"PK-13 epithelioid cells豬腎細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。 LAC細胞系相關產(chǎn)品:SGC 7901細胞、CFSC-8B細胞、Panc 5.04細胞 OCI-LY-1細胞系相關產(chǎn)品:Hs 445細胞、L6細胞、SMMC7721細胞 SK-N-MC細胞系相關產(chǎn)品:Panc-02細胞、TE354T細胞、MDA-MB231細胞 細胞生長:貼壁 PK-13 epithelioid cells豬腎細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結構特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。 細胞傳代方法:1:2—1:4傳代,每周換液2—3次 PC 61-5-3細胞系相關產(chǎn)品:GM637細胞、NIH-3T3細胞、BNL.CL2細胞 BEL-7405細胞系相關產(chǎn)品:H-1793細胞、OSKM-1細胞、Kit225/K6細胞 IB-RS2細胞系相關產(chǎn)品:SW-1417細胞、MKN-45細胞、OUMS-23細胞 MFE 296細胞系相關產(chǎn)品:SK UT 1細胞、RPMI-7666細胞、NCI-SNU-1040細胞 KMB-17細胞系相關產(chǎn)品:TE354T細胞、IOSE-80細胞、Med 283細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 PK-13 epithelioid cells豬腎細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結:1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 293EBNA細胞系相關產(chǎn)品:GM-3573細胞、A375-MEL細胞、Hs-281-T細胞 SCL-1細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-175-VII細胞、SO-RB50細胞、NCI-H1581細胞 Fu97細胞系相關產(chǎn)品:KRC/Y細胞、T 84細胞、LN 229細胞 A-673細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2085細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、KG-1a細胞 FC33細胞系相關產(chǎn)品:MonoMac1細胞、HEK-A細胞、AM38細胞 HK-2 [Human kidney]細胞系相關產(chǎn)品:University of Arizona Cell Culture-812細胞、KBM-7/Hap8細胞、H-522細胞 MT-4細胞系相關產(chǎn)品:HPAC細胞、PANC0813細胞、BBE細胞 MDA-415細胞系相關產(chǎn)品:HUVEC細胞、Mouse INsulinoma 6細胞、C22 (Clara)細胞 RPMI7666細胞系相關產(chǎn)品:MFD-1細胞、EFM192C細胞、Panc_05_04細胞 SUM159細胞系相關產(chǎn)品:DH-82細胞、GM02132C細胞、SK-RC 42細胞 PK-13 epithelioid cells豬腎細胞系 EJ 138細胞系相關產(chǎn)品:IEC18細胞、MV(4;11)細胞、MSCs(mUCMSCs)細胞 GM06141細胞系相關產(chǎn)品:RBL-I細胞、THP 1細胞、NCI N87細胞 Chang Cells細胞系相關產(chǎn)品:Z138細胞、G-361細胞、KYSE450細胞 NIH 3T6細胞系相關產(chǎn)品:CP70細胞、H1373細胞、SKNBE(2c)細胞 TH1細胞系相關產(chǎn)品:A9(Hamprecht)細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞、SC1細胞 H-1355細胞系相關產(chǎn)品:CCC-HIE-2細胞、BERH-2細胞、UCLA NPA871細胞 H-1355細胞系相關產(chǎn)品:CCC-HIE-2細胞、BERH-2細胞、UCLA NPA871細胞 DH-82細胞系相關產(chǎn)品:PANC-03-27細胞、CMT167細胞、BC-009細胞 Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H-69細胞、WI38細胞、H-292細胞 COLO320HSR細胞系相關產(chǎn)品:H2110細胞、SuDHL 4細胞、H2073細胞 H1869細胞系相關產(chǎn)品:PA12細胞、SW900細胞、H283細胞 H520細胞系相關產(chǎn)品:EoL-1 cell細胞、NCIH660細胞、MLA-144細胞 MT-4細胞系相關產(chǎn)品:HPAC細胞、PANC0813細胞、BBE細胞 LLC1細胞系相關產(chǎn)品:JHH-7細胞、MDA-MB435細胞、JROECL33細胞 JIII細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-468細胞、LS1034細胞、3D4/21細胞 