xì)胞、HDQ-P1細(xì)胞 PCI:SG-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ES1細(xì)胞、Hs 27細(xì)胞、Hs 706.T細(xì)胞 Panc 10.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373-MG細(xì)胞、CMT-93細(xì)胞、SNUC2A細(xì)胞 hTERTHME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-3細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞、LY-R細(xì)胞 JTC-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G 292 Clone A 141B1細(xì)胞、HSC2細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞 ZR75_1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML193細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞 BMDC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KGN細(xì)胞、AHH-1細(xì)胞、MDA MB 231細(xì)胞 Simpson細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RERFLCMS細(xì)胞、TE-9細(xì)胞、UMRC-2細(xì)胞 HuTu 80 epithelioid cells人十二指腸腺癌細(xì)胞系 SK UT 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU216細(xì)胞、HD11細(xì)胞、MN60細(xì)胞 Hs 606.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-16細(xì)胞、DMS 79細(xì)胞、RFL6細(xì)胞 CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-358細(xì)胞、OVISE細(xì)胞、HemECs細(xì)胞 P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2444細(xì)胞、H1184細(xì)胞、CMT.64細(xì)胞 "
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