"KLE epithelioid cells人子宮內(nèi)膜癌細胞系 細胞背景資料:該細胞源自64歲子宮內(nèi)膜癌女性患者 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 SK-ML2細胞系相關產(chǎn)品:COR L279細胞、Sp2/0-Ag14細胞、J 111細胞 KATOIII細胞系相關產(chǎn)品:NCI-841細胞、Z310細胞、NIH:OVCAR-4細胞 SHSY-5Y細胞系相關產(chǎn)品:HEL-1細胞、SKLMS-1細胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞 細胞生長:貼壁 KLE epithelioid cells人子宮內(nèi)膜癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的衰老:體外細胞培養(yǎng)實驗證明:成纖維細胞:來自胎兒傳代50次后衰老死亡,來自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關;來自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細胞衰老過程中會發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時,細胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細胞衰老原因,尚無定論,出現(xiàn)過好幾種理論與假說,其中得到較廣泛認可的是“自由基損傷假說”。細胞凋亡:細胞的死亡是個體存活的正?,F(xiàn)象,常見的細胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細胞毒性。多細胞生物的生命活動中,因為環(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導致一部分細胞死去,稱為細胞的病理死亡,或細胞壞死。壞死是細胞暴露于嚴重的物理或化學刺激時導致的細胞死亡;細胞毒性是由細胞或者化學物質(zhì)引起的單純的細胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細胞死亡機理,如殺傷T細胞的細胞毒性作用。還有一種情況,一部分細胞的死亡是生物個體正常生命活動(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細胞死亡,是機體清除無用的或者不想要的細胞的手段。它與細胞壞死是兩個截然不同的過程,無論從形態(tài)學、生物學還是生化的特征來說,都有明顯的區(qū)別。細胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細胞凋亡與細胞增殖、分化和衰老起著互補與平衡的作用,在多細胞動物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關重要的角色。作為細胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結(jié)果將是可怕的:凋亡不足時,易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細胞凋亡及其機理具有重要的理論和實踐意義。 細胞傳代方法:1:3傳代,3-4天換液一次 Clone 15 HL-60細胞系相關產(chǎn)品:Hs-578Bst細胞、CW-2細胞、KU-19-19細胞 WI 38細胞系相關產(chǎn)品:GM-346細胞、MOLT-4細胞、Okayama University Medical School-27細胞 MSB1細胞系相關產(chǎn)品:LIPF178C細胞、HGC-27細胞、KPL1細胞 UO31細胞系相關產(chǎn)品:MHH-CALL-2細胞、MV-4:11細胞、293 HEK細胞 P31/FUJ細胞系相關產(chǎn)品:SNUC2A細胞、NFS-60細胞、MIA-Pa-Ca-2細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 KLE epithelioid cells人子宮內(nèi)膜癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮樣 造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細胞人多口雜,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! GM3190細胞系相關產(chǎn)品:RS4-11細胞、C17.2細胞、Hep 3B2.1-7細胞 HEK293-EBNA細胞系相關產(chǎn)品:Panc 2.03細胞、Hs746T細胞、U-937細胞 Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞系相關產(chǎn)品:SNU-869細胞、SK-Col-1細胞、D341細胞 3T3J2細胞系相關產(chǎn)品:UMRC2細胞、CAL-39細胞、HEK-293-FT細胞 CCD18細胞系相關產(chǎn)品:T-98G細胞、IM9細胞、NCI-H2110細胞 MDCC-MSB1細胞系相關產(chǎn)品:GA10細胞、CHO Lec1細胞、KE-37細胞 NS20-Y細胞系相關產(chǎn)品:F442-A細胞、HeLa229細胞、FM-88細胞 Fortner's melanotic melanoma #3細胞系相關產(chǎn)品:C4I細胞、AR4-IP細胞、NCI-H2347細胞 W256細胞系相關產(chǎn)品:HUC細胞、SNU-739細胞、SKMES1細胞 H-740細胞系相關產(chǎn)品:UACC 812細胞、H-1436細胞、HNE-2細胞 KLE epithelioid cells人子宮內(nèi)膜癌細胞系 IEC-6細胞系相關產(chǎn)品:AdHek細胞、OCI-LY-7細胞、Hs 839.T細胞 H-2141細胞系相關產(chǎn)品:67NR細胞、TK10細胞、bEND.3細胞 MCF.7細胞系相關產(chǎn)品:SKNEP1細胞、HCEC細胞、AGS細胞 MDA-MB-231-GFP細胞系相關產(chǎn)品:EJ細胞、LuCL4細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞 UACC 812細胞系相關產(chǎn)品:RL-952細胞、VMM5細胞、Tu212細胞 Hmy.2 CIR細胞系相關產(chǎn)品:Balb/c3T3細胞、NE1細胞、KYSE 