"MC3T3-E1 epithelioid cells小鼠胚胎成骨細胞前體細胞系 細胞背景資料:該細胞有多個亞克隆,可以作為體外研究成骨細胞分化的良好模型,尤其是ECM信號通路的作用。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 NOMO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Keio University-19-19細胞、Evsa T細胞、Kit 225 K6細胞 EC9706細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EA hy 926細胞、COR-L 105細胞、McA-RH 8994細胞 SGC 7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2932細胞、UK Pan-1細胞、P30/0HK細胞 細胞生長:貼壁 MC3T3-E1 epithelioid cells小鼠胚胎成骨細胞前體細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。 細胞傳代方法:1:2傳代 NMCG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00215細胞、TE-32細胞、CAL 62細胞 mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC/CAR細胞、HEM-L細胞、HuH6細胞 WM 239-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCP1細胞、H-2106細胞、TE353.SK細胞 Reuber H35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC-1[JHU-1]細胞、M-1 myeloid leukemia細胞、JM細胞 Y3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCLM3細胞、DiFi細胞、DHL8細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 MC3T3-E1 epithelioid cells小鼠胚胎成骨細胞前體細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:成纖維細胞樣 造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! MNNG/HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2195細胞、Hs-852-T細胞、OCI-LY-3細胞 RGC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa.S3細胞、L- cell細胞、SW839細胞 JC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H157細胞、THEECs細胞、MDCKII-WT細胞 HBE135-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERIRb1細胞、NFS 60細胞、GalK1細胞 SNU-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1648細胞、H-460細胞、TE-3A細胞 RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVGp12細胞、Opossum Kidney細胞、NCI-H3255細胞 Hs 274細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFPAC-1細胞、TK-10細胞、AML 12細胞 HO8910PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGBC-11-TKB細胞、SK.MEL.5細胞、NCI-H220細胞 LoMeT-ccRcc細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RASMCs細胞、EoL-1細胞、OVCAR.5細胞 Karpas299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DAN-G細胞、PL-11細胞、MDAPCa2b細胞 MC3T3-E1 epithelioid cells小鼠胚胎成骨細胞前體細胞系 V-79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-5細胞、H9細胞、SKM1細胞 MDA-175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn-5細胞、KY180細胞、M4e細胞 V 79-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs 74 Int細胞、K 562細胞、AU-565細胞 B16/F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_05_04細胞、CAL 39細胞、HCC366細胞 Hs675T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/CP70細胞、Tu-177細胞、624 MEL細胞 H-1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-2細胞、BE(2)M-17細胞、HCC1428細胞 Y-79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBT2細胞、DITNC1細胞、CX-1細胞 SK-MEL-MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP2-0-Ag14細胞、Ly8細胞、NEC細胞 PLCPRF5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-II細胞、QBC939細胞、L929(NCTC)細胞 NCIH28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJRH 30細胞、Tu 177細胞、3 LL細胞 H2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品:alphaTC clone 6細胞、Med 341細胞、MKN74細胞 JF305細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT115細胞、HT22細胞、HTh74細胞 L-cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-090細胞、HCT 116細胞、Hopkins-92細胞 A549/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2029細胞、SW 948細胞、COLO320 DM細胞 KYSE 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR1細胞、EA.Hy926細胞、PCI-04B細胞 RPMI 6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV-112細胞、Fetal Human Colon細胞、NCI-H1437細胞 HTh 74細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-415細胞、GM00637細胞、IOSE-Mar細胞 6T-CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-449細胞、MALME 3M細胞、Cattle chondrocytes細胞 SUDHL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly19細胞、N1E115細胞、GM05887細胞 OK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3-Ag123細胞、C-8161細胞、KU 812細胞 A20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE2細胞、HME1細胞、95C細胞 RPMI7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFD-1細胞、EFM192C細胞、Panc_05_04細胞 T-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22-Rv1細胞、32D clone3細胞、SBC-5細胞 CCD-841CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fao細胞、NuTu 19細胞、UPCI-SCC-090細胞 NCI-H358細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly3細胞、3T3F442A細胞、WPMY1細胞 UACC812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-719細胞、HAEC細胞、SW1990細胞 Hs 832(C).T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2085細胞、NW38細胞、HCC-202細胞 K7M2 wt細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caov-4細胞、J-774A.1細胞、Jeko1細胞 NEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U14細胞、H1355細胞、Clone M-3細胞 HSCT6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LSECs細胞、BI-Mel細胞、SVGp12細胞 OKAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3JHR1細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、MC57細胞 Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono Mac 6細胞、HOS-MNNG細胞、LN-229細胞 SKRC-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VA-ES-BJ細胞、Ly19細胞、Sci-1細胞 Bovine Turbinate細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MARC-145細胞、TCC-PAN2細胞、RPMI-1846細胞 SUDHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LP-1細胞、SK-N-BE-2細胞、8226細胞 Hs-343-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL83B細胞、RCK-8細胞、HCT FET細胞 HT144-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 436細胞、C6細胞、IHH細胞 SKNO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-151細胞、IEC-18細胞、C32 [Human melanoma]細胞 PLC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs739T細胞、RPMI-1788細胞、OVCA-432細胞 NCI H295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1092細胞、RERFLCMS細胞、SUIT2細胞 Panc 04.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono-Mac-1細胞、T2(174 x CEM.T2)細胞、L428細胞 Vero E-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML4細胞、T84細胞、Walker/LLC-WRC 256細胞 UPCI-SCC-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI AML4細胞、SU-DHL-10細胞、HCCC-9810細胞 HCC-95細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit-225細胞、HDQ-P1細胞、DMS-273細胞 624mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO206細胞、K-562細胞、HUT-28細胞 IEC18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB231細胞、SU-DHL1細胞、QBC-939細胞 HCEC-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-637細胞、HSF2細胞、Normal Rat Kidney-49F細胞 HOS (TE85, Clone F5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JurkatE6-1細胞、HGE細胞、OCI-Ly03細胞 Ramos.G6.C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-3T3細胞、ONS-76細胞、HUC細胞 HMrSV5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL11細胞、NCIH1437細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞 Swiss-3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1688細胞、Capan2細胞、HCC1395細胞 MC3T3-E1 epithelioid cells小鼠胚胎成骨細胞前體細胞系 H-2195細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-226細胞、Hs683細胞、D324 Med細胞 KTA-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3-Ag 1.2.3細胞、SK.MEL.28細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞 KYSE 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR1細胞、K562細胞、KYSE 30細胞 JCA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTC-200細胞、RN-c細胞、SNU-601細胞 "
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