"MIN6 epithelioid cells小鼠胰島β細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項:細(xì)胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至70%單層時收獲細(xì)胞,計數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實,細(xì)胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。 Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2107細(xì)胞、NCI-H1581細(xì)胞、NFS-60細(xì)胞 SCC VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3-CA細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞、MFE296細(xì)胞 KE-37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE39細(xì)胞、6-T CEM細(xì)胞、HM1900細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 MIN6 epithelioid cells小鼠胰島β細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的衰老:體外細(xì)胞培養(yǎng)實驗證明:成纖維細(xì)胞:來自胎兒傳代50次后衰老死亡,來自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān);來自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細(xì)胞衰老過程中會發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時,細(xì)胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細(xì)胞衰老原因,尚無定論,出現(xiàn)過好幾種理論與假說,其中得到較廣泛認(rèn)可的是“自由基損傷假說”。細(xì)胞凋亡:細(xì)胞的死亡是個體存活的正?,F(xiàn)象,常見的細(xì)胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細(xì)胞毒性。多細(xì)胞生物的生命活動中,因為環(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導(dǎo)致一部分細(xì)胞死去,稱為細(xì)胞的病理死亡,或細(xì)胞壞死。壞死是細(xì)胞暴露于嚴(yán)重的物理或化學(xué)刺激時導(dǎo)致的細(xì)胞死亡;細(xì)胞毒性是由細(xì)胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細(xì)胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細(xì)胞死亡機(jī)理,如殺傷T細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。還有一種情況,一部分細(xì)胞的死亡是生物個體正常生命活動(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細(xì)胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細(xì)胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細(xì)胞死亡,是機(jī)體清除無用的或者不想要的細(xì)胞的手段。它與細(xì)胞壞死是兩個截然不同的過程,無論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來說,都有明顯的區(qū)別。細(xì)胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞增殖、分化和衰老起著互補(bǔ)與平衡的作用,在多細(xì)胞動物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細(xì)胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結(jié)果將是可怕的:凋亡不足時,易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細(xì)胞凋亡及其機(jī)理具有重要的理論和實踐意義。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 Pt-K2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA 231-LM2-4175細(xì)胞、HFT-8810細(xì)胞、HKF細(xì)胞 SNU-878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR8348細(xì)胞、OCI-Ly 1細(xì)胞、NCI-SNU-878細(xì)胞 HMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)-M17細(xì)胞、SKGT4細(xì)胞、QGP 1細(xì)胞 L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PMVEC細(xì)胞、DU-4475細(xì)胞、NCI-SNU-668細(xì)胞 SW-900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HD11細(xì)胞、Hs68細(xì)胞、AMO1細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 MIN6 epithelioid cells小鼠胰島β細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁生長 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會有脫落?因為運(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 E304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SR-786細(xì)胞、3LL細(xì)胞、U138細(xì)胞 RT-112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32-mel細(xì)胞、HeLa/DDP細(xì)胞、RCC10細(xì)胞 C38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL1細(xì)胞、NCI-H441-4細(xì)胞、RBL 2H3細(xì)胞 Ramos G6.C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-579細(xì)胞、T-ALL-1細(xì)胞、MDA-MB-175VII細(xì)胞 2780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:aTC1 Clone 6細(xì)胞、T-47D細(xì)胞、HCC-1428細(xì)胞 LY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H7721細(xì)胞、H35 Reuber細(xì)胞、Karpas-422細(xì)胞 16HBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC38細(xì)胞、RASMC細(xì)胞、SNB.19細(xì)胞 NCI-H2171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3細(xì)胞、Walker/LLC-WRC 256細(xì)胞、RCK8細(xì)胞 7404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:4-1st細(xì)胞、Hs 706.T細(xì)胞、Hs 821.T細(xì)胞 MDA-MB-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM/0細(xì)胞、MRASMC細(xì)胞、SCC090細(xì)胞 MIN6 epithelioid cells小鼠胰島β細(xì)胞系 NCI-SNU-119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK clone 49F細(xì)胞、MDAMB134細(xì)胞、H-2172細(xì)胞 