"DU4475 epithelioid cells人乳腺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時(shí)，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時(shí)更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
KYSE 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa S3細(xì)胞、HM1900細(xì)胞、Huh7.5.1細(xì)胞
NOR10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-387細(xì)胞、SL-29細(xì)胞、UM-UC14細(xì)胞
H-2135細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS17/28細(xì)胞、SKRC20細(xì)胞、Epstein-Barr-1細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
DU4475 epithelioid cells人乳腺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細(xì)胞解凍程序：依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒?yàn)需要，必須有所不同時(shí)，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細(xì)胞適應(yīng)后，方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn)。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對(duì)細(xì)胞而言差異極大，請(qǐng)務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺(tái)內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺(tái)內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類和濃度，于無菌操作臺(tái)內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對(duì)絕大多數(shù)細(xì)胞而言，１%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO，不會(huì)對(duì)細(xì)胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細(xì)胞中去除，待第二天確定細(xì)胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對(duì)極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會(huì)造成細(xì)胞分化之細(xì)胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細(xì)胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代方法：每周換液２—３次
C-28/I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-32細(xì)胞、L-5178-Y-R細(xì)胞、BNCL-2細(xì)胞
SK-N-BE(2)C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB157細(xì)胞、NCI-H64細(xì)胞、J-111細(xì)胞
Y-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞、Panc4.03細(xì)胞、HEC251細(xì)胞
AE1201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 357細(xì)胞、WM-266-mel細(xì)胞、MM1S細(xì)胞
SW 1783細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL7404細(xì)胞、P-388細(xì)胞、LTPA細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
DU4475 epithelioid cells人乳腺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：懸浮，多細(xì)胞聚集
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候，它就會(huì)停止生長，及時(shí)傳代后，細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
HT 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC5細(xì)胞、H2171細(xì)胞、KYSE520細(xì)胞
NCI-HUT-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2291細(xì)胞、H322T細(xì)胞、SUDHL4細(xì)胞
C17.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U 138 MG細(xì)胞、Eca109細(xì)胞、U266S細(xì)胞
TE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RASMC細(xì)胞、NKM-1細(xì)胞、PLA-801D細(xì)胞
BAR-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293F細(xì)胞、H22-H8D8細(xì)胞、CWR-22rv1細(xì)胞
PNEC30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly7細(xì)胞、FHC細(xì)胞、BCPAP細(xì)胞
Tu-177細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUG-Chor1細(xì)胞、NIH:OVCAR-10細(xì)胞、WM2664細(xì)胞
HCC2185細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7402細(xì)胞、CCD-33Co細(xì)胞、B16/F0細(xì)胞
OCI-Ly10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-m 14B細(xì)胞、Hs 578T細(xì)胞、P388.D1細(xì)胞
MGH-U3 (RN)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8細(xì)胞、MCF-10 Attached細(xì)胞、BV-173細(xì)胞
DU4475 epithelioid cells人乳腺上皮細(xì)胞系
ANA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBE4細(xì)胞、Rat 2細(xì)胞、NCI-460細(xì)胞
DR2R 1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GNM細(xì)胞、DLD 1細(xì)胞、Panc2_03細(xì)胞
IPLB-SF 21AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKO3細(xì)胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞、HCC-2108細(xì)胞
NWA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H2106細(xì)胞、OCI AML3細(xì)胞、Natural Killer-92細(xì)胞
COR L279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-1細(xì)胞、BLO 11細(xì)胞、MDA-157細(xì)胞
E304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SR-786細(xì)胞、3LL細(xì)胞、U138細(xì)胞
E304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SR-786細(xì)胞、3LL細(xì)胞、U138細(xì)胞
EC9706細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EA hy 926細(xì)胞、COR-L 105細(xì)胞、McA-RH 8994細(xì)胞
B16/BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ketr 3細(xì)胞、Huh-7.5細(xì)胞、RWPE2細(xì)胞
ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SG231細(xì)胞、B-16細(xì)胞、Hs600T細(xì)胞
MM134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H526細(xì)胞、SKOV-433細(xì)胞、KFB細(xì)胞
WM 451-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2185細(xì)胞、H-716細(xì)胞、MKN 45細(xì)胞
