"LN-18 epithelioid cells人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng):細(xì)胞凍存好了,接下來(lái)要注意什么問(wèn)題呢?沒(méi)錯(cuò),就是記得到時(shí)間了,拿出來(lái)復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過(guò)程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬(wàn)不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長(zhǎng)行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開(kāi)始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長(zhǎng)至70%單層時(shí)收獲細(xì)胞,計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng),應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)24小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每?jī)龃婀懿怀^(guò)1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒(méi)有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個(gè)最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問(wèn)題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí),有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實(shí),細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn),不過(guò)這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會(huì)盡如人意。例如說(shuō),人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。 RAMOS2G64C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:McCoy細(xì)胞、MADB106細(xì)胞、U-87MG細(xì)胞 HUSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-847細(xì)胞、Hep G2細(xì)胞、COLO 320F細(xì)胞 ACC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-8細(xì)胞、GM637細(xì)胞、EFO27細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 LN-18 epithelioid cells人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前,細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來(lái)凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細(xì)胞條件無(wú)血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無(wú)血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無(wú)血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存:計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細(xì)胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以1×10(7)到5×10(7)細(xì)胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無(wú)血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存:使用分離試劑從基層分離細(xì)胞,分離時(shí)盡可能溫和,使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細(xì)胞,確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以5×10(6)到1×10(6)細(xì)胞/ml密度,在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。 細(xì)胞傳代方法:1:4-1:6傳代;每周換液2-3次 DV90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRA01/04 (HLE)細(xì)胞、RenCa細(xì)胞、373 MG細(xì)胞 Hs 888.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT細(xì)胞、PL12細(xì)胞、P3J細(xì)胞 DSL-6A-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh 74細(xì)胞、SW-1271細(xì)胞、HMEC細(xì)胞 Astrocyte type I clone細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-1細(xì)胞、H2.35細(xì)胞、SHI1細(xì)胞 UCLA SO M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAVER-1細(xì)胞、Mono Mac 6細(xì)胞、SF-295細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 LN-18 epithelioid cells人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞 常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中一些問(wèn)題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源,所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過(guò)20%,因?yàn)楹窟^(guò)低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不足,過(guò)高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時(shí)須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購(gòu)買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會(huì)有脫落?因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中不可避免的會(huì)有震蕩,收到后可以離心收集;4)購(gòu)買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購(gòu)買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見(jiàn)原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 OSA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHIN3細(xì)胞、SUDHL-4細(xì)胞、OCI-Ly07細(xì)胞 H-660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63細(xì)胞、WM266mel細(xì)胞、Y3-Ag123細(xì)胞 P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JJN-3細(xì)胞、CT26細(xì)胞、HEK293-EBNA1細(xì)胞 Hs 27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-13細(xì)胞、A101D細(xì)胞、HEP-3B2細(xì)胞 SKG-3a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TALL1細(xì)胞、NIT-1細(xì)胞、Hs 604.T細(xì)胞 NBLAN5T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KFB細(xì)胞、HEL-299細(xì)胞、CEK細(xì)胞 hTERT-RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs821T細(xì)胞、STTG1細(xì)胞、DR2R 1610細(xì)胞 Cor L51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-3細(xì)胞、8305C細(xì)胞、MeSoTheliOma-211H細(xì)胞 E0771細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、BC-3-H-I細(xì)胞、kms 11細(xì)胞 MDA-MB-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 172細(xì)胞、KGN細(xì)胞、LOUNH91細(xì)胞 LN-18 epithelioid cells人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 LA 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T/G HA-VSMC細(xì)胞、Fao細(xì)胞、BC3H-1細(xì)胞 P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM102PT細(xì)胞、RINm5F細(xì)胞、RT112細(xì)胞 KP-N-RT-BM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML3細(xì)胞、KAT5細(xì)胞、578T細(xì)胞 Hs-343-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL83B細(xì)胞、RCK-8細(xì)胞、HCT FET細(xì)胞 