450細胞 SCC25細胞系相關產(chǎn)品:Hs-940細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、P3-Jiyoye細胞 Duke University 145細胞系相關產(chǎn)品:M619細胞、D-283 Med細胞、Japanese Tissue Culture-39細胞 WM-2664細胞系相關產(chǎn)品:Mahlavu細胞、SNUC2B細胞、MDCK supertube細胞 BT 549細胞系相關產(chǎn)品:DU4475細胞、HS-729細胞、Mouse podocyte細胞 HCE細胞系相關產(chǎn)品:HEC-1-A細胞、SMA560細胞、LUDLU-1細胞 KY-270細胞系相關產(chǎn)品:B78細胞、H1688細胞、COV362細胞 APRE-19細胞系相關產(chǎn)品:HuTu-80細胞、RAW2647細胞、OCI-LY-1細胞 16HBE細胞系相關產(chǎn)品:MC38細胞、RASMC細胞、SNB.19細胞 BNL 1MEA.7R.1細胞系相關產(chǎn)品:CHO K1細胞、SF17細胞、NCTC 1469細胞 MCF 7細胞系相關產(chǎn)品:293-GP細胞、MyLa2059細胞、NCI-H2444細胞 293 HEK細胞系相關產(chǎn)品:FAO-1細胞、Huh 7.5細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞 Henrietta Lacks cells細胞系相關產(chǎn)品:IM 9細胞、OVHM細胞、MOLT16細胞 hTERT-HME-1細胞系相關產(chǎn)品:293-EBNA細胞、HGF-1細胞、KOPN-8細胞 LS-411N細胞系相關產(chǎn)品:N-87細胞、H1648細胞、MESSA細胞 P-388細胞系相關產(chǎn)品:ACC-3細胞、SKNBE2細胞、HLF細胞 UCW 100細胞系相關產(chǎn)品:RPTEC/TERT 1細胞、SW839細胞、TCam 2細胞 Mono Mac 1細胞系相關產(chǎn)品:BHP-10細胞、KE 37細胞、Leukemia 1210細胞 Normal Rat Kidney細胞系相關產(chǎn)品:526 mel細胞、HVSMC細胞、Hepa-RG細胞 RCM1細胞系相關產(chǎn)品:J-82細胞、RMS 1598細胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細胞 UPCI-SCC-154細胞系相關產(chǎn)品:C-28/I2細胞、NCIH209細胞、WM-115細胞 L6565細胞系相關產(chǎn)品:GM00637F細胞、MB157細胞、DU145細胞 SKMEL1細胞系相關產(chǎn)品:HL-60 Clone 15細胞、HCC1954BL細胞、CHO-Lec1細胞 RIN-14B細胞系相關產(chǎn)品:Uhth-74細胞、TE11細胞、TE10細胞 U266BL細胞系相關產(chǎn)品:HP615細胞、RMG1細胞、NOZ細胞 RAMOS2G64C10細胞系相關產(chǎn)品:McCoy細胞、MADB106細胞、U-87MG細胞 HRA19細胞系相關產(chǎn)品:UMNSAH-DF1細胞、SW-1463細胞、IGROV1細胞 Pfeiffer細胞系相關產(chǎn)品:L-Wnt-3A細胞、OCILY7細胞、MFHL-2細胞 DLD1細胞系相關產(chǎn)品:AgC11x3A細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞、Mahlavu細胞 MCF7細胞系相關產(chǎn)品:CHG5細胞、GES-1細胞、L132細胞 KMS-11細胞系相關產(chǎn)品:NOR10細胞、NCIH2106細胞、BT細胞 SK Mel 24細胞系相關產(chǎn)品:Earle's L cells細胞、SNK-6細胞、Mono Mac 6細胞 U373-MG細胞系相關產(chǎn)品:Human Melanoma Cell Bowes細胞、HCC1954細胞、Me-Wo細胞 Human Epithelioma-2細胞系相關產(chǎn)品:HCC-1171細胞、SNK6細胞、TEV-1細胞 SW 1463細胞系相關產(chǎn)品:HCC202細胞、H-345細胞、GT38細胞 MDCK.2細胞系相關產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-10A細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞、Hep G2-Luc細胞 BMU-S1細胞系相關產(chǎn)品:Caco 2細胞、NCI-H1781細胞、SW 982細胞 HPDLF細胞系相關產(chǎn)品:HCC2935細胞、MLO-Y4細胞、J774 A.1細胞 NCI660細胞系相關產(chǎn)品:87 MG細胞、NCI-H23細胞、MV 4;11細胞 SW837細胞系相關產(chǎn)品:MRC 5細胞、293AD細胞、EBC-1細胞 SK-MEL-28細胞系相關產(chǎn)品:HSF細胞、AQ-Mel細胞、4-1st細胞 CTLL(2)細胞系相關產(chǎn)品:KU-19-19細胞、SLMT-1細胞、MC9細胞 MDCKII-WT細胞系相關產(chǎn)品:MMAc-SF細胞、HRGEC細胞、JVM2細胞 Ly19細胞系相關產(chǎn)品:CRFK細胞、SuperTube細胞、NB9細胞 MOLT 4細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H676B細胞、NBLAN5T細胞、TMK-1細胞 Clone 166細胞系相關產(chǎn)品:CCD-33Co細胞、COLO 320F細胞、SV40 MES 13細胞 KLE epithelioid cells人子宮內(nèi)膜癌細胞系 MEL細胞系相關產(chǎn)品:RS411細胞、QGP1細胞、TE 85 ClF-5細胞 Roswell Park Memorial Institute 2650細胞系相關產(chǎn)品:LPC-H12細胞、NCIH1838細胞、Caco-2/ATCC細胞 H-838細胞系相關產(chǎn)品:CCLP-1細胞、NCI-H1623細胞、MC38細胞 Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞系相關產(chǎn)品:SNU-869細胞、PC 12細胞、HTori-3細胞 "
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