SV40 MES 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DITNC1細(xì)胞、OCI-Ly 10細(xì)胞、HCC-95細(xì)胞
GL261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02131細(xì)胞、SK-N-MC細(xì)胞、HuH-1細(xì)胞
MA-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rin-M-5F細(xì)胞、RT4-D6P2T細(xì)胞、UMR106細(xì)胞
SUM-159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs683細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞、LC2/Ad細(xì)胞
MDAMB435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH647細(xì)胞、PTK1細(xì)胞、UACC 812細(xì)胞
SUM159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS153細(xì)胞、KMH2細(xì)胞、BJA-B-1細(xì)胞
MKN45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-671細(xì)胞、MCMEC細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞
HEK-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos 2G6.4C10細(xì)胞、OCI-Ly19細(xì)胞、NPA'87細(xì)胞
SuperTube細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1930細(xì)胞、TGW-I-nu細(xì)胞、LM6細(xì)胞
H9c2(2-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE296細(xì)胞、PLCPRF5細(xì)胞、HCC0044細(xì)胞
NCI-H1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1sq細(xì)胞、NH-6細(xì)胞、OVCAR3細(xì)胞
L23/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ETCC007細(xì)胞、Mink細(xì)胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞
KAT5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori-3.1細(xì)胞、MHH-CALL2細(xì)胞、H-1404細(xì)胞
NU-GC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-460細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞
SNU739細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF-PAC1細(xì)胞、149 PT細(xì)胞、SNU-484細(xì)胞
HuCC-T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP 62細(xì)胞、P3HR1-BL細(xì)胞、H-209細(xì)胞
OLN93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞、Panc 02.03細(xì)胞、SCC 15細(xì)胞
SK Mel 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2細(xì)胞、H.Ep. No. 2細(xì)胞、GH3細(xì)胞
RIMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AKR細(xì)胞、H-2081細(xì)胞、H8細(xì)胞
NCI-H647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCLM6細(xì)胞、SPC-A-1細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞
EOL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2126細(xì)胞、NCI-SNU-475細(xì)胞、CMT.64細(xì)胞
C-Lu65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP-2細(xì)胞、RCC10細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞
H-2171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2030細(xì)胞、MO59J細(xì)胞、HIT T-15細(xì)胞
HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1S1細(xì)胞、M-07e細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞
HCC9204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL 7402細(xì)胞、RKO_AS45細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞
H-548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHL-5細(xì)胞、BMSC/hBMSCs細(xì)胞、HR8348細(xì)胞
H2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV504細(xì)胞、HEK-AD 293細(xì)胞、CCD18Co細(xì)胞
L cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C38細(xì)胞、CHO-K1細(xì)胞、Hep-G2細(xì)胞
CHP-212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGM-1細(xì)胞、NCl-H157細(xì)胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞
TERT-RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-55細(xì)胞、GM00637I細(xì)胞、H4-II-E細(xì)胞
MADB 106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT FET細(xì)胞、KMS18細(xì)胞、KMS18細(xì)胞
C22 (Clara)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192C細(xì)胞、HCC1833細(xì)胞、NCI/ADRRES細(xì)胞
SUPM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05887A細(xì)胞、JAR細(xì)胞、Tu177細(xì)胞
CCD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-98G細(xì)胞、IM9細(xì)胞、NCI-H2110細(xì)胞
VB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H526細(xì)胞、H-2452細(xì)胞、CCC-HEH-2細(xì)胞
RBL2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：b.End3細(xì)胞、NCTC 929細(xì)胞、NCI-SNU-449細(xì)胞
HCT 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV 434細(xì)胞、NCIH2170細(xì)胞、MSTO211H細(xì)胞
WRL-68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS411細(xì)胞、MeT-5A細(xì)胞、SUDHL-5細(xì)胞
Be Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB330細(xì)胞、LNCaP C4-2B細(xì)胞、IMR-32細(xì)胞
DU4475 epithelioid cells人乳腺上皮細(xì)胞系
VMCUB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh 7.5.1細(xì)胞、NB1RGB細(xì)胞、NOR10細(xì)胞
UPCI-SCC090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L M (TK-)細(xì)胞、JB6Cl30細(xì)胞、MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞
COLO-205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1105細(xì)胞、Huh7.5細(xì)胞、NeHepLxHT細(xì)胞
C17.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U 138 MG細(xì)胞、NIE-115細(xì)胞、UMC11細(xì)胞
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