MDA 1386細胞系相關產(chǎn)品:LC2/Ad細胞、Huh-7.5.1細胞、HCC2185細胞 KCL22細胞系相關產(chǎn)品:GC9811-P細胞、EC-GI細胞、Hs27F細胞 A375S2細胞系相關產(chǎn)品:H1341細胞、PANC 1005細胞、PNT1-a細胞 HAVSMC細胞系相關產(chǎn)品:HCC95細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞、Colon-38細胞 OV3121細胞系相關產(chǎn)品:BCP-1細胞、NCI-BL1339細胞、Hs294細胞 Tn 5B1-4細胞系相關產(chǎn)品:H2029細胞、OV1/P細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞 MHCC 97-H細胞系相關產(chǎn)品:NIT-1細胞、SW-626細胞、16HBEo-細胞 Clone Y1細胞系相關產(chǎn)品:COR-L23/P細胞、RPE1-hTERT細胞、H1876細胞 OCILY7細胞系相關產(chǎn)品:SNU-520細胞、PT-67細胞、Hs839T細胞 HFT8810細胞系相關產(chǎn)品:MV 3細胞、Bac12F5細胞、CCD1095Sk細胞 NOMO1細胞系相關產(chǎn)品:Keio University-19-19細胞、Evsa T細胞、Kit 225 K6細胞 L-cell細胞系相關產(chǎn)品:MC116細胞、TW-039細胞、NCI-H1755細胞 Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞系相關產(chǎn)品:SW-1088細胞、NK92-MI細胞、HAEC細胞 T47-D細胞系相關產(chǎn)品:L 1210細胞、EFM-19細胞、CAL 33細胞 WSU-DLCL(2)細胞系相關產(chǎn)品:MDCK細胞、V 79-4細胞、HCV 29細胞 HUT-226細胞系相關產(chǎn)品:RCC23細胞、COLO-699細胞、OVCAR10細胞 QSG-7701細胞系相關產(chǎn)品:SW 626細胞、Y3-Ag1.2.3細胞、RPTC細胞 KYSE-50細胞系相關產(chǎn)品:Hs604T細胞、Calu 3細胞、SW 620細胞 751-NA-15細胞系相關產(chǎn)品:SMA-560細胞、SW 480細胞、KYSE 70細胞 MCF.10A細胞系相關產(chǎn)品:HEP-3B2細胞、P1-Raji細胞、F442A細胞 ACC-2細胞系相關產(chǎn)品:NCIH226細胞、U373 MG細胞、Pt K1 (NBL-3)細胞 Saos2細胞系相關產(chǎn)品:BHK21細胞、CL MC/9細胞、RH-30細胞 NIHOVCAR3細胞系相關產(chǎn)品:FL62891細胞、H2052細胞、MC-116細胞 SC1細胞系相關產(chǎn)品:H-1105細胞、3AO細胞、RH30SJ細胞 NCI-H1693細胞系相關產(chǎn)品:MARC 145細胞、RCK8細胞、Hs888Lu細胞 RFL6細胞系相關產(chǎn)品:HT-1197細胞、CAKI.1細胞、COLO 738細胞 HPAF-II細胞系相關產(chǎn)品:Reh細胞、DMS114細胞、A375-SM細胞 SNU398細胞系相關產(chǎn)品:G 401細胞、SKUT-1細胞、SK-N-BE(2)-C細胞 H-2135細胞系相關產(chǎn)品:ROS17/28細胞、SKRC20細胞、Epstein-Barr-1細胞 Michigan Cancer Foundation-10A細胞系相關產(chǎn)品:ST486細胞、VP303細胞、3T3-J2細胞 Giant Cell Tumor細胞系相關產(chǎn)品:L- cell細胞、NCI-H69細胞、E.L.4細胞 SKN-AS細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1238細胞、Glioma-261細胞、Earle's L cells細胞 HLF細胞系相關產(chǎn)品:HSC-T6細胞、NCI-H774細胞、SW-1222細胞 MDA 231-LM2-4175細胞系相關產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、Ca761細胞、H719細胞 HcaF細胞系相關產(chǎn)品:H8細胞、YD-15細胞、RT-112細胞 RPE D407細胞系相關產(chǎn)品:WM115F細胞、MGHU3細胞、SW-480細胞 PK-13 epithelioid cells豬腎細胞系 B104 [Rat neuroblastoma]細胞系相關產(chǎn)品:C57/B6-L細胞、HHL5細胞、C166細胞 LN 229細胞系相關產(chǎn)品:RBMVEC細胞、HCA-7細胞、Calu-6細胞 HECCL-1細胞系相關產(chǎn)品:K422細胞、COLO206F細胞、Co 115細胞 Fu97細胞系相關產(chǎn)品:KRC/Y細胞、SC細胞、OVCAR432細胞 "
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