"HBL-100 epithelioid cells人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞由E.V.Gaffney及其同事從一位沒有乳癌家族史的供者乳汁中建立,培養(yǎng)出來的細(xì)胞染色體組型在第7代時就不正常;電鏡照片顯示有微絲、張力原纖維和橋粒;Southern轉(zhuǎn)移表明有整合型SV40病毒基因,當(dāng)作正常細(xì)胞。 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項:1.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈,消毒半小時以上。2.進(jìn)入凈化室前先關(guān)閉紫外燈,打開超凈臺風(fēng)機(jī),等待30min以上,以排盡臭氧。3.穿好隔離衣,戴好口罩,帽子。4.風(fēng)淋2分鐘。5.0.1%水泡手,擦干。6.點燃酒精燈;超凈臺內(nèi)應(yīng)避免放入過多的物品;使用的吸管,滴管,試管,培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。7.打開各類瓶蓋前先過火,以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰,鑷子使用前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼。8.水平式風(fēng)機(jī)的超凈臺,應(yīng)使瓶口斜置,應(yīng)盡量避免瓶口敞開直立。9.同一根吸管或滴管不應(yīng)連續(xù)用于幾個不同的細(xì)胞系;吸取培養(yǎng)基的吸管應(yīng)離開培養(yǎng)瓶或試管口0.5cm,避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口;以防止細(xì)胞系的互相混雜污染。10.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體,立即用酒精棉球擦凈。11.操作完畢后恢復(fù)工作臺面。 OSKM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMEC/D3細(xì)胞、Hs 839.T細(xì)胞、CCD-841-CoTr細(xì)胞 SW982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞、HEI-193細(xì)胞、HS 1.Tes細(xì)胞 ELD-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP-1細(xì)胞、22Rv-1細(xì)胞、BT-483細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 HBL-100 epithelioid cells人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴(yán),浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細(xì)胞懸液,裝入離心管中,再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液,吹打使細(xì)胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細(xì)胞時,處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請立即通知細(xì)胞實驗室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞回溫至37°C,并讓運送過程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中,或細(xì)胞已長滿盤,則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 GLC-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLCMK2細(xì)胞、INS-1E細(xì)胞、He-La細(xì)胞 HL-60 Clone 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHUA細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞、TE-6細(xì)胞 Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B10BR細(xì)胞、C-33A細(xì)胞、HuH 6細(xì)胞 CHO/dhFr-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDBK細(xì)胞、NOK細(xì)胞、HT 115細(xì)胞 Hs934T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit-225-K6細(xì)胞、hRPTC細(xì)胞、HEK293F細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 HBL-100 epithelioid cells人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁生長 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣 如何進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇:1)從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時搖動令其盡快融化;2)從37℃水浴中取出凍存管,打開蓋子,用吸管吸出細(xì)胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,混勻;3)離心,1000rpm,5min;4)棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,計數(shù),調(diào)整細(xì)胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);5)次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)?!緶剀疤嵝选浚?從增殖期到形成致密的單層細(xì)胞以前的培養(yǎng)細(xì)胞都可以用于凍存,但為對數(shù)生長期細(xì)胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液;2)將凍存管放入液氮容器或從中取出時,要做好防護(hù)工作(戴棉手套),以免凍傷;3)凍存和復(fù)蘇用新配制的培養(yǎng)液。細(xì)胞復(fù)蘇的時候,有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后,放在室溫下,經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸,該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎?其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細(xì)節(jié)要注意的?一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口,再稍擰松蓋子,再放37度水浴鍋中搖溶,在將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到裝有37度預(yù)熱過的培養(yǎng)基的試管中,迅速離心,再用培養(yǎng)基洗一遍。 SKG-IIIa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE80細(xì)胞、BC-019細(xì)胞、H-2196細(xì)胞 PJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HRI細(xì)胞、SNU-878細(xì)胞、HOP 62細(xì)胞 Caco 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEM-L細(xì)胞、hSCC-25細(xì)胞、FRO細(xì)胞 1E8-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 7666細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞、LNCaP細(xì)胞 HANK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA-38細(xì)胞、H-1781細(xì)胞、NCI-H322細(xì)胞 H28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1618細(xì)胞、HOK細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞 Hs 606.