"M059K epithelioid cells人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。 SNU601細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0030細胞、WiDr-TC細胞、KPNRTBM1細胞 D10G41細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-102細胞、AR4IP細胞、bEnd3細胞 SK-RC 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BLO11細胞、McCoy細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞 細胞生長:貼壁 M059K epithelioid cells人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細胞傳代方法:1:6-1:8傳代;每周換液2-3次。 Vx2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:697細胞、NCIH2196細胞、Psi-2 DAP細胞 NCI-H1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1sq細胞、NH-6細胞、OVCAR3細胞 HSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 H細胞、HOP 62細胞、WI-38細胞 bEND.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATDC5細胞、KP-N-NS細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞 NIH-3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sup T-1細胞、B4G12細胞、RM1細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 M059K epithelioid cells人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:成纖維細胞 細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 MDA-435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 (Clone 4)細胞、SK-RC-20細胞、F-36P細胞 SNU-368細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML12細胞、MS 751細胞、5-8F細胞 Tca-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-33細胞、NCI-H1648細胞、NCI-H1355細胞 TNC-1B12B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa18C細胞、G-402細胞、U373MG細胞 T98-G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-28細胞、D341 Med細胞、OV1/P細胞 HT-1197細胞系相關(guān)產(chǎn)品:766T細胞、GA-10 (Clone 4)細胞、HCT-8/V細胞 YAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-2細胞、SUDHL5細胞、MCA-205細胞 MAVER細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH 6細胞、FL-83B細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞 U-2 OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL 1-0細胞、HSAS3細胞、MMQ細胞 HEK;293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954 BL細胞、B16/F1細胞、PaTu 8988 S細胞 M059K epithelioid cells人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系 624mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO206細胞、K-562細胞、HUT-28細胞 SKN-AS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1238細胞、Glioma-261細胞、Earle's L cells細胞 J774 A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-1040細胞、F-81細胞、MCA205細胞 HeLa.S3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ND7/23細胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、BT474細胞 Clone 15 HL-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578Bst細胞、CW-2細胞、KU-19-19細胞 H250細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB1細胞、RERF-LC-MS細胞、NU-GC-2細胞 H250細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB1細胞、RERF-LC-MS細胞、NU-GC-2細胞 Walker/LLC-WRC256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1-E細胞、CL1-0細胞、Vero 76 clone E-6細胞 SK-N-BE-2c細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1915細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞、ABC-1細胞 NUGC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP C4-2細胞、HBE 135-E6/E7細胞、H1703細胞 PC615.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC827細胞、LIM1215細胞、BEL7402細胞 NCI-H1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL2H3細胞、RA細胞、NCI-H596細胞 MB231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 45細胞、KNS-81細胞、NRK 49F細胞 159 PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2細胞、H526細胞、HCC1937細胞 MIA-Pa-Ca-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:451-LU細胞、JEG-3細胞、Panc 08.13細胞 J.E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL 33細胞、SU86_86細胞、18G3.cl 1細胞 QSG7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKUT-1細胞、CCRF-SB細胞、PGBE1細胞 V79-GalK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05372E細胞、NCIH322細胞、NCIH2196細胞 SGC7901/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC 97-H細胞、SUM190PT細胞、Co-115細胞 OV-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3JHR-1細胞、RK-13細胞、OK-WT細胞 HCC-1359細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-159PT細胞、NIH:OVCAR-4細胞、Karpas-299細胞 SU-DHL-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CII細胞、HMrSV5細胞、MCA38細胞 Tn 5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2029細胞、OV1/P細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞 H.Ep. #2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1792細胞、Hs 739.T細胞、COV-362細胞 BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO-31細胞、MC-38細胞、NIH:OVCAR-8細胞 EU-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FUOV1細胞、ZYM-DIEC02細胞、HEK-293F細胞 22Rv-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC7901細胞、HCC-70細胞、Monomac-1細胞 P31 FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB453細胞、PAMC82細胞、NT2/D1細胞 WERI-Rb1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GCT細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、CAOV3細胞 SUPB15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12C-PM6細胞、HRPEpiC細胞、A 2058細胞 OSC19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL-6細胞、SEG-1細胞、SU86_86細胞 HANK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA-38細胞、H-1781細胞、NCI-H322細胞 MPC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-886細胞、NCIH1703細胞、MOLM-14細胞 HEC151細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Monomac-1細胞、LN-382細胞、253J細胞 H-711細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03570細胞、SNK1細胞、NIT-1細胞 H2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J B-V細胞、CSQT-2細胞、McA-RH8994細胞 Epstein-Barr-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHG44細胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、NEC-8細胞 PC12(高分化)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Oregon J-111細胞、HO-1-N-1細胞、PC3細胞 4T1-LUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92.1.7細胞、BT-325細胞、H650細胞 TMD8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH/DF-1細胞、H-1915細胞、SNU387細胞 SNU-387細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1395細胞、NCIH1105細胞、UMNSAH/DF#1細胞 PLB 985細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHI1細胞、OEC33細胞、FRH-0201細胞 Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-84細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、PA I細胞 CCD19-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCD-MLA-144細胞、NG 108-15細胞、AAV-293細胞 ONS-76細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3D4/21細胞、SC細胞、KRC Y細胞 DU145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKN細胞、Mc Coy細胞、1.1B4細胞 CHO-K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V 79細胞、MCF 7細胞、NCI-HUT-69細胞 H2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS513細胞、293T/17細胞、HSC-4細胞 MC3T3-E1 Subclone 24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1666_DA細胞、526mel細胞、Lung cancer-1/squamous細胞 HNE3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04678細胞、KYSE-410細胞、LM-TK-細胞 HCC202細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKM1細胞、WEHI 164 TC細胞、SUDHL16細胞 M059K epithelioid cells人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系 Baby Hamster Kidney-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMC-11細胞、SW527細胞、HCC4006細胞 OAW42細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAC細胞、HEK-293-FT細胞、KU812-F細胞 HL7702細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAFII細胞、Tissue Culture-1細胞、Walker256細胞 Tca-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-33細胞、SF-295細胞、DLD-1細胞 "
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