"WB-F344 epithelioid cells大鼠肝上皮樣干細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí),棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇,因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落,對(duì)腫瘤細(xì)胞來(lái)說(shuō),這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問(wèn)題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過(guò)有人說(shuō)EDTA對(duì)細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞! 1301細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L cell line細(xì)胞、CoCL2細(xì)胞、PSN-1細(xì)胞 TE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC316細(xì)胞、Sf-21細(xì)胞、HCC-1395細(xì)胞 SU-DHL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-522細(xì)胞、SW 579細(xì)胞、NIHOVCAR3細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 WB-F344 epithelioid cells大鼠肝上皮樣干細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前,細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來(lái)凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細(xì)胞條件無(wú)血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無(wú)血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無(wú)血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存:計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細(xì)胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以1×10(7)到5×10(7)細(xì)胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無(wú)血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存:使用分離試劑從基層分離細(xì)胞,分離時(shí)盡可能溫和,使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細(xì)胞,確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以5×10(6)到1×10(6)細(xì)胞/ml密度,在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 PZ-HPV-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-216細(xì)胞、174xCEM.T2細(xì)胞、HEK-293FT細(xì)胞 L 1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHP10-3細(xì)胞、NCI-SNU-5細(xì)胞、NCI-H2073細(xì)胞 N87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDSMC細(xì)胞、Th17細(xì)胞、L-M(TK-)細(xì)胞 HO-8910細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2081細(xì)胞、LA-795細(xì)胞、SUM159PT細(xì)胞 UM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞、MDA-MB-435S細(xì)胞、Molm 14細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 WB-F344 epithelioid cells大鼠肝上皮樣干細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣 細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在1-2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí));2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。 E0771細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、BC-3-H-I細(xì)胞、kms 11細(xì)胞 BT-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HET1A細(xì)胞、Eph4 1424細(xì)胞、G-292 clone A141B1細(xì)胞 SCI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞、SK-NSH細(xì)胞、PIGI細(xì)胞 Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251細(xì)胞、SNU1040細(xì)胞、MLFC細(xì)胞 C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3細(xì)胞、MDAPCa2b細(xì)胞、RT-4細(xì)胞 Hs729T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIHOVCAR3細(xì)胞、EJ細(xì)胞、MDA361細(xì)胞 U373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASPC1細(xì)胞、BIC1細(xì)胞、Y-79細(xì)胞 Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO206F細(xì)胞、NB.4細(xì)胞、Huh7.5細(xì)胞 HIT T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 8細(xì)胞、DH82細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞 HCC38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2171細(xì)胞、Hs 766.T細(xì)胞、MGC803細(xì)胞 WB-F344 epithelioid cells大鼠肝上皮樣干細(xì)胞系 CEMC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DK-MG細(xì)胞、H9c2 (2-1)細(xì)胞、MDCK.2細(xì)胞 SNT8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD33Co細(xì)胞、OCI-LY-10細(xì)胞、HP615細(xì)胞 Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH-28細(xì)胞、Pa18C細(xì)胞、Molm14細(xì)胞 293E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS-1E細(xì)胞、LS 174 T細(xì)胞、SHP77細(xì)胞 MOLT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL92.1.7細(xì)胞、RGC-5細(xì)胞、SNU668細(xì)胞 8305-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞、TGHAVSMC細(xì)胞、MCF12F細(xì)胞 NCIH378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320-DM細(xì)胞、COS-7細(xì)胞、EC9706細(xì)胞 P3HR1-BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pan02細(xì)胞、MCA-205細(xì)胞、SK-ES-1細(xì)胞 BALB 3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG-63細(xì)胞、PL45細(xì)胞、TM-3細(xì)胞 Hk-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B5537SKIN細(xì)胞、BT20細(xì)胞、PC-10細(xì)胞 DHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞、HCC0070細(xì)胞 H719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-78細(xì)胞、MV411細(xì)胞、HuT 78細(xì)胞 T/G HA VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:10T1/2細(xì)胞、AsPC-1細(xì)胞、HARAB細(xì)胞 NCI.H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1-B細(xì)胞、5-8F細(xì)胞、NCI H508細(xì)胞 U138MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT3細(xì)胞、Y3.AG.1.2.3細(xì)胞、MSTO-211 H細(xì)胞 Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-239細(xì)胞、Hs 888Lu細(xì)胞、SW-13細(xì)胞 SKMEL-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-134細(xì)胞、AE 1201細(xì)胞、MV4II細(xì)胞 AR41P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW527細(xì)胞、P3/X63/Ag8.653細(xì)胞、EC-GI-10細(xì)胞 H2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPT-1細(xì)胞、Hmy.2 CIR細(xì)胞、H1651細(xì)胞 Nakata-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2172細(xì)胞、JVM-2細(xì)胞、NCIADRRES細(xì)胞 Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:STC-1細(xì)胞、LoMeT-ccRcc細(xì)胞、H-1882細(xì)胞 THPI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2C)細(xì)胞、NBL-12細(xì)胞、HS940細(xì)胞 TE 32.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 767細(xì)胞、WEHI-3B細(xì)胞、C1498細(xì)胞 Caki-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Mel 1細(xì)胞、B16-F10-BL6細(xì)胞、MPVECs細(xì)胞 JB6Cl30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLO-Y4細(xì)胞、H661細(xì)胞、DHL4細(xì)胞 MCF12F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hs 68細(xì)胞、MGc80-3細(xì)胞、TM4細(xì)胞 NCIH1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-125細(xì)胞、EB-2細(xì)胞、Soleus clone 8細(xì)胞 HEL92.1.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLMEC細(xì)胞、MDA157細(xì)胞、GM05372細(xì)胞 H1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW-nu-1細(xì)胞、SVEC 4-10細(xì)胞、SK Mel 1細(xì)胞 P3-X63.Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MonoMac 6細(xì)胞、SU-DHL-6細(xì)胞、BEL7405細(xì)胞 HCC-1588細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2087細(xì)胞、ARH77細(xì)胞、KU 19-19細(xì)胞 H.Ep.-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-886細(xì)胞、PLA802細(xì)胞、BT-B細(xì)胞 CHO K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 78細(xì)胞、NCIH1623細(xì)胞、NCI-H82細(xì)胞 GM06141B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-U1 (EJ)細(xì)胞、SN12-PM6細(xì)胞、H-719細(xì)胞 Mel RM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFC細(xì)胞、HEK-293-F細(xì)胞、H2135細(xì)胞 HT-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE353.SK細(xì)胞、SK-N-BE2細(xì)胞、WM-239細(xì)胞 H-1672細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M細(xì)胞、Calu-3細(xì)胞、SK MEL 28細(xì)胞 HPAF-II/CD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSC細(xì)胞、GM-346細(xì)胞、SUP-B15細(xì)胞 T HEECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N1E-115細(xì)胞、NALM 6細(xì)胞、SHG-44細(xì)胞 T98-G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-28細(xì)胞、D341 Med細(xì)胞、OV1/P細(xì)胞 MCF12A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EST50細(xì)胞、NCI-SNU-C2B細(xì)胞、GC-2細(xì)胞 Mo 59J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 clone 4細(xì)胞、HuTu 80細(xì)胞、Ca759細(xì)胞 H8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-354細(xì)胞、HCC-78細(xì)胞、Jurkat Clone E6-1細(xì)胞 HANK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJAB-1細(xì)胞、HCT/FU細(xì)胞、SUP-B1細(xì)胞 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