"STO epithelioid cells小鼠胚胎纖維細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:STO是一株繼代生長(zhǎng)的胚成纖維細(xì)胞系,可用于制備飼養(yǎng)層細(xì)胞(feederlayers)和其他研究。 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過(guò)大生存空間不足而引起營(yíng)養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過(guò)三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長(zhǎng)成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。 H-838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCLP-1細(xì)胞、ACC3細(xì)胞、IMR 90細(xì)胞 CCC-ESF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1781細(xì)胞、Namalwa細(xì)胞、MB231細(xì)胞 HOS TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone M-3細(xì)胞、MDA-1386細(xì)胞、Pro-Lec1.3C細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 STO epithelioid cells小鼠胚胎纖維細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。如果一次無(wú)法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無(wú)菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無(wú)菌,不需再無(wú)菌過(guò)濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾,勿直接過(guò)濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無(wú)菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過(guò)濾。不建議用過(guò)濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因?yàn)闀?huì)阻塞過(guò)濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”:通常經(jīng)過(guò)熱處理之血清,沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”,常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會(huì)使此沈淀物增多,更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測(cè),又沒有污染。一般而言,此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長(zhǎng),但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號(hào)的血清。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 CPAE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSRC2細(xì)胞、LS411細(xì)胞、SW48細(xì)胞 H2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-812F細(xì)胞、MUVEC細(xì)胞、SuDHL 8細(xì)胞 LM-TK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTC細(xì)胞、ID8細(xì)胞、GC-2spd(ts)細(xì)胞 MKN-74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS 1598細(xì)胞、IHHA-1細(xì)胞、alpha-TC1-6細(xì)胞 WRL 68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAT2細(xì)胞、LIXC002細(xì)胞、U 138 MG細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 STO epithelioid cells小鼠胚胎纖維細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:成纖維細(xì)胞樣 細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來(lái)選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過(guò)夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過(guò)夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。 NCI-H-295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM932細(xì)胞、LN-229細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞 MDAMB435S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2/BBe 1細(xì)胞、TOV21細(xì)胞、NCI-SNU-520細(xì)胞 COLO-684細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 273細(xì)胞、NCI-SNU-668細(xì)胞、Hs852細(xì)胞 HEK/293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM5A細(xì)胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞 DOK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM12878細(xì)胞、Nthy ori 3.1細(xì)胞、NB-19細(xì)胞 CAL39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-UT-1細(xì)胞、RBE細(xì)胞、BT-20細(xì)胞 FOXNY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16/F1細(xì)胞、P815細(xì)胞、251 MG細(xì)胞 SACC-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM-TK-細(xì)胞、SGC996細(xì)胞、HCC-38細(xì)胞 NW38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1648細(xì)胞、MDA MB 361細(xì)胞、NTERA2-D1細(xì)胞 Hs 578.Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2107細(xì)胞、MPC-5細(xì)胞、HL-60細(xì)胞 STO epithelioid cells小鼠胚胎纖維細(xì)胞系 COV 504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGBEC細(xì)胞、NCI-H520細(xì)胞、L-132細(xì)胞 MFE 296細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK UT 1細(xì)胞、RPMI-7666細(xì)胞、NCI-SNU-1040細(xì)胞 U138MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT3細(xì)胞、Y3.AG.1.2.3細(xì)胞、MSTO-211 H細(xì)胞 SY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DBTRG-05MG細(xì)胞、BHT-101細(xì)胞、TE11細(xì)胞 SK-UT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-14細(xì)胞、3-LL細(xì)胞、HPAEpiC細(xì)胞 MRC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1155細(xì)胞、Hep-3B細(xì)胞、SNU-C2A細(xì)胞 MRC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1155細(xì)胞、Hep-3B細(xì)胞、SNU-C2A細(xì)胞 RBMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2 4510細(xì)胞、G401細(xì)胞、IPLB-SF-21-AE細(xì)胞 OCI-Ly01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 578Bst細(xì)胞、COLO 699細(xì)胞、E6-1細(xì)胞 HIT T-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL23細(xì)胞、SGC 7901細(xì)胞、SK RC 20細(xì)胞 Walker256-TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM239細(xì)胞、SW-954細(xì)胞、HN4細(xì)胞 HBVP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1793細(xì)胞、Panc-8_13細(xì)胞、Reuber H35細(xì)胞 KMST6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MH7A細(xì)胞、SUM102PT細(xì)胞、NB19-RIKEN細(xì)胞 MESSA Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PASMCS細(xì)胞、CCD19-Lu細(xì)胞、U251細(xì)胞 OC-316細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75_1細(xì)胞、HT-115細(xì)胞、alpha-TC1.6細(xì)胞 Hs 888Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 2G6 4C10細(xì)胞、KP2細(xì)胞、KYSE70細(xì)胞 293/EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-180細(xì)胞、Line 870 Emory University-4細(xì)胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞 RCC-JF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞、T47D細(xì)胞、EFM19細(xì)胞 JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 Cl 30細(xì)胞、RS4;11細(xì)胞、RC92A細(xì)胞 NCI-H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu 212細(xì)胞、SUD4細(xì)胞、CAL 12T細(xì)胞 NOZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H196細(xì)胞、NCI-H-69細(xì)胞、THP-1細(xì)胞 HRA-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H441細(xì)胞、aTC1-6細(xì)胞、HL 60細(xì)胞 Panc_03_27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/Taxol細(xì)胞、Strain KB細(xì)胞、GP293細(xì)胞 HFT 8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-85-1細(xì)胞、MPC 11細(xì)胞、HEC-151細(xì)胞 OCIAML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemia 1210細(xì)胞、HS-294細(xì)胞、HEL-92-1-7細(xì)胞 Hs 819.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPVECs細(xì)胞、NU-GC-3細(xì)胞、M3 Clone M-3細(xì)胞 SKM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QBC-939細(xì)胞、KBM-5細(xì)胞、NCIH647細(xì)胞 32Dc3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-M(TK-)細(xì)胞、BMSCs(mBMSCs)細(xì)胞、BE(2)M-17細(xì)胞 MC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUIT2細(xì)胞、PTK-2細(xì)胞、CAL-85-1細(xì)胞 Tca8113細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 695T細(xì)胞、SUDHL-5細(xì)胞、Tu-212細(xì)胞 HEK-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 2G6.4C10細(xì)胞、OCI-Ly19細(xì)胞、NPA'87細(xì)胞 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Carcinoma細(xì)胞、Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞、H727細(xì)胞 H2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:38C-13細(xì)胞、HIT T-15細(xì)胞、KB細(xì)胞 Hs 611.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞、P3/X63-Ag8細(xì)胞、HPAF/CD18細(xì)胞 GM03569B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1819細(xì)胞、HCC1588細(xì)胞、MOLT 3細(xì)胞 P3-X63.Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MonoMac 6細(xì)胞、SU-DHL-6細(xì)胞、BEL7405細(xì)胞 PC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK-2細(xì)胞、NCI-H1770細(xì)胞、NUGC3細(xì)胞 H1623細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY7細(xì)胞、HO-8910PM細(xì)胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞 STO epithelioid cells小鼠胚胎纖維細(xì)胞系 CCC-HEH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-GT-4細(xì)胞、Tn5 B1-4細(xì)胞、MESSADX5細(xì)胞 HCC1599細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO 81-1細(xì)胞、NCI/ADRRES細(xì)胞、SW 837細(xì)胞 MDA MB 231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y-R細(xì)胞、NBL-7細(xì)胞、SEG1細(xì)胞 COLO-684細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 273細(xì)胞、WIL2S細(xì)胞、HR8348細(xì)胞 "
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