OV1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-30細(xì)胞、Colon38細(xì)胞、KMS-18細(xì)胞 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA87細(xì)胞、HT-144細(xì)胞、A875細(xì)胞 NUGC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP C4-2細(xì)胞、HBE 135-E6/E7細(xì)胞、H1703細(xì)胞 T-47D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:149 PT細(xì)胞、HT115細(xì)胞、BCaP-37細(xì)胞 HLE B-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞、Ly1細(xì)胞、CZ-1細(xì)胞 NCIH2009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FD-LSC-1細(xì)胞、CCD1095Sk細(xì)胞、CT26.WT細(xì)胞 FHs 74 Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL1細(xì)胞、H-510細(xì)胞、HEC-251細(xì)胞 P3-X63-Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR 32細(xì)胞、SMMC 7721細(xì)胞、HCC-15細(xì)胞 MAVER-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-193細(xì)胞、NCI-H2170細(xì)胞、SNU-520細(xì)胞 M-G63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMel-5細(xì)胞、SUIT-2細(xì)胞、HLE-B3細(xì)胞 C643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VCaP細(xì)胞、CL1細(xì)胞、Hepa1-6細(xì)胞 MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS411細(xì)胞、QGP1細(xì)胞、TE 85 ClF-5細(xì)胞 HCC-9724細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN299細(xì)胞、L-6 myoblast細(xì)胞、697細(xì)胞 MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHP-77細(xì)胞、JF305細(xì)胞、SKMEL28細(xì)胞 NKT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MASMC細(xì)胞、Tca8113細(xì)胞、SKMEL5細(xì)胞 SU8686細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL3A細(xì)胞、PANC-28細(xì)胞、LuCL4細(xì)胞 COLO-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OUMS27細(xì)胞、P3-X63-Ag8.653細(xì)胞、SW900細(xì)胞 Madison細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RF/6A細(xì)胞、SF 126細(xì)胞、CBRH7919細(xì)胞 Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRCLCD細(xì)胞、Hs940.T細(xì)胞、Verda reno細(xì)胞 J-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293EBNA細(xì)胞、MDA-175細(xì)胞、NCI-H2172細(xì)胞 NCIH1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK-49F細(xì)胞、Hs343T細(xì)胞、NS-1細(xì)胞 HG2855細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P116細(xì)胞、H-735細(xì)胞、MLE-12細(xì)胞 HR-8348細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV(4;11)細(xì)胞、NCI-H441細(xì)胞、PLC/PRF5細(xì)胞 PC-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 982細(xì)胞、DV90細(xì)胞、C33A細(xì)胞 H-841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 102PT細(xì)胞、MES-SA細(xì)胞、CEM/0細(xì)胞 P30/0HK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC3細(xì)胞、H2107細(xì)胞、293 Ad5細(xì)胞 OCIAML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BetaTC6細(xì)胞、GM2132細(xì)胞、HS-5細(xì)胞 HCC-1359細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-159PT細(xì)胞、NIH:OVCAR-4細(xì)胞、Karpas-299細(xì)胞 HCC-9724細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN299細(xì)胞、L-6 myoblast細(xì)胞、697細(xì)胞 2B4-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNF1細(xì)胞、Hs 343.T細(xì)胞、GM04680細(xì)胞 TE3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266B1細(xì)胞、HOSEpiC細(xì)胞、A172細(xì)胞 HT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDC-P1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞、OK細(xì)胞 NTERA-2/D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RM-1細(xì)胞、H-520細(xì)胞、MAVER-1細(xì)胞 HepaRG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/O細(xì)胞、HRVEC細(xì)胞、HEMCSS細(xì)胞 HBSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 832(C).T細(xì)胞、SW1222細(xì)胞、CWR22R細(xì)胞 HOP62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-RC-2細(xì)胞、SK-OV-3細(xì)胞、Ku812F細(xì)胞 MC-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1428細(xì)胞、C3A細(xì)胞、Hs 683細(xì)胞 F-36P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepa 1-6細(xì)胞、NB9細(xì)胞、PLMVEC細(xì)胞 MCF 7B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J-111細(xì)胞、CCD 1112SK細(xì)胞、Hep 2細(xì)胞 32Dcl3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH3T3細(xì)胞、A 2780 CP細(xì)胞、WPMY-1細(xì)胞 NUGC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-735細(xì)胞、MOLT 16細(xì)胞、HTR-8/SV neo細(xì)胞 WEHI 164 TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs683T細(xì)胞、OVCA 432細(xì)胞、MARC 145細(xì)胞 HCC-44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-2細(xì)胞、BLO11細(xì)胞、TH1細(xì)胞 ID8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPI-2I細(xì)胞、RA 1細(xì)胞、FHs 74 Int細(xì)胞 Mv1.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-361細(xì)胞、H1975細(xì)胞、P3X63細(xì)胞 KG1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon-26細(xì)胞、UWB1.289+BRCA1細(xì)胞、Anip973細(xì)胞 Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:My-La 2059細(xì)胞、NKL細(xì)胞、NKL細(xì)胞 LN-18 epithelioid cells人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 H-1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2342細(xì)胞、COLO-680N細(xì)胞、OCI-AML-3細(xì)胞 SNU5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-C2B細(xì)胞、Kasumi-1細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞 OCI AML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1693細(xì)胞、RCC-4細(xì)胞、UMUC-3細(xì)胞 P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JJN-3細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞、CAL27細(xì)胞 "
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