"LNCaP epithelioid cells人前列腺癌細胞系 細胞背景資料:該細胞由HoroszewiczJS于1977年從一名50歲的明確診斷為轉(zhuǎn)移性前列腺癌的白人男性患者的左鎖骨上淋巴結(jié)細針穿刺的活體組織中分離建立的。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 CL 1-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFT-8810細胞、U373-MG細胞、NCI-H292細胞 N-Tera-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL-2H3細胞、IEC 18細胞、PC-3M IE8細胞 COLO-320細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-12細胞、LLCMK2細胞、SSP-25細胞 細胞生長:貼壁 LNCaP epithelioid cells人前列腺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞學在生命科學科中起著至關(guān)重要的作用,近年來細胞學蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進展,細胞實驗室的構(gòu)建也是各個院校生物學科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復(fù)雜,需要的實驗設(shè)備種類繁多,下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內(nèi)毒素直接參與細胞凋亡,血清中內(nèi)毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高,會直接導(dǎo)致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質(zhì)量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour,再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾毎麅龃婀苄枰⒓捶庞冢常贰嫠≈锌焖購?fù)蘇之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材:細胞實驗中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。 細胞傳代方法:1:2傳代 Vx-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT3細胞、GL-261細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞 SMMC-7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD841CoN細胞、NCIH1651細胞、L Wnt-3A細胞 OUMS-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE270細胞、H774細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞 MHCC 97-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIT-1細胞、SW-626細胞、16HBEo-細胞 H1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW-nu-1細胞、SVEC 4-10細胞、SK Mel 1細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 LNCaP epithelioid cells人前列腺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮樣;梭形 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 HSC 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P1-Raji細胞、YES2細胞、SNU368細胞 P3-NS1/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHLF細胞、NCI-H524細胞、Caco 2細胞 174xCEM.T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H446細胞、GA10細胞、H-460細胞 NFHIOSE-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、RBL2H3細胞、COLO394細胞 C32 mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSA-DX5細胞、C1R細胞、NGEC細胞 GA-10 clone 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P388.D1細胞、Hs 636 T細胞、SNU-869細胞 SNU-354細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK RC 20細胞、Ketr-3細胞、NCTC-1469細胞 KP-N-NS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV 1細胞、NTERA-2cl.D1細胞、OVCAR420細胞 Calu-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GTL-16細胞、SW-13細胞、GM06141細胞 CCRF/CEM-C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SLMT-1細胞、COLO206細胞、SCCVII/St細胞 LNCaP epithelioid cells人前列腺癌細胞系 P3-X63-Ag 8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1618細胞、NBLS細胞、TGW細胞 HDQ-P1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT.116細胞、A-673細胞、HIEC細胞 GTL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H35 Reuber細胞、SNG-M細胞、Colo205細胞 MAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH820細胞、TF1細胞、RBL細胞 Gejiu Lung Carcinoma-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1395細胞、87 MG細胞、OCILY-3細胞 HMy2.CIR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 Ag8.653細胞、OCI/AML3細胞、MC-38細胞 HMy2.CIR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 Ag8.653細胞、OCI/AML3細胞、MC-38細胞 C4-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-II-E-C3細胞、FRO81-2細胞、LCD細胞 COLO.205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3細胞、RCM1細胞、NCI-1155細胞 SK HEP 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HcaF細胞、Wien-133細胞、CAMA-1細胞 B16 F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL33細胞、H-1703細胞、LC-MS細胞 MARC 145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CoCL2細胞、CP70細胞、T-T細胞 MLOY4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC615.3細胞、GM346細胞、GM00346細胞 RD-ES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC1細胞、H-810細胞、OCI-AML-4細胞 NFS60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT-125細胞、PLC PRF 5細胞、P1-Raji細胞 DLD 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3細胞、MCF-12A細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞 TE-85細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calf Pulmonary Artery 47細胞、MDCK Type II細胞、COLO-320細胞 HFSF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:526-mel細胞、C4-I細胞、TE15細胞 SNU216細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MyLa 2059細胞、DI-TNC1細胞、HeLa細胞 PT-K75細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM5細胞、NCIH548細胞、HMVEC細胞 T1-73細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PM6細胞、C12細胞、CL MC/9細胞 GM637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly19細胞、DMS273細胞、H865細胞 IOSE29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32r細胞、SCC7細胞、CORL26細胞 QG56細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EVSA/T細胞、U-343MG細胞、Neuro2a細胞 GDM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7-GFP細胞、B16 melanoma F10細胞、UWB1289細胞 QGY-7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 93細胞、CAL 12T細胞、U20S細胞 SNU423細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-10細胞、GOTO細胞、EFM192A細胞 Farage OL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F-36P細胞、SK-RC 52細胞、SK-MEL5細胞 HCC-1143細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、VMCUB-1細胞、M-07e細胞 H-3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1080細胞、RL95細胞、B16-F10--RED細胞 HFF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL 1ME A.7R.1細胞、MB39細胞、H295R-S1細胞 JC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H157細胞、THEECs細胞、MDCKII-WT細胞 NCIH1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1573細胞、OCIAML5細胞、MDCC-MSB1細胞 MHCC 97細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL2細胞、EL-4細胞、MDA-kb2細胞 SKNEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuLEC-5a細胞、KM-12細胞、786-O細胞 MCA 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1417細胞、Vero-E6細胞、SCL1細胞 COLO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 766T細胞、OACP4 C細胞、Hs-675-T細胞 KALS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH209細胞、2BS細胞、Cloudman S91 melanoma細胞 KALS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH209細胞、2BS細胞、Cloudman S91 melanoma細胞 NIH3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-U1細胞、266 Bl細胞、TE-4細胞 GM03571細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Rhesus Kidney-4細胞、HCC-1395細胞、SU86.86細胞 LY-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ1細胞、A498細胞、Colon-26細胞 HCC-4006細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU869細胞、H-841細胞、Suzhou Human Glioma-44細胞 C28/I2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO/dhFr-細胞、Hos TE-85細胞、526 mel細胞 HNE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RINm5F細胞、TE-14細胞、AX-Mel細胞 OV90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McG-1細胞、Hs 821.T細胞、PANC-03-27細胞 DanG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:207細胞、TGW細胞、T2(174 x CEM.T2)細胞 T-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ML2細胞、Walker 256細胞、BL-6細胞 H-2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA433_Bast細胞、RKO-AS-45-1細胞、Panc 02細胞 PNT1/A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1599細胞、Hs729T細胞、NRK-49F細胞 C3H/10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIMT-1細胞、SF763細胞、RTMC細胞 LNCaP epithelioid cells人前列腺癌細胞系 CHO-ori細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL 62891細胞、X63-Ag 8.6.5.3細胞、HCASMC細胞 NCIH1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 480細胞、HUT-28細胞、EFM192B細胞 P3 88 D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC-14細胞、SL-29細胞、H-847細胞 174xCEM.T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H446細胞、NCIH1930細胞、HCT15細胞 "
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