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-16細(xì)胞、TM3細(xì)胞、HDSMC細(xì)胞 Oregon J-111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGC6細(xì)胞、hTERT-HME1細(xì)胞、ARIP細(xì)胞 MCF-7/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 62細(xì)胞、CRFK細(xì)胞、SCC9細(xì)胞 RASMCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2932細(xì)胞、JIMT1細(xì)胞、SKNBE2C細(xì)胞 HBL-100 epithelioid cells人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞系 RBL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMAc.SF細(xì)胞、NK92MI細(xì)胞、H747細(xì)胞 MUTZ3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero-76細(xì)胞、HCC202細(xì)胞、HUCCT1細(xì)胞 NCl-H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-027細(xì)胞、HITT15細(xì)胞、MDA-134細(xì)胞 HLCL9B10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1599細(xì)胞、8402細(xì)胞、BSC40細(xì)胞 NCIH2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1.0細(xì)胞、SK-N-BE(1)細(xì)胞、LA 4細(xì)胞 LNCaP-FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL26細(xì)胞、NCI-H250細(xì)胞、RA 1細(xì)胞 LNCaP-FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL26細(xì)胞、NCI-H250細(xì)胞、RA 1細(xì)胞 Rh30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 115細(xì)胞、Ramos.G6.C10細(xì)胞、JM-Jurkat細(xì)胞 Hs-606-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKES1細(xì)胞、NCIH1838細(xì)胞、LP-1細(xì)胞 A.704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-EBNA細(xì)胞、16HBE140細(xì)胞、HSC-2細(xì)胞 SW-620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L51細(xì)胞、CHO/dhFr-細(xì)胞、SW1088細(xì)胞 H9c2(2-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE296細(xì)胞、PLCPRF5細(xì)胞、HCC0044細(xì)胞 A 253細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31 FUJ細(xì)胞、HFLS-RA細(xì)胞、FOXNY細(xì)胞 T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC.1細(xì)胞、H295R細(xì)胞、CNE2Z細(xì)胞 HeLa/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320細(xì)胞、KATO 3細(xì)胞、L-6 myoblast細(xì)胞 SW-1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDBK (NBL-1)細(xì)胞、IM 9細(xì)胞、NR 8383細(xì)胞 LN-382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:W256細(xì)胞、SVGp12細(xì)胞、U-266細(xì)胞 NCIH250細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH322細(xì)胞、8305-C細(xì)胞、SNU-761細(xì)胞 NCI-H1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLMVEC細(xì)胞、Colon 38細(xì)胞、RIN Cl-5F細(xì)胞 DKMG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR8383.1細(xì)胞、ECC 12細(xì)胞、Hs821T細(xì)胞 GM00215A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOSEpiC細(xì)胞、H2122細(xì)胞、GM02219D細(xì)胞 CTLL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa-S3細(xì)胞、CCRF SB細(xì)胞、NCI-H125細(xì)胞 H-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK2 (E6/E7)細(xì)胞、E304細(xì)胞、NCI-H1048細(xì)胞 TM-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAC-P4C細(xì)胞、HEC-1-B細(xì)胞、CCD966SK細(xì)胞 HEK-293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECV-304細(xì)胞、U-373 MG細(xì)胞、KPL-4細(xì)胞 SNU16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL39細(xì)胞、FL 62891細(xì)胞、RIN14B細(xì)胞 DHL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 BL6細(xì)胞、HCC-366細(xì)胞、PL-12細(xì)胞 COR-L 105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP212細(xì)胞、MDCKII細(xì)胞、HCCLM3細(xì)胞 SUM102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-920細(xì)胞、TE 354.T細(xì)胞、Chang liver細(xì)胞 MuM-2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs688(A)T細(xì)胞、Calu6細(xì)胞、OV2008細(xì)胞 H1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV1細(xì)胞、HT55細(xì)胞、NL20細(xì)胞 GM05862細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1404細(xì)胞、Hs695T細(xì)胞、OVCA-433細(xì)胞 CAMA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-7702細(xì)胞、MX-1細(xì)胞、2V6.11細(xì)胞 Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHP77細(xì)胞、MC3T3E1細(xì)胞、MX1細(xì)胞 DH82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM-95細(xì)胞、J774 A1細(xì)胞、NCIH1793細(xì)胞 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