OCUM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-157細(xì)胞、NCI-H1666細(xì)胞、HEK (AD293)細(xì)胞 NCIH1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG-1細(xì)胞、HuT 78細(xì)胞、NCIH1792細(xì)胞 Hs888T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4 I細(xì)胞、LPC-H12細(xì)胞、GOS3細(xì)胞 LS1034細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK-52E細(xì)胞、NCL-H548細(xì)胞、SK-N-F1細(xì)胞 HCT-8/V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DR2R 1610細(xì)胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、TCCSUP細(xì)胞 HCT-8/V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DR2R 1610細(xì)胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、TCCSUP細(xì)胞 8305C_1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2087細(xì)胞、P-815細(xì)胞、H345細(xì)胞 BT-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos (RA 1)細(xì)胞、H-1694細(xì)胞、MC-4細(xì)胞 NCI-H1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1694細(xì)胞、RKO-E6細(xì)胞、Sup T-1細(xì)胞 GM02132C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR-8348細(xì)胞、GLC82細(xì)胞、MC57G細(xì)胞 UMC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryo Kidney-2細(xì)胞、TSCCa細(xì)胞、SNU-620細(xì)胞 MDA-MB415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMCUB-1細(xì)胞、CAL 85-1細(xì)胞、Y-1細(xì)胞 SUM-159-PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/0-Ag-14細(xì)胞、SW1271細(xì)胞、OVCAR4細(xì)胞 WILL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞、BMF細(xì)胞、NCIH2172細(xì)胞 Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 540細(xì)胞、RMC細(xì)胞、P3-X63-Ag8-653細(xì)胞 COLO 829細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F81細(xì)胞、Swiss3T3細(xì)胞、SK-UT-1細(xì)胞 MCF/Adr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)M-17細(xì)胞、BEL-7404細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞 DMS 114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB175VII細(xì)胞、BrCL12細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞 BNL.CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFK-1細(xì)胞、MA-104細(xì)胞、NCIH244細(xì)胞 RPMI 8226/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AC16 [Human hybrid]細(xì)胞、NCIH1650細(xì)胞、PANC-1細(xì)胞 SUM149PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954細(xì)胞、hTERT RPE1細(xì)胞、HEK293-F細(xì)胞 BT-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HET1A細(xì)胞、Eph4 1424細(xì)胞、G-292 clone A141B1細(xì)胞 PCI-4B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GDM-1細(xì)胞、NUGC4細(xì)胞、HUT125細(xì)胞 VK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L26細(xì)胞、H2170細(xì)胞、H2171細(xì)胞 RPPVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H209細(xì)胞、HCT FET細(xì)胞、UACC893細(xì)胞 HLEB-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1細(xì)胞、Ramos-2G6-4C10細(xì)胞、U266B1細(xì)胞 JVM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YES-2細(xì)胞、MES-SA/Dx-5細(xì)胞、SKHEP1細(xì)胞 MES-SA Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs294細(xì)胞、HSC6細(xì)胞、C-33 A細(xì)胞 K7M2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03569D細(xì)胞、Pro-Lec1.3C細(xì)胞、NCI-H1092細(xì)胞 RLE-6TN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1/2CL8細(xì)胞、U-251MG細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞 SKGT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 895 T細(xì)胞、SK LU 1細(xì)胞、TE 32細(xì)胞 TALL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞、SW837細(xì)胞、MPC-5細(xì)胞 KYSE30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7/WT細(xì)胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞、HCA7細(xì)胞 Panc-03.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320F細(xì)胞、NKT細(xì)胞、B16-BL6細(xì)胞 SKNBE(2c)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Melan-a細(xì)胞、HCA 7細(xì)胞、NCI-H522細(xì)胞 NUGC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP C4-2細(xì)胞、HBE 135-E6/E7細(xì)胞、H1703細(xì)胞 CW-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2066細(xì)胞、C-4 I細(xì)胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞 BPH-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H711細(xì)胞、HEK;293細(xì)胞、Hs-746T細(xì)胞 HONE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4 S+L-細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞、H1522細(xì)胞 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