"MS751 epithelioid cells人子宮頸表皮癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:這株細(xì)胞是J. Sykes于1974年建立的(參考ATCC HTB-33)。有報(bào)告稱MS751細(xì)胞含有人乳頭狀瘤病毒18 (HPV-18)序列。[22995] [23180]后來發(fā)現(xiàn)MS751細(xì)胞包含HPV-45基因組的一部分,而其中E6/E7區(qū)域表達(dá)呈poly(A)+RNA的形式。[49721] 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時。無法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點(diǎn)是:對細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 253J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3569細(xì)胞、Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞、RT4P細(xì)胞 NCI-SNU-475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-02-03細(xì)胞、Madison細(xì)胞、BHP-10細(xì)胞 SCL I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCW 100細(xì)胞、SF-295細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 MS751 epithelioid cells人子宮頸表皮癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細(xì)胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細(xì)胞生長挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長:二、細(xì)胞細(xì)化太過,細(xì)胞成片脫落,吹打時沒有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來的細(xì)胞放在一個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗(yàn):HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時間可適當(dāng)放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 MDA-MB-415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H23細(xì)胞、QSG7701細(xì)胞、H-1930細(xì)胞 MuM-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG細(xì)胞、KYSE 70細(xì)胞、CL34細(xì)胞 IPLB-Sf21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-2008細(xì)胞、HNTEC細(xì)胞、KYSE-510細(xì)胞 CT26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-EMC-SS細(xì)胞、GM03569B細(xì)胞、H-526細(xì)胞 639-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU-8988S細(xì)胞、CAL27細(xì)胞、NCI-H1435細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 MS751 epithelioid cells人子宮頸表皮癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁生長 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣 造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細(xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺做實(shí)驗(yàn)時,喜歡說話聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢! AD293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-T細(xì)胞、MV4:11細(xì)胞、ID8/MOSEC細(xì)胞 6-10B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ChA-1細(xì)胞、OVCA8細(xì)胞、SU-86-86細(xì)胞 MX1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BXPC3細(xì)胞、ASH-3細(xì)胞、Lu-65細(xì)胞 LSECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H295細(xì)胞、QGY7701細(xì)胞、DHL10細(xì)胞 Y-79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBT2細(xì)胞、DITNC1細(xì)胞、CX-1細(xì)胞 SUM52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AtT-20細(xì)胞、451Lu細(xì)胞、JM1細(xì)胞 ZR75-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1522細(xì)胞、SCC VII細(xì)胞、HEC1-B細(xì)胞 HT22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos細(xì)胞、Kato-III細(xì)胞、MDA-MB453細(xì)胞 DoTc2 4510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO201細(xì)胞、SACC-83細(xì)胞、T-47-D細(xì)胞 alphaTC clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L細(xì)胞、PK(15)細(xì)胞、Hs 683.T細(xì)胞 MS751 epithelioid cells人子宮頸表皮癌細(xì)胞系 NCI-SNU-886細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJSA-1細(xì)胞、MGC-803細(xì)胞、R 2 C細(xì)胞 QGY 7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H23細(xì)胞、HOPC細(xì)胞、MS1細(xì)胞 PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2009細(xì)胞、LWnt3A細(xì)胞、CL11細(xì)胞 CHP212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTV1細(xì)胞、T-98細(xì)胞、Farage Original Line細(xì)胞 G401細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu-8988s細(xì)胞、GM03571細(xì)胞、H322細(xì)胞 PZ-HPV-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-216細(xì)胞、174xCEM.T2細(xì)胞、HEK-293FT細(xì)胞 PZ-HPV-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-216細(xì)胞、174xCEM.T2細(xì)胞、HEK-293FT細(xì)胞 H2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞、N87細(xì)胞、210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞 JIMT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMel-28細(xì)胞、CL40細(xì)胞、Calu-6細(xì)胞 H-2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK 15細(xì)胞、NuTu-19細(xì)胞、HCC-1569細(xì)胞 OVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BLO-11細(xì)胞、SNB.19細(xì)胞、NCI-H711細(xì)胞 TOV-112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-626細(xì)胞、RWPE2細(xì)胞、RCSMC細(xì)胞 NPC-TW039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison lung細(xì)胞、HCC-1954細(xì)胞、Ramos (RA)細(xì)胞 REC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-82細(xì)胞、MDA-MB 361細(xì)胞、SY5Y細(xì)胞 JTC-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H460細(xì)胞、OS-RC-2細(xì)胞、MOLT-4細(xì)胞 SV40-MES13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KRC Y細(xì)胞、G519細(xì)胞、149 PT細(xì)胞 TMK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGHU3細(xì)胞、SF 295細(xì)胞、BOWES細(xì)胞 HSC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578-T細(xì)胞、EPC細(xì)胞、MPC-11細(xì)胞 MDA 231-LM2-4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞、Ca761細(xì)胞、H719細(xì)胞 H-510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-2 ad細(xì)胞、FHL124細(xì)胞、SK-BR3細(xì)胞 SN12-PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc08.13細(xì)胞、CNE-1細(xì)胞、108CC15細(xì)胞 SUDHL-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC-MSB-1細(xì)胞、HPAC細(xì)胞、MDA-MB415細(xì)胞 H-660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63細(xì)胞、WM266mel細(xì)胞、Y3-Ag123細(xì)胞 SW 1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2029細(xì)胞、T. 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